醒脑滴丸中右旋龙脑含量测定及其体内分析方法研究

目的建立醒脑滴丸及其血浆中右旋龙脑含量的气相色谱(GC)及气相色谱-质谱联用(GC- MS)方法。方法GC法：色谱柱以聚乙二醇(PEG)-20M为固定相,涂布浓度10%,检测器FID,柱温100℃,载气流速1．0 mL/min;GC-MS法：血浆样品用乙醚萃取,选用DB5-MS色谱柱(30 m×0．25 mm×0．25μm),以萘为内标,选择离子检测(右旋龙脑m/z 95,萘m/z 128)。结果GC法：右旋龙脑在0．034～0．102g/L范围内线性关系良好,平均回收率为97．70%(RSD=1．80%);GC-MS法：右旋龙脑浓度在0．01～20 mg/L范围内线性关系良好,最低检测浓度为3μg/L(S/N＞3),样品平均回收率在91%以上,日内、日间精密度及稳定性的RSD均小于10%。结论两法操作简便、准确、灵敏度高,可作为醒脑滴丸含量测定及其血药浓度分析方法。     

脑脊液中右旋布洛芬含量及其药动学研究

目的　观察脑脊液中右旋布洛芬浓度随时间变化的情况。方法　新西兰家兔脑部直接注射右旋布洛芬 ,用高效液相色谱法测定其浓度。色谱条件 :KromasilC18(15 0mm× 4 .6mm ,7μm)色谱柱 ,流动相为甲醇∶0 .0 2mmol/L磷酸二氢钾∶乙腈 (6 5∶30∶5 ) ,流速 1.0ml/min ,柱温为室温 ,检测波长 2 2 5nm ,以保泰松为内标。结果　脑脊液右旋布洛芬在 0 .5～ 80 μg/ml范围内线性关系良好 ,r =0 .9994。药物在脑脊液中Tmax为 1.1h ,Cmax为 9.9μg/ml,T1/ 2 为 3.5h ,AUC为 6 1.0 μg·h/ml。结论　HPLC RP法可用于测定脑脊液中右旋布洛芬含量 ,药物在脑脊液中代谢呈一室模型。     

液相色谱-质谱技术测定大鼠血浆中L-NNA浓度

目的建立检测大鼠血浆中L-NNA浓度的液相色谱-质谱联用方法。方法采用Phenomenex Kromosil C18分析柱(4.6mm×250mm,5.0μm),以甲醇∶水溶液(10∶90)为流动相,电喷雾电离源,选择性离子监测质荷比(m/z)分别为:149.3(L-NNA)、218.2(D-苯甘氨酰胺),以D-苯甘氨酰胺为内标物,测定大鼠血浆中L-NNA的浓度。结果 L-NNA浓度在0.10～6.44mg/L范围内线性关系良好;最低检测限为24μg/L,最低定量限为80μg/L;血浆中L-NNA的回收率在85%以上,日内和日间的相对偏差(RSD)均10%。结论本方法快速、准确、灵敏,可用于大鼠血浆中L-NNA浓度的测定。     

高效液相色谱法测定右旋布洛芬片含量

目的:建立右旋布洛芬片剂的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱Eurospher-100C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相甲醇-磷酸盐缓冲溶液pH5.0(3∶7),流速1.0ml/min,检测波长263nm,柱温室温。结果:右旋布洛芬在40.16～1004.00μg/ml范围内呈良好的线性关系,r=0.9998,回收率99.8%,RSD=0.48%,精密度RSD=1.25%,重现性(n=7)RSD=0.63%。结论:方法专属性强,简便,重现好,结果准确可靠,完全适合右旋布洛芬片剂的含量测定。     

离子对RP-HPLC法检测大鼠血浆中的盐酸二甲双胍

目的建立大鼠血浆中盐酸二甲双胍的检测方法。方法采用离子对RP-HPLC法测定大鼠血浆中药物浓度,色谱柱为Lichrospher C18(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为3 mmol/L十二烷基磺酸钠水溶液-已腈(32∶68 v/v,PH=4)。结果在0.1~4.0 mg.L-1范围内盐酸二甲双胍峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9996),最低检测浓度为0.03 mg.L-1,绝对回收率为83.2%~95.4%,准确度为96.7%~106.8%,日内、日间RSD均小于10%。结论样品处理简便快速,测定方法准确可靠,适合于盐酸二甲双胍的药代动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定大鼠头孢氨苄血药浓度

