醒鼻凝胶剂中丹皮酚的提取工艺研究

醒鼻凝胶剂是在福建中医学院附属人民医院名老中医黄守林主任治疗鼻炎的验方基础上改进而成的新型鼻用制剂，其君药为徐长卿。徐长卿为萝摩科植物徐长卿Cynanchumpaniculatum（Bge）Kitag．的根及根茎，具有祛风化湿，止痛止痒等功效，其主要有效成分为丹皮酚（paeon01）和皂苷类等。丹皮酚的熔点为49．5℃-50℃，易挥发，能溶于热水，但在冷水中水溶性差，故丹皮酚的提取多采用水蒸气蒸馏法。由于文献报道的徐长卿中丹皮酚的最佳提取工艺不适合于醒鼻凝胶剂的制备，而丹皮酚提取工艺的优劣直接影响到制剂的质量。因此，为了提高徐长卿中丹皮酚的提取率，保证制剂质量，从而确保临床疗效，本实验采用正交试验设计法考察了影响丹皮酚提取率的主要因素，并从中得到适合于生产的最佳提取工艺。     

中药制剂中丹皮酚包合工艺的研究

目的:研究β- 环糊精包合丹皮酚的最佳工艺.方法:用超声法制备丹皮酚-β-环糊精包合物,用紫外分光光度法测定其包封率和收得率.以包合物收得率和包封率为指标, 采用正交试验优选β-环糊精包合丹皮酚的条件.结果:最佳制备工艺为丹皮酚:β-环糊精1∶ 8,超声时间为30 min,包合温度为60 ℃.结论:采用最佳工艺制备的包合物收率高, 可大大提高丹皮酚的稳定性.     

牡丹皮中丹皮酚提取工艺及包合工艺的研究

目的采用水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中的丹皮酚。方法以丹皮酚的提取率为考察指标,以加水量、氯化钠用量、提取时间作为考察的3个主要因素,通过L9(34)正交试验法优化牡丹皮中丹皮酚的最佳提取工艺条件。包合工艺在前人研究基础上进一步考察了β-环糊精与水的比例。结果最佳提取工艺为24倍加水量,5%氯化钠,提取时间2 h;包合工艺中β-环糊精与水的比例确定为1∶6。结论该提取工艺简便、快速,具有一定的可行性,可以作为牡丹皮中丹皮酚的提取工艺。该包合工艺可以提高丹皮酚的包封率。     

醒鼻凝胶剂的制备及丹皮酚的含量测定

目的制备醒鼻凝胶剂并探讨其质量控制。方法采用HPLC法对其主药徐长卿中丹皮酚进行含量测定。结果制成的醒鼻凝胶剂质地均匀细腻,稠度适中,涂展性好;丹皮酚的含量测定符合要求。结论醒鼻凝胶剂制剂的制备方法简单,使用方便,重现性好,制剂质量可控。     

丹皮酚β-环糊精包合物的制备工艺研究

目的建立丹皮酚β-环糊精包合物的制备工艺。方法以包合物收得率和包合率为指标,采用正交试验优选β-环糊精包合丹皮酚的条件,在此条件下,采用3种不同的包合工艺制备丹皮酚环糊精包合物,并对pH和HPMC对包合的影响进行了研究。结果1份丹皮酚用6份量的乙醇溶解后,以每小时1/30V的速度加入45℃10份量β-环糊精的饱和溶液中,搅拌包合至包合物形成,包合率可达80%,包合物收率可达75%以上;不同pH、HPMC下,丹皮酚相溶解曲线呈AL型,不同的pH和HPMC条件下包合稳定常数差异较大。结论采用优化的饱和溶液法及工艺条件制备包合物,包合率与收率高、工艺简单、设备要求不高,适用于工业化生产。pH2.5、0.5%HPMC条件可进一步增强药物与环糊精的包合作用。     

丹皮酚-β-环糊精包合物的制备工艺研究

目的：优选丹皮酚β-环糊精包合物的最佳制备工艺。方法：采用正交试验法,以包合物收率、包合率为评价指标,优选包合时间、包合温度、主客分予投料比,确定最佳包合条件。结果：最佳包合条件为：包合4．5h,温度为60℃,主客投料比为10：1。结论：优选的包合工艺条件可行。     

清热凉血颗粒制备工艺的研究

目的 建立清热凉血颗粒的制备方法。方法 对水溶性成分，以绿原酸和浸膏收率为指标；对醇溶性成分丹皮酚制备β-环糊精包合物，以收率和包合率为指标，采用正交试验优选提取工艺。结果 水溶性成分提取的最佳工艺为用8倍量水，每次提取2次，共提取3次。最佳包合工艺为β-CD与丹皮酚配比为10：1，包合温度为50℃，包合时间为5h。结论 本方法适用于清热凉血颗粒的制备。     

