灯盏花素干预大鼠肝星状细胞TGFβ1、α-SMA的表达

目的 研究灯盏花素对CCl4诱导的肝纤维化模型大鼠TGFβ1、α-SMA表达的研究.方法 本实验用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,喂服灯盏花素.60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、灯盏花素高剂量组、灯盏花素中剂量组、灯盏花素低剂量组、秋水仙碱组.用药4w后,测定肝纤维化模型大鼠的谷草转氨酶、谷丙转氨酶,检测平滑肌肌动蛋白mRNA和蛋白的表达,转化生长因子mRNA与蛋白的表达.结果 模型组大鼠血清ALT、AST明显高于正常对照组(P＜0.05).与模型组相比较,灯盏花素高、中、低剂量组ALT、AST均明显降低(P＜0.05).模型组与正常对照组α-SMA mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01);灯盏花素不同剂量组均能使α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).模型组与正常对照组TGFβ1 mRNA及蛋白有显著性差异(P＜0.01),灯盏花素不同剂量组均能使TGFβ1 mRNA及蛋白的表达显著降低(P＜0.01或P＜0.05).光镜显示:灯盏花素各剂量组的肝脏病理学改变较模型组减轻.结论 ①灯盏花素能保护肝细胞活性,促进肝细胞修复再生;降低转氨酶,具有抗肝纤维化作用.②灯盏花素可以降低α-SMA、TGFβ1表达,抑制星状细胞激活.     

转化生长因子β1反义寡核苷酸抑制单侧肾切除糖尿病大鼠系膜增生

目的 探讨转化生长因子（TGF）β1反义寡核苷酸对单侧肾切除糖尿病大鼠系膜增生的作用。方法 采用人工合成TGF－β1反义、正义及错配的3组寡核苷酸经脂质体包裹柏转染单侧肾切除糖尿病大鼠肾小球系膜细胞（MC）。用细胞计数检测转染后MC的生长抑制率，用RT－PCR和ELISA方法检测TGF－β1 mRNA和蛋白的表达水平，并检测IV型胶原mRNA表达水平的变化。结果 TGF－β1反义寡核苷酸可抑制MC的存活，TGF－β1 mRNA及蛋白的表达水平下降，IV型胶原mRNA的水平也下降。结论 TGF－β1反义寡核苷酸不仅抑制TGF－β1 mRNA及蛋白的表达，而且还可抑制细胞外基质IV型胶原mRNA的表达，抑制MC的肥大，从而抑制单侧肾切除糖尿病大鼠系膜的增生。     

灯盏花素在气道黏液高分泌大鼠模型中的治疗作用

目的研究灯盏花素在气道黏液高分泌疾病中的治疗作用。方法采用中性粒细胞弹力酶雾化吸人法制作大鼠气道黏液高分泌病理模型,以灯盏花素注射液为干预因素,生理盐水为对照,分别以RT-PCR、ELISA法检测各组气道上皮黏蛋白的表达情况,wester nblot检测蛋白激酶C（PKC）的蛋白水平,放射活性法测定PKC的活性。结果灯盏花素治疗组中的黏蛋白基因转录及蛋白表达水平明显低于对照组,同时伴有组织中蛋白激酶C（PKC）蛋白水平及活性的降低。结论灯盏花素能在一定程度上抑制大鼠气道黏液高分泌,其作用是通过抑制PKC活性而实现。     