目的:高效液相色谱法测定大鼠血浆中头孢氨苄浓度。方法:血浆样品用超滤法去除蛋白质直接进样。以μBondapakTMC18柱(4.6mm×250 mm,5μm)为色谱柱,水-甲醇(400∶100,v/v,用1.0mol/L醋酸调pH至4.0)为流动相,流速为0.8m l/m in,柱温25℃;二极管阵列检测波长为254 nm。结果:头孢氨苄浓度在0.63~10.0μg/m l范围内线性关系良好,相关系数>0.999 9;其日内和日间相对标准差(RSD)<10%(n=5),方法回收率为98.1%~100.1%(n=5)。结论:该法快速简便,适用于临床血药浓度研究和间接评价结肠上皮二肽载体(PepT1)的功能。     

右旋布洛芬-β-环糊精包合物分散片在大鼠体内初步药动学研究

目的研究右旋布洛芬-β-环糊精(DIB-β-CD)包合物分散片在大鼠体内的初步药动学。方法将12只SD大鼠随机分为受试制剂组和参比制剂组,各6只。灌胃前空腹12 h,受试制剂组灌胃DIB-β-CD包合物分散片,参比制剂组灌胃市售右旋布洛芬(DIB)片。采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同时间点大鼠血浆中DIB的浓度,采用3p97药代动力学软件计算药动学参数。结果 DIB-β-CD包合物分散片和市售DIB片中DIB在大鼠体内的最大浓度(C_(max))分别为9.017,4.361μg/m L,出峰时间(T_(peak))分别为0.388,1.876 h,药时曲线下面积(AUC)分别为81.292,50.530μg/m L×h,DIB-β-CD包合物分散片相对生物利用度为160.88%。结论DIB-β-CD包合物分散片明显改善了药物的药动学行为,提高了药物的生物利用度。     

右旋布洛芬-β-环糊精包合物分散片在大鼠体内初步药动学研究

目的研究右旋布洛芬-β-环糊精(DIB-β-CD)包合物分散片在大鼠体内的初步药动学。方法将12只SD大鼠随机分为受试制剂组和参比制剂组,各6只。灌胃前空腹12 h,受试制剂组灌胃DIB-β-CD包合物分散片,参比制剂组灌胃市售右旋布洛芬(DIB)片。采用高效液相色谱(HPLC)法测定不同时间点大鼠血浆中DIB的浓度,采用3p97药代动力学软件计算药动学参数。结果 DIB-β-CD包合物分散片和市售DIB片中DIB在大鼠体内的最大浓度(C_(max))分别为9.017,4.361μg/m L,出峰时间(T_(peak))分别为0.388,1.876 h,药时曲线下面积(AUC)分别为81.292,50.530μg/m L×h,DIB-β-CD包合物分散片相对生物利用度为160.88%。结论DIB-β-CD包合物分散片明显改善了药物的药动学行为,提高了药物的生物利用度。     

RP-HPLC荧光法测定人血浆中替米沙坦浓度

目的建立人血浆中替米沙坦浓度RP-HPLC荧光检测法。方法以缬沙坦为内标定量血浆中替米沙坦的浓度,血浆样品在酸性条件下用苯萃取后氮气吹干,残留物用流动相复溶后直接进样。样品分离用ZORBAXEclipseXDB-C18柱(4.6×150mm,5μm)和填充相同材料的预柱(4.6×12.5mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-10mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH3.2)(5∶40∶55,v/v/v),流速为1.0mL/min,进样体积为20μL,荧光检测激发波长为250nm,发射波长为375nm,柱温为25℃。结果血浆中内源性物质不干扰测定结果,替米沙坦和内标的保留时间分别为8.8min和10.7min。在浓度1μg/L~180μg/L范围内线性关系良好,线性方程:A=0.2769R+0.03788,相关系数r=0.9995,检测限为1μg/L。浓度为2.0、30.0、70.0μg/L血浆质控样品的平均回收率分别为97.53%、104.6%和105.1%。低、中、高浓度血浆质控样品的日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于7%。结论本研究建立的血浆中替米沙坦的浓度测定方法,具有准确、快速、简单,灵敏度高、线性范围宽等特点。该方法更适于替米沙坦血药浓度测定及替米沙坦药物代谢动力学研究。     

高效液相色谱法测定人体血浆中尿酸的浓度

目的建立一种测定人体血浆中尿酸浓度的高效液相色谱法。方法采用Agilent HPLC系统;色谱柱:Dikma-C18(5μm,4.6×150mm)。流动相为乙酸缓冲液(20mmol/L,pH4.0)∶甲醇=99∶1,流速1.0mL/min,λ=288nm。结果尿酸线性关系为Y=9.353 7X+74.97(n=7,r=0.999 3),线性范围为0.83~25mg/L;最低检测浓度为0.02mg/L;平均提取回收率为83%;日内、日间RSD分别小于2.98%,9.75%;测定30个血样,尿酸浓度为41.92~72.44mg/L。结论本文建立的HPLC法可以简便、准确、灵敏地测定血样中尿酸的浓度,为临床上以尿酸为诊断标准的检验提供可靠的分析手段。     

