酸性磷酸酶及测定方法

１酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的生物学特性１．１酸磷酶（正磷酸单脂磷酸水解酶，Ｅ．Ｃ，３．１．３．２ＡＣＰ）是一组在酸性条件下水解各种磷酸酯的酶。它在ｐＨ＝５．０时活性最强，对底物特异性较低。系统命名为邻磷酸单酯磷酸水解酶［１］。１．２ＡＣＰ分布于人体大多数...     

新型脂肪酶LipB52催化生物柴油

一种来源于荧光假单胞菌的新型脂肪酶基因lipB52在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,并且利用Ni-NTA亲和柱时脂肪酶LipB52进行纯化.采用固定化脂肪酶LipB52催化大豆油与甲醇的转酯反应生产生物柴油.实验考察了温度、底物摩尔比、酶用量、有机溶剂、酶的种类以及油的类型对于反应的影响,结果表明:转酯反应的最佳反应条件为:m(酶):m(油)=20:80,n(油):n(甲醇)=1:4、正庚烷作为溶剂、反应温度为30℃,在此条件下脂肪酶LipB52表现出很高的催化活性,反应40 h后甲酯的产率高达92%.     

单酰基甘油酯酶促进肿瘤生长及侵袭研究进展

单酰基甘油酯酶(MAGL)是丝氨酸水解酶超家族成员之一,与激素敏感性脂解酶一起将脂肪细胞和其他细胞内储存的三酰甘油分解为甘油和脂肪酸.此外,它还能够作用于内源性大麻素系统.但目前其生物学功能尚未完全了解.近年来部分学者开始关注其在癌症中的作用.本文通过对MAGL生理生化作用的描述,简要介绍其研究现状.     

乌司他丁治疗急性轻症胰腺炎30例分析

乌司他丁(Ulinastatin)是一种存在于人尿中的胰蛋白酶抑制剂,有抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶、纤溶酶等蛋白水解酶、透明质酸酶、淀粉酶、脂肪酶等糖类酶和脂类水解酶的作用,此外,尚能稳定溶酶体膜,抑制溶酶体酶的释放,减少心肌抑制因子的产生,改善微循环等作用,该药对急性胰腺炎有良好的治疗效果.我们2003年1月至2006年12月用乌司他丁治疗急性轻症胰腺炎30例,取得了满意的疗效,现报告如下.     

无根根霉脂肪酶的酶学性质研究及酯合成的应用

初步探讨了无根根霉脂肪酶 (RhizopusarrhizusFischerLipase)的酶学性质及酯合成应用。结果表明 :在不同表现形式下该酶具有不同的最适pH、pH稳定性、最适温度和热稳定性。当用胆盐处理发酵液 ,Tween - 80处理菌体细胞时发现该脂肪酶活力分别提高 3倍和 3 5倍。本文利用溶致液晶固定化的方法在有机介质中催化酯合成 ,固定化后该酶酯合成的反应速度比其游离态高 30倍以上。最适条件下 ,合成油酸 - 2 -辛基十二烷酯的能力达 5× 10 - 5mol·hr- 1·u- 1。     

伴鱼鳞病的中性脂质贮存异常的发病机制和屏障功能障碍(Chanarin-Dorfman综合征)

伴鱼鳞病的中性脂质贮存异常(NLSDI;Cha-narin-Dorfm an综合征)是一种鱼鳞病样综合征,经常伴有脂质水解酶CG I-58的突变。组织活检经油红O染色证实存在中性脂滴,以及(或)在血涂片中可见白细胞,同时伴有多系统相互异常的影响和瘙痒性鱼鳞病样红皮病,这些都可以作为NLSDI的诊断依     

血清酯酶活性测定可以诊断胰腺肿瘤

血清脂酶(lipase)是甘油三酯的水解酶,健康人血清中脂酶的活性较低(180单位/升),但是,在急性胰腺炎和胰腺痛时升高(>300单位/升)。     

酿酒酵母表面展示脂肪酶LipB52的酶学性质

酿酒酵母表面展示脂肪酶重组菌株EBY100-pLHJ026在含半乳糖(20 g/L)的YNB-CAA培养基中进行诱导表达,脂肪酶在诱导48 h时酶活达到最高。以不同碳链长度的对硝基苯酚酯为底物对全细胞酶活进行性质检测,结果表明:对硝基苯酚癸酸酯(C10)为最适反应底物;全细胞脂肪酶在pH 8.0时的最适反应温度为37℃,在60℃保温2 h酶活保持90%,在60℃保温3 h酶活保持55%,表现出较好的热稳定性。在等体积二甲基亚砜中处理3 h后酶活保持28.4%。     

