不同剂量60Co-γ射线对TM3细胞的损伤效应

目的：对不同剂量60Co-γ射线下TM3细胞的损伤进行细胞生物学行为、转录层面的分析。方法：TM3细胞分4组,包括3个60Co-γ射线照射组(3、6、9 Gy)及对照组(不照射)。于24、48、72 h观察各组细胞凋亡情况(流式细胞法)、氧化损伤(ELISA)、睾酮合成关键因子(StAR、P450scc、P450c17及3β-HSD)的mRNA表达(实时定量PCR法)。于24、48、72、96、120、144 h,观察细胞增殖情况(MTS法)。结果：第24、72 h,各照射组细胞凋亡率均高于对照组(P<0.008);MTS实验中,第144、120 h,各照射组OD490值均低于对照组(P<0.008);第24,48,72 h,3 Gy组8-OHdG浓度与对照组相比无差异(P>0.008),而9 Gy组高于对照组(P<0.008);在72 h,各照射组StAR、P450scc、3β-HSD mRNA表达均低于对照组(P<0.008),而P450c17的表达在3 Gy组中无显著改变,在6 Gy组中高于对照组,在9 Gy组中低于对照组。结论：60Co-γ射线使TM3细胞凋亡增加、细胞增殖能力下降。6 Gy、9 Gy照射可以导致TM3细胞DNA的氧化损伤。辐照导致TM3细胞中StAR、P450scc、3β-HSD mRNA表达下降。6 Gy的照射使P450c17 mRNA表达上升,9 Gy使之下降。     

姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠睾酮合成的影响

 目的: 研究姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠睾酮合成的影响。方法: 雄性SD大鼠35只,随机均分为正常对照组(C组)、高脂组(H组)、高脂治疗组(HT组)、糖尿病组(D组)和糖尿病治疗组(DT组),后4组高脂喂养4周后,D组及DT组用低剂量链脲佐菌素诱导糖尿病,HT组和DT组用0.2 mg·kg^-1·d^-1的B06灌胃8周。微量血糖仪测定大鼠血糖浓度;ELISA法测定血胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数;光镜和电镜观察睾丸形态;放射免疫法测定血睾酮、雌二醇水平;免疫组化检测Leydig细胞的类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)表达;RT-PCR检测睾丸Leydig细胞StAR、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P450 17A1(P450c17)、细胞色素P450芳香化酶(P450arom)、3β-羟基类固醇脱氢酶(HSD)及17β-HSD的mRNA表达水平。结果: H组及D组血糖、胰岛素抵抗指数升高,血清睾酮水平降低,经B06治疗后好转;H组及D组睾丸曲细精管变形,生精细胞脱落,Leydig细胞内线粒体肿胀,内质网减少且扩张,胞核皱缩,染色质稀疏,经B06治疗后病变减轻;D组的StAR蛋白表达减弱,经B06治疗后表达增强;H组及D组Leydig细胞StAR、P450scc mRNA表达降低,经B06治疗后升高,P450c17、P450arom、3β-HSD及17β-HSD mRNA表达未见明显差异。结论: B06可缓解2型糖尿病大鼠睾丸病变,提高血清睾酮水平,这可能与B06改善机体代谢紊乱并上调Leydig细胞StAR及P450scc mRNA表达水平相关。     

病毒拟似物Poly(I:C)诱导人卵巢颗粒细胞病毒反应蛋白viperin表达

目的探讨病毒拟似物对人卵巢颗粒细胞病毒反应蛋白表达的影响,明确颗粒细胞在卵巢病毒感染时的反应。方法将原代培养的人卵巢颗粒细胞分为对照组、病毒拟似物Poly(I:C)处理组、卵泡刺激素(FSH)处理组。CCK8法测定细胞增殖活力、real-time PCR法测定干扰素-β(IFN-β)、viperin mRNA表达,Western blot法测定viperin蛋白表达。结果原代接种培养5 d后,FSH可诱导颗粒细胞增殖(P0.05),Poly(I:C)10μg/m L对细胞增殖活力无显著影响。Poly(I:C)刺激后24 h内诱导IFN-β、viperin mRNA表达明显上调,其中IFN-β于刺激后2 h表达水平达到峰值(P0.05),viperin于刺激后8 h达到峰值(P0.05),刺激后24 h,两者mRNA表达水平均回归刺激前水平。Poly(I:C)诱导颗粒细胞viperin蛋白表达,水平随Poly(I:C)浓度上升。结论病毒拟似物能够诱导颗粒细胞表达病毒反应蛋白viperin。     

