人穿孔素在杆状病毒中的克隆和表达

穿孔素是机体免疫系统中具有免疫杀伤作用的一种重要效应物质,由于昆虫杆状病毒表达系统和原核表达系统相比能对表达产物进行翻译后加工,所以选择昆虫细胞真核表达人穿孔素,交人穿孔素基因插入杆状病毒转移载体pAcSecG2T中和野生昆虫杆状病毒共转染 sf9细胞,筛选得重组病毒,在sf9细胞中分泌表达含凝血酶位点的GST－hp融合蛋白,产物呈现钙依赖的溶红细胞活性,并且经Dot-Blot检测表明具有免疫活性。     

黄芪注射液对实验性病毒性心肌炎穿孔素表达及心肌损害的影响

为探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎的疗效及其机制。将Balb/C鼠24只腹腔感染CVB3亲心肌细胞株后，随机分为两组；黄芪治疗组（黄芪注射液10g/kg&;#183;d腹腔注射）对照组。实验第8天留取心肌标本，进行心肌病理检查和心肌穿孔素mRNA逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）分析。结果显示：（1）黄芪治疗组心肌病变积分明显低于对照组（1.70&;#177;0.51比2.98&;#177;0.54,P&;lt;0.01)；（2）黄芪治疗组心肌穿孔素mRNA的表达明显低于对照组（1.10&;#177;0.07比1.31&;#177;0.12,P&;lt;0.01)；（3）心肌穿孔素mRNA表达水平与心肌病变积分呈显著正相关（r=0.88,P&;lt;0.01)。结论：穿孔素介导的细胞毒性作用可能在病毒性心肌炎的发病中起重要作用。黄芪注射液可能具有抗病毒，调节免疫和减轻心肌损伤的作用。     

小鼠螺旋神经节发育过程中胰岛素样生长因子-1表达的变化

目的观察胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在小鼠螺旋神经节发育过程中的表达和分布特点,探讨其生物学特性及意义。方法制作耳蜗组织切片,采用多重荧光免疫组织化学染色方法,激光共聚焦显微镜观察小鼠出生后12 d的IGF-1在耳蜗螺旋神经节的分布和定位。应用Western blot及Real-time PCR法检测新生小鼠螺旋神经节在出生后不同时期IGF-1蛋白及IGF-1 mRNA的表达水平。结果 IGF-1在小鼠耳蜗发育期中在螺旋神经节均有表达,表达在整个细胞体上。小鼠耳蜗螺旋神经节的IGF-1蛋白及IGF-1 mRNA表达水平随着出生年龄增加而逐渐减少。结论 IGF-1在小鼠耳蜗发育期中在耳蜗螺旋神经节均有表达。表达量随着出生年龄增加而逐渐减少。推测其可能通过旁分泌和自分泌方式在局部发挥其功能,在内耳细胞增殖中可能起重要信号转导作用。     

重组hIL-2腺病毒在体外癌细胞中的表达

为鉴定已构建的重组ｈＩＬ－腺病毒在体外的感染和表达活性,体外转导人多种癌细胞系,通过ＥＬＩＳＡ法测定所表达ＩＬ－２的量,ＭＴＴ法测定所表达ＩＬ－２的活性。结果发现ＡｄｖＩＬ－２能高效转导癌细胞,并检测到有１０ｎｇ水平ＩＬ－２表达,持续时间为３周左右。     

黄芪多糖对烧伤小鼠细胞免疫功能的作用

应用小鼠烧伤模型，对黄芪多糖（ＡＰＳ）的免疫增强作用进行了体内外研究。结果表明：体内应用ＡＰＳ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１，ｑｄ，连续５ｄ），可明显提高烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ的表达；体外分别应用５０、１００、２５０ｍｇ·Ｌ－１的黄芪多糖，发现其可纠正烧伤小鼠Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２的产生及ＩＬ－２Ｒ表达的受抑状态，并促进巨噬细胞产生ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，且呈剂量依赖关系；体外去除烧伤小鼠脾细胞中的巨噬细胞后，ＡＰＳ对Ｔ淋巴细胞转化，ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用消失。提示ＡＰＳ对烧伤小鼠的免疫调节作用依赖于巨噬细胞，通过调节其分泌ＩＬ－１，抑制ＰＧＥ２合成，而促进ＩＬ－２产生及ＩＬ－２Ｒ表达，进而增强Ｔ淋巴细胞增殖。     

斑秃患者淋巴细胞CD54分子表达的研究

为为了解淋巴细胞粘附分子与斑秃发病的关系。应用ＦＡＣＳｃａｎ流式的细胞仪，对斑秃患者外周血淋巴细胞ＣＤ５４分子的表达进行了定量研究。结果显示：１．斑秃患者的淋巴细胞ＣＤ５４表达量较对照组显著增高。２．全秃患者淋巴细胞ＣＤ５４分子表达量明显高于局限性患者。３．患者淋巴细胞ＣＤ５４分子表达与病程长短无关。提示淋巴细胞粘附分子可能在斑秃发病中起重要作用。     