乌司他丁治疗急性胰腺炎24例报告

乌司他丁又称尿抑制素 (ｕｌｉｎａｓｔａｔｉｎ) ,是从人尿中提取的精制糖蛋白 ,有抑制胰蛋白酶、弹性蛋白酶、纤溶酶等蛋白水解酶及透明质酸酶、淀粉酶、脂肪酶等糖类和脂类水解酶的作用[1 ] 。2 0 0 1年 7月～ 2 0 0 2年 2月用国产乌司他丁 (广东天普生化医药股份有限公司生产 ,国药准字Ｘ1 9990 1 33)治疗 2 4例急性胰腺炎 (ＡＰ) ,并以用奥曲肽 (善宁 )治疗的 32例ＡＰ作为对照组 ,观察乌司他丁的治疗效果 ,现报告如下。1　材料和方法1 .1　临床资料　治疗组 2 4例 ,其中轻症ＡＰ 1 8例 ,重症ＡＰ 6例 ,男 1 1例 ,女 1 3例 ,平均年龄( …     

国产乌司他丁与甲磺酸加贝酯治疗急性胰腺炎疗效对比

乌司他丁是一种广谱的酶抑制剂 ,对胰蛋白酶、弹性蛋白酶、纤溶酶等蛋白水解酶 ,透明质酸酶、淀粉酶、脂肪酶等糖类和脂类水解酶均有抑制作用[1] 。为观察其对急性胰腺炎的疗效 ,我科近半年来应用乌司他丁治疗急性胰腺炎 2 0例 ,并与以往加贝酯治疗的 30例作对照 ,结果报告如下。1　临床资料1.1　观察对象　治疗组 2 0例中 ,男 12例 ,女 8例 ,平均年龄 42 .8岁 ,病程 3～ 5天 ;对照组 30例 ,男 2 0例 ,女 10例 ,平均年龄 42 .5岁 ,病程 3～ 6天。1.2　分类　按Ｒａｎｓｏｎ标准[2 ] 判断急性胰腺炎严重程度 ,治疗组中轻型胰腺炎 19例 ,重型…     

美洲大蠊三种组织羧酸酯酶总活力和同工酶谱对比

<正> 羧酸酯酶是一组水解酶,可分为:胆碱酯酶。脂肪酶及非特异性酯酶。它广泛分布于动植物组织中,也是昆虫体内的重要水解酶之一。虽然迄今为止对羧酸酯酶在昆虫体内的生理功能不很清楚,但一般认为它在食物消化、有机磷抗性和脂肪代谢中起作用。因此研究羧酸酯酶在昆虫不同组织中的分布、含量及同工酶谱,对于了解该酶在昆虫体内的生理功能有一定意义。本文报道了美洲大蠊血淋巴,消化道和肌肉这三种组织中羧酸酯酶的总活力和同工酶谱。     

非水相中酶催化葡甘聚糖的酯交换反应

探索了生物催化反应制备酯化葡甘聚糖(KGM)衍生物的可能性,并构建了酶催化天然高分子改性的新模式。利用KGM与乙酸乙烯酯在无溶剂体系中的酯交换反应,对8种脂肪酶和5种蛋白酶的催化能力进行了初步评价,并考察了以固定化脂肪酶N ovozym 435作生物催化剂时,不同的非水介质对该反应的影响。结果表明:在本文条件下,这些酶对该反应均具有一定的催化作用;有机溶剂二甲基乙酰胺(DMA c)、甲苯(T o luene)和异辛烷(IOCT)以及其他非水相有机介质,如离子液体N-甲基-咪唑四氟硼酸盐[HM im] [BF4]-和丁二酸二辛基磺酸钠(AOT)/异辛烷反相胶束体系,均有利于脂肪酶N ovozym 435催化的KGM与乙酸乙烯酯的酯交换反应。     

酶法拆分DL—β—乙酰硫基α—甲基丙酸

研究了胰酶和脂肪酶对ＤＬ－加成酸的拆分效果和各种影响因素,结果表明,脂肪酶Ⅰ的拆分效果优于胰酶和脂及酶Ⅱ。脂脑酶Ⅰ酶促反应的最优条件为：底物４．０ｇ,酶用量１．５ｇ,反应时间１２ｈ,反应体系ｐＨ７．０。拆分结果得到Ｄ－加成酸。     

补肾活血方靶向Nrf2介导的铁死亡调控3T3-L1细胞成脂分化功能障碍的研究

目的 探讨补肾活血方对铁过载小鼠前脂肪细胞株(3T3-L1)成脂分化功能的影响及作用机制。方法 连续7 d给45只SD大鼠灌胃补肾活血方(15 g/kg)以制备补肾活血方含药血清。将3T3-L1细胞分为正常对照组、空载体对照组、模型组、铁过载组、Nrf2基因沉默组。采用3T3-L1细胞，使用慢病毒颗粒转染构建核因子E2相关因子-2(Nrf2)基因沉默3T3-L1细胞(3T3-L1 shNrf2)与空载体对照3T3-L1细胞(3T3-L1 shCtrl)。使用柠檬酸铁铵(FAC)构建3T3-L1铁过载细胞模型，并筛选出最优浓度。正常对照组与空载体对照组不予干预，模型组给予FAC,铁过载组和Nrf2基因沉默组给予FAC+补肾活血方含药血清。采用CCK-8法、油红O染色法分别检测各组细胞的存活率及脂质沉积情况。采用实时荧光PCR法检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、激素敏感脂肪酶(HSL)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)mRNA的表达量。采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测细胞上清液中还原型谷胱甘肽(GSH)和脂质过氧化物(LPO)的含量。采用蛋白质印迹法检测转铁蛋白受体(T...     