IL-17对小鼠心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ胶原表达的作用研究

目的:探讨IL-17对小鼠心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ胶原蛋白表达的影响及其分子机制。方法:从7～14 d BALB/c小鼠心脏中分离培养心肌成纤维细胞,分别用100 ng/mL IL-17刺激0、24、48、72 h,PCR检测其表面IL-17受体、免疫荧光检测I/III型胶原表达水平,Western blot法检测PKCβ、Erk1/2、NF-κB磷酸化水平。结果:心肌成纤维细胞表面有IL-17RA/C的表达;IL-17刺激心肌成纤维细胞24 h后Ⅰ/Ⅲ型胶原表达明显增加,Western blot显示IL-17刺激心肌成纤维细胞后分别在30、45、45 min导致PKCβ、Erk1/2、NF-κB的磷酸化。结论:IL-17可以诱导心肌成纤维细胞Ⅰ/Ⅲ型胶原的表达,其分子机制可能是PKCβ-ERK1/2-NF-кB依赖性的。     

离心重力诱导脂肪间充质干细胞向软骨样细胞分化

目的探讨离心重力对人脂肪来源间充质干细胞(hADSCs)向软骨样细胞分化以及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法通过加载不同离心力(0、500、1000、2000、2500、3000×g)和持续时间(0、15、30、45、60 min)刺激脂肪干细胞分化为软骨样细胞,并利用荧光定量PCR和Western blot检测Sox 9基因的上调表达来筛选条件,将培养的P3代h ADSCs分3组,对照组(不干预处理)、离心重力组和TGF-β3组(加入TGF-β3成软骨诱导剂),持续培养21 d后,通过阿利辛蓝和苏木精-伊红染色进行软骨分化鉴定,DMMB法测定胞外基质中GAG含量,荧光定量PCR测定Ⅱ型胶原基因表达,Western blot进一步检测对照组和离心重力组中Sox 9、β-catenin、GSK3β和p-GSK3β蛋白的表达。结果加载最适的离心重力(2500×g,30 min)刺激h ADSCs后,培养24 h,Sox 9的m RNA和蛋白表达显著上调。阿利辛蓝和苏木精-伊红染色显示,离心重力组和TGF-β3组中软骨表达呈阳性。GAG实验结果显示,TGF-β3组促GAG分泌的能力优于离心重力组(P0.05),荧光定量PCR结果表明TGF-β3组其Ⅱ型胶原mRNA表达的能力高于离心重力组(P0.05),Western blot结果显示,相比对照组,离心重力组中β-catenin和p-GSK3β的蛋白表达水平降低,而GSK3β和Sox 9蛋白表达升高。结论离心重力和TGF-β3诱导脂肪干细胞成软骨分化中的表达具有相似的能力,离心重力对h ADSCs诱导成软骨作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

炎症因子对原代培养海马神经元CLC-3表达的影响

目的:研究不同浓度TNF-α、IL-1β、TGF-β刺激对原代培养海马神经元CLC-3(voltage-gated chloride channel 3)mRNA及蛋白质水平的影响。方法:取原代培养8 d的大鼠海马神经元,随机分为对照组、TNF-α组、IL-1β组和TGF-β组。TNF-α、IL-1和TGF-β组分别加入加入含有浓度为10 ng/ml的相应炎症因子培养液,每组分别在孵育6、12、24 h后分别收集细胞提取总RNA和蛋白采用实时定量PCR、Western Blot技术检测CLC-3 mRNA及蛋白水平的表达。结果:TNF-α、IL-1β处理12 h后培养海马神经元CLC-3在mRNA及蛋白水平开始上调,高峰持续从12 h至24 h(P0.05)。TNF-α刺激作用强于IL-1β。TGF-β处理海马神经元CLC-3 mRNA在6 h后即开始升高(P0.05),但在孵育6 h到24 h时下降至正常对平(P0.05)。结论:TNF-α、IL-1β、TGF-β可能通过刺激海马神经元CLC-3表达增加增强神经元存活能力。     