灯盏花素改善应激性心肌病大鼠心功能异常的机制

目的探讨灯盏花素改善应激性心肌病心功能异常的机制。方法 48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、灯盏花素组和JAK通路抑制剂AT9283组(n=12)。采用束缚加点击符合应激法制备应激性大鼠模型,并进行灯盏花素干预治疗,分析各组大鼠心脏功能变化及JAK通路蛋白的表达变化。结果应激性大鼠左心室收缩压明显降低(P0.01),左心室舒张压、心脏指数和心肌组织羟脯氨酸含量明显升高(P0.01);同时,细胞凋亡蛋白Bax、Caspase3和Caspase6及JAK1、JAK2、JAK3、TIMP1、TIMP2、TIMP4、GRP78和CHOP蛋白表达水平明显升高(P0.01),TGFβ、Bcl2蛋白表达明显降低(P0.01)。经灯盏花素干预后上述异常得到明显的恢复(P0.01)。结论灯盏花素改善应激性大鼠心肌病心功能异常可能与其调控JAK通路异常激活和细胞凋亡过程有关。     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠肾组织局部肾素-血管紧张素系统活性及转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨利拉鲁肽是否能够抑制糖尿病大鼠肾组织局部肾素-血管紧张素系统（RAS）,进而下调转化生长因子（TGF）-β1表达。方法给予4周龄雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素鼠尾静脉注射建立糖尿病大鼠模型20只,采用随机数字表法分为糖尿病组和利拉鲁肽组,每组10只,同时设对照组10只。利拉鲁肽组予以利拉鲁肽（400μg· kg-1· d-1）皮下注射,对照组和糖尿病组大鼠给予等量生理盐水皮下注射。12周后,应用实时定量聚合酶链反应（PCR）、Western blotting法检测比较各组大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）和TGF-β1表达的变化,酶联免疫吸附实验检测各组肾组织血管紧张素（ Ang）Ⅱ的表达,Masson染色观察各组大鼠肾组织胶原沉积情况。采用单因素方差分析比较组间差异,两两比较采用LSD检验。结果 Masson染色显示,糖尿病组大鼠肾组织胶原纤维沉积对照组明显增多,利拉鲁肽组大鼠肾组织胶原纤维沉积较糖尿病组少。糖尿病组大鼠肾组织AngⅡ表达显著高于对照组（t＝3.444,P＜0.05）,利拉鲁肽组大鼠肾组织AngⅡ表达则较糖尿病组显著降低（ t＝2.614,P＜0.05）。糖尿病组大鼠肾组织AT1R、TGF-β1 mRNA和蛋白表达显著高于对照组（t＝4.084、3.714、9.381、6.408,均P＜0.05）。利拉鲁肽组大鼠肾组织AT1R、TGF-β1mRNA和蛋白表达显著低于糖尿病组（ t＝3.487、2.907、5.033、2.295,均P＜0.05）。结论利拉鲁肽可抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1的表达发挥肾保护作用,可能与其抑制肾组织局部RAS活性有关。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾小球NO／NOS的影响

成年健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照（NC）gi、糖尿病（DM）组、灯盏花素（EB）组,每组24只。成模2和8周后,分别测定内生肌酐清除率、尿白蛋白、肾重／体重、肾小球PKC活性、NO和NOS含量。发现灯盏花素对糖尿病肾病有保护作用,并可能通过抑制PKC的活性影响NO／NOS。     

阻断肾素-血管紧张素系统对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶CβⅡ亚型的影响

目的　研究链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC) βⅡ亚型的表达和转位 ,以及阻断肾素 血管紧张素系统 (RAS)对其的影响。方法　糖尿病模型大鼠随机分为伊贝沙坦组 (4 0mg·kg-1·d-1)、福辛普利组 (4 0mg·kg-1·d-1)、两药合用组 (各 2 0mg·kg-1·d-1)、糖尿病对照组。另设正常对照组。给药 4周末检测各组血糖、胰岛素水平 ,采用免疫组化法检测肾组织中PKCβⅡ的表达 ,Western印迹法检测肾皮质、髓质PKCβⅡ的表达和胞膜转位情况。结果　糖尿病对照组肾皮质总的和胞膜部分的PKCβⅡ表达量均明显降低 ,分别为正常对照组的 66.0 %和 5 0 .0 % (均P <0 .0 5 ) ,而各治疗组均可部分地纠正这种异常。肾髓质各组间PKCβⅡ的总量及胞膜、胞浆部分的量差异无显著性。结论　早期糖尿病大鼠肾脏中PKCβⅡ的表达存在着量和转位的异常 ,而阻断RAS可部分纠正这种变化 ,提示RAS可通过影响PKC转导途径的异常而参与糖尿病肾病的发生发展机制。     