局部肾素-血管紧张素系统的研究进展

<正> 肾素(renin,R)因首先从肾脏提取而得名,是一种蛋白水解酶,分子量40000;血管紧张素(angiotensin,AT)是经蛋白水解酶作用而产生的肽类激素。肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,简称R-As)的生化链及其有关酶介导的肽类激素的形成,是研究肽类激素形成的经典模型,详见图1。     

鸟嘌呤脱氨酶(胍酶)及其临床意义

一、概述鸟瞟呤脱氨酶(EC3、5、4、3,Guanine Deaminase,CD),又称鸟嘌呤酶或胍酶(Guanase),其系统名为鸟嘌呤氨基水解酶(Guanine aminohydrola-se),属水解酶类,催化鸟嘌呤水解脱氨并生成黄嘌呤,在嘌呤类分解代谢过程中起着十分重要的作用。人体内GD主要位于肝、肾、脑和小肠,心、肺、脾、胰、骨骼肌、红细胞和白细胞含此酶活性极低甚或缺如。GD的细胞内定位:细胞核含酶量约占细胞内GD总活性的3％,线粒体约6％,微粒体约11％,     

实验性皮肤挫伤的组织化学观察

我们对120只小白鼠实验性皮肤挫伤后分别于2分钟到4小时分不同组处死,观察其脂酶(ANAE)、三磷酸腺苷酶(ATP)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)的活性变化。发现挫伤2分钟内受伤局部真皮胶元纤维中有ANAE酶活性增高,但此酶在死后挫伤的小白鼠也出现阳性,因此它不能区别生前与死后挫伤,但作为挫伤的标志可在死后较长期存在。ATP酶受伤后1小时升高,ACP酶约2小时后、AKP酶约4小时后升高。这些酶活性升高可能是与挫伤组织细胞释放水解酶和白细胞活动有关。并用PTAH染色技术证实生前创伤出血灶中大多数有纤维蛋白网存在。     

高密度脂蛋白亚组份对脂蛋白脂肪酶和肝脂酶活性的影响

本研究在体外测定了高密度脂蛋白2(HDL_2)和高密度脂蛋白3(HDL_3)对脂蛋白脂肪酶(LPL)和肝脂酶(HTGL)脂解乳麋微粒(CM)和极低密度脂蛋白(VLDL)的影响。用制备超离心法从正常人血浆分离HDL亚组份。从Ⅰ型高脂血症患者分离CM,从Ⅳ型高脂血症患者分离VLDL,从正常人肝素后血浆分离两种脂酶。用VLDL和CM作底物,增加HDL_2的量可分别增加LPL的活性65％和55％,分别减少HTGL的活性60％和67％;而HDL_3对LPL和HTGL的活性无明显影响。     

雌激素对去势小鼠LPL、HL活性的影响

目的　探讨雌激素对卵巢切除 (OVX)的去势小鼠脂蛋白脂酶 (LPL)和肝脂肪酶 (HL)活性的影响。方法　将 30只成年的雌鼠随机分 3组 ,每组 10只。A组为正常饲料 OVX 生理盐水 ,B组为高脂饲料 OVX 生理盐水 ,C组为高脂饲料 OVX 雌激素。喂养 10周后取血 ,分别检测甘油三酯 (TG)、血清脂蛋白脂肪酶 (LPL)、肝脂肪酶 (HL)水平。结果　A、B和C组的TG分别是 (0 2 7± 0 14 )mmol/L、(0 2 8± 0 10 )mmol/L和 (0 30± 0 14 )mmol/L。A、B和C组的LPL分别是 (1 6 7±0 35 )mmol/L、(1 5 3± 0 32 )mmol/L和 (1 0 0± 0 2 8)mmol/L。A、B和C组的HL分别为 (0 4 5± 0 11)mmol/L、(0 4 3± 0 11)mmol/L和 (0 2 9± 0 13)mmol/L。各组的TG差异无显著性 ,但C组的LPL及HL均比对照组低 (P <0 0 5 )。结论　雌激素能降低去势小鼠LPL、HL活性。     

抗人载脂蛋白C_Ⅰ、C_Ⅱ单克隆抗体研制及免疫学特性分析

载脂蛋白(apo)CⅠ、CⅢ主要分布在富含甘油三脂的脂蛋白中。apoCⅠ是卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的激活剂,可能有激活脂蛋白脂酶(LPL)和抑制肝脂肪水解酶的作用。aPoCⅢ有抑制LPL和apoE的摄取作用。近来研究表明,aPoCⅠ可将外周组织的胆固醇(TC)运至肝脏进行降解和排泄过程中,以及在防止极低密度脂蛋白