甲亢患者餐后2h血清CG检测的临床意义

本文为了观察不同病程甲亢患者肝细胞损害情况 ,对 1 32例甲亢患者按病程分 3组 ,以 5 0名正常人作为对照组。用RIA法检测空腹和餐后 2h血清CG水平。结果显示 :病程在 0 .5年以内患者空腹、餐后 2h血清CG水平与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;病程在 0 .5 - 2年患者 ,餐后 2h血清CG水平高于对照组 (P <0 .0 1 ) ,空腹血清CG水平无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;病程在 2年以上患者空腹、餐后 2h血清CG水平均增高 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 0 1 ) ,且餐后 2h血清CG明显增高 (P <0 .0 0 1 )。结果提示 :检测餐后 2h血清CG水平 ,对了解甲亢患者肝细胞损害比空腹CG更为敏感 ,且与病程呈正相关     

β—淀粉样蛋白31—35和载脂蛋白E4对大鼠海马神经元存活和生长的影响

目的 :研究 β 淀粉样蛋白 (Betaamyloidpritein ,Aβ)与载脂蛋白E4(ApolipoproteinE ,ApoE4)对神经元的共同作用 ,探讨老年性痴呆发病的细胞分子机制。材料与方法 :体外培养神经细胞 ,采用MTT比色法和免疫组化标记 ,结合图像分析技术 ,研究Aβ3 1 3 5和ApoE4对海马神经元存活和生长的作用。结果 :(1 )Aβ3 1 3 5(1 0 0 μmol/L) +ApoE4(1 0 μg/ml)和Aβ3 1 3 5(2 0 μmol/L) +ApoE4(1 0 μg/ml)的OD值 ,分别为 0 .1 97± 0 .0 2 1和 0 .1 91± 0 .0 2 4,明显低于对照组 0 .2 2 9± 0 .0 0 3 μm(P <0 .0 5 )。 (2 )这两组神经元胞体的最长径分别为 1 0 .0 7± 1 .98μm和 1 0 .0 1± 1 .68μm ;最短径分别为 6.40± 0 .77μm ,6.2 8± 0 .89μm ,明显低于对照组 1 2 .73± 3 .0 0 μm、7.0 5± 1 .0 4μm ,Aβ3 1 3 5组 1 2 .0 9± 2 .45 μm、7.0 1± 1 .0 2 μm ,最长径和最短径 (P <0 .0 5 ) ;(3 )两组神经元突起平均长度分别为 2 6.3 6± 7.73 μm和2 3 .86± 7.2 9μm ,明显低于对照组 3 0 .88± 9.79μm、2 8.3 4± 4.40 μm ,P <0 .0 5。 (4 )Aβ3 1 3 5(2 0 μmol/L)组的平均突起长度 (2 6.81± 5 .42 μm) ,明显低于对照组和ApoE4组 3 0 .60± 7.3 0 μm(P <0 .0 5 )。ApoE4对海马神经元的存     