缬沙坦联合丹参对糖尿病大鼠肾脏病理结构及TGF-β1表达的影响

目的 应用缬沙坦联合丹参对糖尿病肾病(DN)大鼠模型进行干预,观察其对肾小球平均体积、肾毛细血管基底膜平均厚度及肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨两药联用的肾保护作用及可能的机制.方法 应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病(DM)大鼠模型,随机分为4组正常对照组、模型组、缬沙坦组、缬沙坦与丹参联合治疗组(联合组).8 w后观察各组血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAE)、尿β2微球蛋白排泄率(β2-MG)等变化.光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球的平均体积、电镜观察并测定肾小球毛细血管基底膜平均厚度.免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达.结果 与对照组相比,模型组及各给药组大鼠血糖、HbAlc、Ccr、UAE、β2-MG均显著上升(P＜0.01);肾小球平均体积、毛细血管基底膜平均厚度均显著扩大(P＜0.01);肾组织中TGF-β1的蛋白质表达显著上调(P＜0.01).缬沙坦和(或)丹参干预后,上述上调指标除血糖、HbAlc外均被显著抑制(P＜0.05或0.01),联合组优于缬沙坦组(P＜0.05).结论 缬沙坦联合丹参对DM大鼠具有改善肾脏病理结构的肾保护作用.其机制可能与其下调肾组织中TGF-β1的表达有关.     

灯盏花素联合还原型谷胱甘肽治疗糖尿病肾病的临床疗效

目的观察灯盏花素联合还原型谷胱甘肽治疗糖尿病肾病(DN)的临床疗效。方法将108例Ⅳ期DN患者随机分为3组,A组(对照组,n=38):仅予控制血糖、血压、血脂等基本治疗;B组(灯盏花素治疗组,n=38):在一般治疗的基础上加用灯盏花素40 mg静脉滴注,1次/d。C组(灯盏花素联合还原型谷胱甘肽治疗组,n=32):在一般治疗的基础上加用灯盏花素40 mg/d及还原型谷胱甘肽1.8 g/d静脉滴注。共治疗14 d。3组患者于治疗前、后分别检测血糖、血脂、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24 h尿总蛋白、白蛋白和尿β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平。结果与A组相比,B组患者SCr、BUN、尿24 h总蛋白、白蛋白排泄量和尿β2-MG、NAG水平均有不同程度降低,但尿24 h总蛋白、白蛋白、尿β2-MG与A组相比无显著差异(P>0.05);C组患者24 h尿蛋白、白蛋白排泄量和尿β2-MG、NAG水平较单用灯盏花素组降低更为明显(P<0.05),但SCr和BUN与B组相比虽有进一步下降,但无显著差异(P>0.05)。结论灯盏花素可以改善DN患者肾小球及肾小管功能;而灯盏花素与还原型谷胱甘肽联合治疗则疗效更佳。     

鳖甲煎丸对肾间质纤维化模型大鼠肾脏肾上腺髓质素及TGF—β1的影响

目的观察鳖甲煎丸对肾间质纤维化大鼠肾组织中肾上腺髓质素（ADM）、转化生长因子（TGF）-β1表达的影响。方法SD大鼠采用单侧输尿管结扎（UUO）的方法制备肾间质纤维化模型，将其随机分为鳖甲煎丸组、缬沙坦组与模型组，并设假手术组（分离输尿管后缝合腹部）。缬沙坦组、鳖甲煎丸组分别给予缬沙坦10mg&#183;kg^-1&#183;d^-1、鳖甲煎丸1．6g&#183;kg^-1&#183;d^-1灌胃，模型组和假手术组每日给予等容积的蒸馏水。所有动物于术后第14天断头处死，切取左肾，留取肾组织标本。采用免疫组化及RT-PCR方法观察梗阻侧肾脏ADM、TGF—β1在蛋白及基因水平的表达，放射免疫法测定ADM在肾组织中蛋白含量。结果模型组及各治疗组大鼠肾脏ADM蛋白含量、蛋白表达及mRNA的表达较假手术组明显降低，鳖甲煎丸组、缬沙坦组的含量均高于模型组（P〈0．05）；TGF—β1的蛋白及mRNA的表达各治疗组明显低于模型组（P〈0．05），鳖甲煎丸组、缬沙坦组两组之间比较无显著性差异。结论鳖甲煎丸能够上调肾间质纤维化大鼠肾脏ADM的蛋白及mRNA的表达，下调TGF—β1的表达，对肾脏起到保护作用。     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