微波提取徐长卿中丹皮酚的工艺研究

目的考察微波提取徐长卿中丹皮酚的影响因素,设计微波提取的最佳工艺。方法设计L9（3^4）正交实验,安排辐射温度、辐射时间、乙醇浓度、溶媒倍数4个因素考察,以HPLC法检测。结果丹皮酚的最佳提取工艺为提取温度70℃、提取时间4min、乙醇浓度40％和料液比1：40。结论用本实验方法提取丹皮酚,效率高,时间短,是提取丹皮酚的好方法。     

徐长卿中异丹皮酚的结构测定

徐长卿是常用中草药。其化学成分研究除对主要活性成分丹皮酚有报道外,未曾报道其他成分。本文分离到的七个化合物是硬脂酸癸酯、蜂花烷、十六烯、D-赤丝草醇、β-谷甾醇、丹皮酚及异丹皮酚。     

徐长卿煎煮过程中的化学变化研究

目的：全面了解徐长卿煎煮前后生药及煎液中丹皮酚及其它有效成分含量随时间的变化。方法：煎煮过程中收集挥发油,用GC／MS进行定性分析,结果计算机检索技术,对化学成分进行分离鉴定,NIST化合物谱库检索,应用色谱峰面积归一法测定各成分的相对含量;利用活性成分追踪分析方法对徐长卿煎煮前后生药及煎液中丹皮酚及其它有效成分含量随时间的变化进行了研究。结果：从徐长卿挥发油中分离并鉴定出20种成分,其挥发油成分主要是丹皮酚,生药煎煮后丹皮酚的含量随煎煮时间延长而直线下降,煎煮液中的多糖随煎煮时间的延长而增多,丹皮酚氧化产物及其它成分随时间延长而增加,药液颜色随煎煮时间延长而加深呈褐红色。结论：煎煮加速丹皮酚的挥发和氧化,徐长卿的有效成分除丹皮酚外,还应有多糖等成分。     

徐长卿丹皮酚对兔膝关节软骨细胞凋亡及相关基因的影响

目的观察徐长卿丹皮酚对兔膝关节软骨细胞凋亡及其调控基因P53、Bcl-2表达作用的影响。方法将40只大耳白兔随机分为正常组、模型组、生理盐水组、曲安奈德组、徐长卿丹皮酚组。采用内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎模型,造模成功后,给药组关节腔注射相应药物,给药5周后取材。两步法免疫组化染色观察关节软骨形态变化,原位末端标记检测关节软骨细胞凋亡率,免疫荧光检测软骨组织P53、Bcl-2蛋白表达。结果模型组Mankin评分、软骨细胞凋亡率明显升高(P0.01)。而徐长卿丹皮酚组和曲安奈德组软骨组织Mankin评分、软骨细胞凋亡率相比模型组降低(P0.05),但仍高于正常组(P0.01)。模型组软骨组织中P53、Bcl-2表达率均升高(P0.05,P0.01)。徐长卿丹皮酚组和曲安奈德组软骨组织中Bcl-2表达升高,而P53表达率降低(P0.05),其中徐长卿丹皮酚组升高Bcl-2的效果更显著(P0.01)。结论徐长卿丹皮酚能在一定程度上抑制骨性关节炎软骨细胞的过度凋亡,其对损伤关节软骨的修复作用可能与调节P53和Bcl-2的表达有关。     

徐长卿丹皮酚对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

探讨徐长卿丹皮酚对兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡及相关调控蛋白Bcl-2,Bax表达的影响。采用兔膝关节内侧半月板前1/3切除及前交叉韧带切断制备骨关节炎(OA)模型。于OA模型建立后的第1周开始对右膝关节内分别注射徐长卿丹皮酚0.2 mg、曲安奈德0.2 mg、0.9%生理盐水0.3 mg,每周2次,连续给药5周。用药结束1周后取关节软骨标本制作切片,透射电镜观察软骨细胞凋亡的结构变化;TUNEL法检测软骨细胞凋亡,计算软骨细胞凋亡指数;免疫荧光法检测软骨细胞Bcl-2和Bax的表达。结果显示徐长卿组和曲安奈德组的凋亡率与对照组相比均显著降低(P<0.05,P<0.01),徐长卿丹皮酚和曲安奈德均能上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,从而升高Bcl-2/Bax的比值,进而抑制细胞凋亡,其中徐长卿丹皮酚与模型组比较,升高Bcl-2/Bax的比值更为显著(P<0.01)。     