LDL诱导THP-1细胞炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β的顺序表达

目的探讨LDL诱导THP-1细胞内炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β表达及3种炎性因子的关系,为早期诊断动脉粥样硬化提供依据。方法采用实时荧光定量PCR检测LDL刺激的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达,TNF-α抑制剂刺激THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达及TNF-α抑制剂对LDL诱导的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA表达影响;采用流式细胞仪检测TNF-α抑制剂刺激的THP-1细胞凋亡情况。结果 LDL刺激THP-1细胞FOS m RNA的表达0.5 h达到高峰(P0.05),TNF-αm RNA的表达1 h开始上升并达到最高(P0.05),IL-1βm RNA的表达1 h开始上升(P0.05);TNF-α抑制剂不促进细胞凋亡,100μg/ml时凋亡率最低。TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 2 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 1 h表达上升(P0.05),2 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 1 h表达下降(P0.05);LDL诱导细胞1 h后加入TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 1 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 0.5 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 0.5 h表达下降(P0.05)。结论 LDL能够促进THP-1细胞内FOS、TNF-α、IL-1β的表达,且它们之间有一定的表达顺序,TNF-α能促进IL-1β的表达。     

幽门螺杆菌空泡毒素VacA促进胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活

目的探究H. pylori空泡毒素VacA对胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活的影响。方法采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695感染AGS细胞,Western blotting、q RT-PCR、ELISA检测NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表达。siRNA-NC、siRNA-NLRP3转染AGS后,分别用PBS、WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695刺激,qRT-PCR和细胞因子ELISA检测试剂盒分别检测pro-IL-1β的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白表达水平。收集慢性胃炎患者标本,鉴别出H. pylori阳性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通过q RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表达水平及采用细胞因子ELISA试剂盒检测IL-1β蛋白表达水平。C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H. pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA检测胃组织IL-1β的表达。结果 H.pylori感染AGS细胞,与对照组相比,WT H. pylori26695组IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.01);△VacA H. pylori26695组与WT H. pylori26695组相比,IL-1β的m RNA和蛋白表达水平均明显下降(P0.01)。与siRNA-NC组相比,采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori 26695刺激转染siRNA-NLRP3的AGS细胞pro-IL-1β的m RNA水平和IL-1β蛋白表达水平均明显下调(P0.01)。H. pylori阳性患者较阴性患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平明显升高(P0.01);与VacA s1m2型患者相比,VacA s1m1型患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P0.01),同时IL-1β成熟分泌增加。H. pylori慢性胃炎小鼠动物模型中,与对照组相比,Mcc950组中在WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695灌胃后,pro-IL-1β的mRNA水平和IL-1β蛋白水平表达均明显下调(P0.01)。结论H. pylori空泡毒素VacA能够激活胃上皮细胞NLRP3炎性小体,促进IL-1β的成熟分泌。     

类固醇生成因子-1对青春期小鼠睾丸中睾酮生成及精子发生的调节

目的 探讨类固醇生成因子-1(SF-1)对青春期小鼠睾丸内分泌功能及精子发生过程的调节作用，并推测其可能机制。方法 用免疫组织化学方法定位SF-1在不同年龄小鼠睾丸中的细胞分布，进一步分离有SF-1阳性表达信号的青春期小鼠Leydig细胞在体外进行培养，用反义转染方法抑制细胞内SF-1蛋白质的表达，检测细胞的睾酮分泌量及睾酮生成酶P450scc的mRNA水平变化。结果 1．SF-1在青春期Leydig细胞核有表达；反义抑制细胞内SF-1蛋白质的表达，则细胞的睾酮分泌量及P450scc mRNA水平均显著下降；2．SF-1在青春期小鼠睾丸B型精原细胞及细线期、偶线期、粗线期的初级精母细胞核中也有表达。结论 1．SF-1参与调节青春期睾丸Leydig细胞中P450scc基因的转录，影响睾酮分泌；2．SF-1作为一种核受体，可能也是生精过程中重要的转录调控因子，调节B型精原细胞向初级精母细胞分化及初级精母细胞第1次减数分裂过程中特异表达的基因转录过程，从而影响青春期小鼠精子发生过程。     