反式白藜芦醇苷在大鼠体内的药物动力学

目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠灌胃后血浆中反式白藜芦醇苷的浓度。方法采用色谱柱Hypersil BDS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液(22:78,V/V);流速0.8 ml/min;柱温25℃;检测波长306 nm。结果线性范围0.012625~2.525μg/ml,血浆标准曲线为R=4.264995 17.5689C,相关系数0.9998,日内、日间精密度均小于9%。方法回收率为95.0%~103.0%。根据大鼠灌胃给药50,100,200 mg/kg后测得的血药浓度,用DAS 1.0软件处理后求得的反式白藜芦醇苷的主要药动学参数:AUC(0-2.5)分别为2.637,0.925,0.617 mg/(h.L),Vβ分别为89.490,79.717;31.253 L/kg,CL(s)分别为54.915,95.661,73.631 L/(h.kg)。结论建立了白藜芦醇苷血药浓度的HPLC测定方法,阐明了白藜芦醇苷的药代动力学特征。方法专属性高,操作简便,结果准确。     

硫普罗宁在大鼠体内的手性药动学

目的研究左旋、右旋硫普罗宁在大鼠体内的立体选择性药动学过程.方法大鼠静脉注射左旋、右旋及消旋硫普罗宁后,用柱前衍生化与LC-MS联用方法测定血浆中药物的浓度.色谱柱为Shimadzu VP-ODS C18(150 mm×2.0 mm,5.0 μm),流动相为甲醇-水(含5.3 mmol/L甲酸,0.1 mmol/L氯化钠),以0.2 mL/min流速进行梯度洗脱.扫描方式为选择性离子检测(SIM),采用正离子方法检测.结果给予硫普罗宁消旋体后,左旋体和右旋体的t1/2分别为(1.49±0.57) h和(0.58±0.24) h,AUC0-∞分别为(15.17±5.95) μg/mL·h和(10.52±3.72) μg/mL·h,CL分别为(1.31±0.70) L/h和(1.79±0.81) L/h;分别静脉注射给予硫普罗宁对映体后,左旋、右旋硫普罗宁的t1/2分别为(1.52±0.28) h和(0.78±0.33) h,AUC0-∞分别为(11.93±5.02) μg/mL·h和(6.26±1.83) μg/mL·h,CL分别为(0.79±0.24) L/h和(2.83±0.84) L/h.结论左旋、右旋硫普罗宁在大鼠体内的药动学行为存在一定的差异,左旋、右旋硫普罗宁在体内没有发生对映体间的相互转化,且两个对映体之间没有明显的相互作用.     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中没食子酸丙酯浓度

目的没食子酸丙酯是从中药赤芍中提取的有效成分没食子酸经酯化反应而成的化学药物。文中建立LC(液相)-MS(质谱)/MS方法研究大鼠口服没食子酸丙酯后的体内药代动力学。方法采用LC-MS/MS测定大鼠血浆中没食子酸丙酯的浓度,以没食子酸乙酯为内标,血浆样品用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(3.5μm,100 mm×2.1 mm,I.D.),流动相为甲醇-乙腈-10 mmol/L醋酸铵内含0.1%甲酸水溶液(10∶25∶65,V/V/V),流速0.25 ml/min,柱温30℃。结果没食子酸丙酯的线性范围为5.0~500.0 ng/ml(r=0.998 4),最低定量检测浓度达5.0 ng/ml(S/N>10),提取回收率>75%,日内和日间精密度RSD<15%。结论本法操作简单,选择性好,灵敏度高,费时少,适用于没食子酸丙酯在大鼠体内的药代动力学研究。     

阿莫西林咀嚼片在健康人体内的药代动力学研究

目的建立测定人血浆中阿莫西林浓度的高效液相色谱法。方法色谱柱:KromasilC18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-5mmol/L醋酸铵(1∶9);检测波长:225nm;阿司匹林作为内标,用HPLC法测定人血浆中阿莫西林浓度。结果阿莫西林线性范围为0.40～18.0μg/ml,回归方程Y=0.0048,C-0.0149(r=0.9996);回收率>80%,日内和日间RSD均<10%。结论本方法简便、快速、准确,适用于阿莫西林咀嚼片药代动力学研究及血药浓度监测。     