喉鳞癌组织中P53和bc1—2蛋白的表达

用免疫组化ＬＳＡＢ法对５３例喉鳞状细胞癌（ＬＳＣＣ）癌组织的Ｐ５３和ｂｃ１－２蛋白表达进行了检测。结果表明５３例ＬＣＳＳ中２５例（４７．１７％）突变型Ｐ５３蛋白表达为阳性，同时一些癌旁不典型增生上皮中也有Ｐ５３表达，说明突变型Ｐ５３表达可能是ＬＳＣＣ发展的早期事件。此外，在所有检测病例中ｂｃ１－２蛋白表达率为６９．８１％（３７／５３），ｂｃ１－２蛋白表达和Ｐ５３蛋白表达间未见到相关关系     

溃疡性结肠火异位表达PS2蛋白的检测及意义

目的 探讨ＰＳ２蛋白在溃疡性结肠炎组织中异位表达的意义。方法 用免疫组织化学法检测了３０例溃疡性结肠炎和２８名正常人结肠组织中ＰＳ２和ＣＥＡ的表达。结果 显示３０例溃疡性结肠炎ＰＳ２蛋白阳性的７例,阳性率２３．３％,ＰＳ２只在伴有不典型增生的溃疡性结肠炎中表达;而ＣＥＡ阳性的２２例,阳性率７３．３％。２８名正常人结肠组织中ＰＳ２阳性的１例,ＣＥＡ阳性的２例。结论 ＰＳ２蛋白在溃疡性结肠炎组织中的异     

薄荷醇在经皮给药系统中的应用

薄荷醇为单萜类化合物 ,常添加于皮肤外用制剂中 ,发挥局部止痒、止痛、清凉及轻微局麻等作用。近几年研究发现 ,薄荷醇在经皮给药系统 (ＴＴＳ)中有显著的促渗作用。现将近年来有关薄荷醇在ＴＴＳ中的应用综述如下。１薄荷醇作为促渗剂的单独应用１ １解热镇痛药１ １ １水杨酸 :徐伟等［１］ 用离体小鼠背部皮肤研究了薄荷醇对水杨酸的透皮吸收效果 ,结果在２、４、６、８、１０、１２ｈ各时间点含１ ５ %薄荷醇的水杨酸溶液透皮累积量都明显高于不含薄荷醇的水杨酸溶液 (ｎ＝６ ,Ｐ＜０．０１)。其中 ,１２ｈ时的透皮累积量分别为 (１ ２…     

甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中HMGB1表达的影响

目的：探讨甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中小鼠肝组织高迁移率族蛋白 B1（HMGB1）表达的影响。方法取雄性昆明种小鼠72只,随机分为正常对照组、急性肝功能衰竭组及甘草酸二铵治疗组。模型组及治疗组予 D-Galn 500 mg／kg 及 LPS 10μg／kg 腹腔注射建立急性肝功能衰竭小鼠模型,并于建模1 h 后予以甘草酸二铵70 mg／kg 对治疗组小鼠进行灌胃处理,正常对照组及模型组予等量生理盐水灌胃。以建模后4,8,12,24 h分别取静脉血以常规生化方法检测小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）水平,HE 染色法检查肝组织病理学变化,采用免疫组织化学法及实时荧光定量 PCR 检测小鼠肝组织中 HMGB1的蛋白表达量及 mRNA 水平。结果模型组及治疗组小鼠血清 ALT 和 AST 水平均显著高于正常对照组（P ＜0．01）,且模型4,8 h 组小鼠血清 ALT 和 AST 含量均高于相应治疗组（P ＜0．05）,模型8,12,24 h 组及甘草酸二铵治疗12,24 h组小鼠血清 TBIL 水平均显著高于正常对照（P ＜0．05）。免疫组化结果发现,模型8,12,24 h 组及治疗8,12,24 h组小鼠肝组织中 HMGB1蛋白表达水平较相应正常对照组显著增加（P ＜0．01）,且随肝衰竭发展明显增加,模型8,12 h 组 HMGB1蛋白表达量高于相应甘草酸二铵治疗组（P ＜0．05）。Real time-PCR 结果显示,模型组和治疗8,12,24 h 组小鼠肝组织 HMGB1 mRNA 表达量高于正常对照组（P ＜0．05）,模型8 h、12 h 组 HMGB1 mRNA 表达量高于相应治疗组（P ＜0．05）。结论 HMGB1在小鼠急性肝功能衰竭过程中发挥了重要作用。甘草酸二铵可能通过抑制 HMGB1的产生减轻肝损伤。