Presence of Sex Steroid‐Metabolizing Enzymes in the Olfactory Mucosa of Rats

Although several lines of evidence have suggested that sex steroids influence olfaction, little is known about the cellular basis of steroid‐metabolizing enzymes in the olfactory system. Thus, we aimed to examine gene expression and immunolocalization of four sex steroid‐metabolizing enzymes in the olfactory mucosa (OM) of albino rats; steroid side chain‐cleaving enzyme (P450scc), 17β‐hydroxysteroid dehydrogenase type 1 (17β‐HSD‐1), 17β‐HSD type 2 (17β‐HSD‐2), and aromatase. P450scc is known to catalyze conversion from cholesterol to pregnenolone. 17β‐HSD‐1 catalyzes conversion from estrone to estradiol, and 17β‐HSD‐2 does the reverse. Aromatase catalyzes the conversion from testosterone to estradiol‐17β. Messenger (m) RNAs of all four enzymes mentioned above were detected in the OM. Western blot analysis demonstrated that P450scc, 17β‐HSD‐1, and 17β‐HSD‐2 were detected in the OM. Immunoreactivity for these three enzymes was observed in sustentacular cells of the olfactory epithelium and acinar cells of Bowman's glands. Immunoelectron microscopy analysis demonstrated immunoreactivity for P450scc in mitochondria, and for 17β‐HSD‐1 and 17β‐HSD‐2 in the well‐developed smooth endoplasmic reticulum and myeloid bodies of the sustentacular cells. The present study suggests that sustentacular cells and acinar cells of the Bowman's glands in the rat OM express at least three of the steroid‐metabolizing enzymes, that is, P450scc 17β‐HSD‐1, and 17β‐HSD‐2, and de novo synthesis of estradiol takes place in the OM. Anat Rec, 300:402–414, 2017. © 2016 Wiley Periodicals, Inc.     

何首乌饮对大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶蛋白表达的影响

目的探究何首乌饮影响大鼠睾丸间质(Leydig)细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)蛋白表达的变化。方法选用10~20 d的幼年雄性Wistar大鼠,分离、培养Leydig细胞,然后收集。采用氧化损伤的方法建立Leydig细胞衰老模型。实验分组:间质细胞衰老模型组,何首乌饮处理组,首乌丸处理组,正常组和何首乌饮对照组。结果衰老模型组Leydig细胞St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显低于正常组和何首乌饮对照组(P0.01)。另一方面,何首乌饮和何首乌丸干预组St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显高于衰老模型组(P0.05),何首乌饮组好于何首乌丸组。结论何首乌饮可提高睾丸Leydig细胞St AR和P450scc蛋白的表达,提高睾酮的合成能力,从而延缓Leydig细胞衰老。     

假两性畸型小鼠睾丸胆固醇侧链裂解酶mRNA的异常表达

为了解假两性畸型（Ｔｆｍ）小鼠睾丸胆固醇侧链裂解酶（Ｐ４５０ｓｃｃ）ｍＲＮＡ的水平及影响其转录的机理，用反转录－多聚酶链反应比较了５ｄ、２０ｄ、２５ｄ和３０ｄ正常小鼠、Ｔｆｍ小鼠及３０ｄ手术隐睾小鼠睾丸Ｐ４５０ｓｃｃ的ｍＲＮＡ水平，正常小鼠在５～２０ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平较低，从２５ｄ起明显增高，至３０ｄ时ｍＲＮＡ水平是５ｄ时的７５倍；Ｔｆｍ小鼠在５ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平稍高于正常小鼠，但随后直至３０ｄ其水平未见明显增高，在３０ｄ时，Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ总量低于正常小鼠１／１０；３０ｄ手术隐睾小鼠的Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ水平低于正常３０ｄ小鼠１／２，高于Ｔｆｍ小鼠５倍。结果提示，２５ｄ的Ｌｅｙｄｉｇ细胞功能的形成需要受体介导的雄激素作用，而Ｔｆｍ小鼠由于编码雄激素受体基因突变，间接导致青春期Ｐ４５０ｓｃｃｍＲＮＡ的低水平。     

Spermatogenic Cycle and Steroidogenic Control of Spermatogenesis in Mytilus galloprovincialis Collected in the Bay of Naples