HPLC法测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度

目的 建立一种同时测定大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度的方法.方法 采用迪马Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为:甲醇∶水=70∶30(v/v),流速为1.0 mL·min-1,紫外检测波长为320 nm,米非司酮为内标.取大鼠血样 90 μL 进行血浆样品的处理,测定大鼠血浆中蛇床子素和欧前胡素的色谱行为、标准曲线、提取回收率、精密度和准确度、稳定性等.结果 蛇床子素、欧前胡素在大鼠血浆中质量浓度测定方法 的线性范围分别为10.94～700.00 μg·L-1 和15.63～1 000.00 μg·L-1,线性关系均良好(r=0.999 8、0.999 9,均P＜0.05).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素最低可定量的质量浓度分别为10.94 、15.63 μg·L-1 (以s/n＞4计).大鼠血浆蛇床子素、欧前胡素低、中、高质量浓度的提取回收率分别为98.96%、95.30%、94.88% 和98.23%、98.94%、97.99%,大鼠血浆蛇床子素和欧前胡素低、中、高质量浓度的RSD均＜15%.结论 建立HPLC法具有检测简便、灵敏度高等优点,可快速、可靠地检测大鼠蛇床子素和欧前胡素的血药浓度.     

高效液相色谱法测定布洛芬注射液中精氨酸的含量

目的建立布洛芬注射液中精氨酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Global APS-NH2(4.6mm×250mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液(pH=3.5)-乙腈(45:55);检测波长为205 nm。结果精氨酸在0.074mg/mL-0.37mg/mL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,r=0.9998,回收率为100.19%。结论该方法简便、准确可靠、精密度良好,可作为布洛芬注射液中精氨酸的含量测定方法。     

高效液相色谱法测定霉酚酸血药浓度

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸药物浓度。方法色谱柱为Kromasil C18(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈?10 mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH=5.0)(体积比40∶60);柱温25℃;流速1.5 mL/m in;检测波长为218 nm。结果本测定方法的线性范围:0.1-50μg/mL,r=0.9997。平均回收率为(97.8±4.6)%,日内RSD≤6.4%,日间RSD≤8.1%。霉酚酸的最低检测浓度为0.05μg/mL。结论本方法简单、灵敏、重现性好,适用于临床血药浓度监测,以及人体药代动力学的研究。     

超滤法测定天麻素与不同血浆的蛋白结合率

目的建立测定天麻素与小鼠、大鼠、家兔的血浆蛋白结合率的实验方法,并计算天麻素与不同血浆的蛋白结合率。方法采用HPLC法测定天麻素的含量,Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇:水(10:90,v/v),体积流量为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为220 nm。通过超滤法比较天麻素与小鼠、大鼠、家兔的血浆蛋白结合率。结果天麻素与小鼠血浆在5、20、50μg/m L浓度下的蛋白结合率为36.18%±0.54%、35.93%±0.48%、36.26%±0.25%;与大鼠血浆在5、20、50μg/m L浓度下的蛋白结合率为35.86%±0.27%、36.11%±0.36%、36.57%±0.39%;与家兔血浆在5、20、50μg/m L浓度下的蛋白结合率为37.00%±0.22%、36.90%±0.17%、37.15%±0.31%。结论天麻素与小鼠、大鼠、家兔血浆均属于低强度结合,无差异性和浓度依赖性。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度

目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸 (FFAs)浓度的测定方法。方法以十七烷酸为内标 ,用 ψ(异丙醇∶正庚烷∶2mol/L磷酸 ) =(4 0∶10∶1)提取 ,溴苯乙酮衍生化 ,流动相为 ψ(乙腈∶水 ) =(81∶19) ,流速 1.0mL/min ,柱温 5 5℃ ,分析柱Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm) ,紫外检测波长 2 4 2nm。 结果各FFAs最低检测限为 0 .6 μmol/L ,平均回收率为 (10 0 .1± 2 0 ) % ,批内、批外RSD <6 .5 %。结论本法稳定、灵敏、可靠 ,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定     

兔血浆中顺式阿曲库铵的HPLC-荧光法测定

目的:建立以反相高效液相色谱-荧光法测定兔血浆中顺式阿曲库铵(Cisatracurium)浓度的方法.方法:色谱柱为Agilent Hypersil ODS-C18柱(5μm,4.0mm×125mm),流动相为50mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH3.0)-乙腈(50:50),荧光检测的激发波长200nm、发射波长320nm.结果:顺式阿曲库铵检测浓度在25～2 000ng/ml线性关系良好,r=0.999 2.最低检测限为25ng/ml,日内精密度RSD≤2/56%,日间精密度RSD≤3.68%;提取回收率为85.2%～86.1%(n=5),加样回收率为93.4%～98.8%.结论:本方法简便,灵敏度高,重现性好,可满足药代动力学研究的需要.