丹皮酚β-环糊精包合物稳定性考察

目的:考察饱和水溶液法包合丹皮酚的稳定性。方法:采用高效液相色谱法,以丹皮酚含量为评价指标,对丹皮酚β-环糊精包合物、混合物进行热稳定性、湿稳定性实验。结果:在湿、热等因素影响下,包合物含量均无明显的变化,而混合物含量下降。结论:高效液相色谱法测定包合物中丹皮酚的含量,方法简单,重现性良好。丹皮酚β-环糊精包合物具有较好的热稳定性和湿稳定性。     

水蒸气蒸馏法提取丹皮酚工艺研究

目的 对牡丹皮中丹皮酚的提取工艺进行研究,考察水蒸气蒸馏法提取的效果,改进提取工艺. 方法 用水蒸气蒸馏法提取丹皮酚,加水量为药材量20倍,蒸馏液收集量为药材量15倍,冷藏时间为24 h. 结果 丹皮酚提取率平均值为88.07%.经验证实验证明,正交设计优化的工艺稳定可行. 结论 本工艺可以提高丹皮酚的提取效率,操作简单、成本低、毒性小,可用于丹皮酚的大规模制备.     

水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中丹皮总酚的工艺优选

目的 优化水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中丹皮酚的工艺条件.方法 利用水蒸气蒸馏法提取丹皮总酚,在40℃,-0.095MPa条件下将所提取的丹皮总酚干燥至恒重,通过测定所得丹皮总酚中丹皮酚的含量计算丹皮酚收率.利用正交试验优化加水量、蒸馏液流速和提取时间.结果 最佳工艺条件为:加16倍水量,控制蒸馏液流速按每100 g饮片为5 ml/min,蒸馏5h.丹皮酚收率为2.25％.结论 该工艺简便、丹皮酚收率高、省时,可为工业生产中提取牡丹皮中丹皮酚提供实验基础.     

薄层色谱梯度展开法鉴别牡丹皮和徐长卿配方颗粒

目的:建立牡丹皮和徐长卿配方颗粒的薄层色谱鉴别方法.方法:采用10 cm×10 cm硅胶吸附剂薄层板和两种溶剂系统,梯度展开薄层色谱法.结果:荧光薄层板在254 nm下观察和显色剂显色均显示牡丹皮配方颗粒有丹皮酚和芍药苷特征斑点,徐长卿配方颗粒有丹皮酚特征斑点.结论:所建立的薄层色谱法专属性强,重复性好,能简单有效地实现牡丹皮和徐长卿配方颗粒的鉴别.     

湿疹喷雾剂的蒸馏与水提取工艺研究

目的确定湿疹喷雾剂的最佳蒸馏与水提提取工艺条件。方法以丹皮酚含量为指标，优选徐长卿蒸馏收集馏出液的最佳体积；以苦参碱含量（HPLC法测定）和浸出物为指标优选水提最佳工艺。结果徐长卿蒸馏，收集相当徐长卿重量8倍的馏出液；蒸馏后药渣与苦参等药材饮片碎断，过5目筛，浸泡1h，分别加入8倍量、6倍量的水煎煮回流提取2次，时间分别为2h；1．5h，所得丹皮酚和苦参碱等最多。结论该工艺条件提取效率高，提取工艺合理。     

HPLC法测定徐长卿中丹皮酚的含量

目的建立测定徐长卿中丹皮酚含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为ZORBAX SB-C18柱（4.6150mm,5μm）;流动相为甲醇-水（50∶50）,流速为1 ml.min-1;检测波长为274 nm。结果丹皮酚在1.0~16.0 g.ml-1范围内,峰面积与浓度具有良好的线性关系（γ=0.9997）。平均回收率为98.15%（n=9）,RSD为1.56%。结论本方法结果准确,重现性好,可用于徐长卿中丹皮酚的含量测定。     

丹皮酚超声提取工艺研究

目的:优选丹皮酚的最佳提取工艺.方法:采用正交实验方法,以丹皮酚的提取量为指标,考察温度、时间、溶剂量对提取 量的影响.结果:丹皮酚的最佳提取工艺为超声温度40℃,超声时间30min,溶剂量300mL.结论:超声波提取对丹皮酚的提取率影响不明显.     

丹皮酚缓释微丸的制备工艺研究

目的:以Eudragit NE 30D为包衣材料,制备丹皮酚缓释微丸.方法:应用挤出滚圆机制备丹皮酚素丸和多功能制粒包衣机进行包衣制备缓释微丸,采用单因素法考察缓释微丸的制备工艺参数和包衣工艺参数.结果:体外释放度试验结果显示,所制丹皮酚缓释微丸具有明显的缓释特性.结论:制备的丹皮酚缓释微丸基本符合12 h缓释要求.