The aim of the present article was to study the spermatogenic cycle of Mytilus galloprovincialis collected in the Bay of Naples during a whole year and to acquire new insights into the mechanism of control. Knowledge of the Mytilus cycle in this geographic area is of particular interest as, to the best of our knowledge, the male gonad cycle has been hitherto unexplored. Testis organization was evaluated together with the localization of the enzymes 3β‐HSD, 17β‐HSD, and P450‐aromatase, which are strictly connected to the synthesis of two key hormones involved in the testis activity: testosterone and 17β‐estradiol. It was demonstrated that: (1) the spermatogenic cycle starts in late Summer‐early Fall and continues until early Winter, when the first spawning occurs; after rapid gonad restoration, several spawning events take place until June, when the testis becomes non‐active again; (2) in the testis, true Leydig and Sertoli cells are present; (3) during the reproductive period, Sertoli, Leydig, germ, and adipogranular cells (ADGs) are positive to 3β‐HSD and 17β‐HSD, while only germ cells are positive to P450 aromatase; by contrast, during the resting period, only ADGs are positive to 3β‐HSD and 17β‐HSD, and P450‐aromatase is no longer recognizable. The presence of a hermaphrodite sample is also described. Anat Rec, 2017. © 2017 Wiley Periodicals, Inc. Anat Rec, 300:1881–1894, 2017. © 2017 Wiley Periodicals, Inc.     

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

目的 探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只.C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d.模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg·d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d.采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平; 采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化.结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义.P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱.StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异.结论 何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达.     

Evidence for steroidogenic potential in human prostate cell lines and tissues

Malignant prostate cancer (PCa) is usually treated with androgen deprivation therapies (ADTs). Recurrent PCa is resistant to ADT. This research investigated whether PCa can potentially produce androgens de novo, making them androgen self-sufficient. Steroidogenic enzymes required for androgen synthesis from cholesterol (CYP11A1, CYP17A1, HSD3β, HSD17β3) were investigated in human primary PCa (n = 90), lymph node metastases (LNMs; n = 8), and benign prostatic hyperplasia (BPH; n = 6) with the use of IHC. Six prostate cell lines were investigated for mRNA and protein for steroidogenic enzymes and for endogenous synthesis of testosterone and 5α-dihydrotestosterone. All enzymes were identified in PCa, LNMs, BPH, and cell lines. CYP11A1 (rate-limiting enzyme) was expressed in cancerous and noncancerous prostate glands. CYP11A1, CYP17A1, HSD3β, and HSD17β3 were identified, respectively, in 78%, 52%, 16%, and 82% of human BPH and PCa samples. Approximately 10% of primary PCa, LNMs, and BPH expressed all four enzymes simultaneously. CYP11A1 expression was stable, CYP17A1 increased, and HSD3β and HSD17β3 decreased with disease progression. CYP17A1 expression was significantly correlated with CYP11A1 (P = 0.0009), HSD3β (P = 0.0297), and HSD17β3 (P = 0.0090) in vivo, suggesting CYP17A1 has a key role in prostatic steroidogenesis similar to testis and adrenal roles. In vitro, all cell lines expressed mRNA for all enzymes. Protein was not always detectable; however, all cell lines synthesized androgen from cholesterol. The results indicate that monitoring steroidogenic metabolites in patients with PCa may provide useful information for therapy intervention.     

锌转运体8与小鼠睾丸间质细胞睾酮生成相关

目的锌转运体8(ZnT8)与胰岛素等激素的分泌有关,但其在睾丸的功能尚不清楚,本实验旨在探讨ZnT8在小鼠睾丸的分布与功能。方法通过免疫组织化学技术检测成年雄性小鼠睾丸ZnT8的分布;乳鼠腹腔注射hCG(human chorionic gonadotrophin,人绒毛膜促性腺激素),注射5d后,检测乳鼠睾丸ZnT8的分布;化学发光法检测乳鼠血清睾酮水平。结果 ZNT8主要分布在成年雄鼠睾丸间质细胞,hCG处理乳鼠在血清睾酮升高的同时伴有睾丸间质细胞ZnT8表达增加。结论 ZnT8的功能可能与小鼠睾丸间质细胞睾酮合成有关。