Replication and Inhibitors of Enteroviruses and Parechoviruses

The Enterovirus (EV) and Parechovirus genera of the picornavirus family include many important human pathogens, including poliovirus, rhinovirus, EV-A71, EV-D68, and human parechoviruses (HPeV). They cause a wide variety of diseases, ranging from a simple common cold to life-threatening diseases such as encephalitis and myocarditis. At the moment, no antiviral therapy is available against these viruses and it is not feasible to develop vaccines against all EVs and HPeVs due to the great number of serotypes. Therefore, a lot of effort is being invested in the development of antiviral drugs. Both viral proteins and host proteins essential for virus replication can be used as targets for virus inhibitors. As such, a good understanding of the complex process of virus replication is pivotal in the design of antiviral strategies goes hand in hand with a good understanding of the complex process of virus replication. In this review, we will give an overview of the current state of knowledge of EV and HPeV replication and how this can be inhibited by small-molecule inhibitors.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fos and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44~(MAPK), p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44~(MAPK), p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44~(MAPK) and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between P42/44~(MAPK) and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Raf/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44~(MAPK), c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

心电图、心电向量图与冠状动脉造影结果对比分析

目的:通过分析心电图(Electrocardiogram,ECG)和心电向量图(Vectorcardiogram,VCG)的改变与冠脉造影（CAG）结果进行对比,探讨ECG、VCG在冠状动脉病变中的诊断价值。方法: 选择2008年1月~2009年12月临床拟诊断为冠心病患者108例,行常规ECG、VCG检查,并于1周内进行CAG,对检查结果依据各自的诊断标准进行判定,以CAG为标准诊断法,利用四格表法,计算相关评价真实性的指标并进行比较。结果: ①VCG检测的灵敏度、特异度、准确度显著高于ECG(P<0.05,P<0．01)。②ECG、VCG阳性率与冠脉病变支数组间比较:在单支病变、双支病变中,VCG阳性率明显高于ECG(P<0.05),左主干或三支病变无统计学意义;组内比较:ECG组左主干或三支病变组较单支病变、双支病变阳性率高(P<0.05,P<0.01);VCG组左主干或三支病变组较单支病变阳性率高(P<0.05);与双支病变阳性率比较无统计学意义;③ECG、VCG阳性率与冠脉病变程度组间比较:冠脉病变狭窄50%～69%的VCG阳性率明显高于ECG (P<0.05),其他两组阳性率比较无统计学意义;组内比较:ECG组冠脉病变狭窄≥90%较50%～69%、70%～89%的阳性率高(P<0.05,P<0.01); VCG组狭窄≥90%较50%～69%阳性率高（P<0.01),其他无统计学意义。结论: VCG对冠心病检测价值显著高于ECG。     

Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence

Here we report the structural characterization of the product formed from the reaction between hydroethidine (HE) and superoxide (O(2)(.-)). By using mass spectral and NMR techniques, the chemical structure of this product was determined as 2-hydroxyethidium (2-OH-E(+)). By using an authentic standard, we developed an HPLC approach to detect and quantitate the reaction product of HE and O(2)(.-) formed in bovine aortic endothelial cells after treatment with menadione or antimycin A to induce intracellular reactive oxygen species. Concomitantly, we used a spin trap, 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline N-oxide (BMPO), to detect and identify the structure of reactive oxygen species formed. BMPO trapped the O(2)(.-) that formed extracellularly and was detected as the BMPO-OH adduct during use of the EPR technique. BMPO, being cell-permeable, inhibited the intracellular formation of 2-OH-E(+). However, the intracellular BMPO spin adduct was not detected. The definitive characterization of the reaction product of O(2)(.-) with HE described here forms the basis of an unambiguous assay for intracellular detection and quantitation of O(2)(.-). Analysis of the fluorescence characteristics of ethidium (E(+)) and 2-OH-E(+) strongly suggests that the currently available fluorescence methodology is not suitable for quantitating intracellular O(2)(.-). We conclude that the HPLC/fluorescence assay using HE as a probe is more suitable [corrected] for detecting intracellular O(2)(.-).     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用F icoll-PaqueTMP lus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rM SC s)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rM SC s转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077 g/L的F icoll-PaqueTMP lus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rM SC s的效率。     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fas and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44MAPK, p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44MAPK, p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44MAPK and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between p42/44MAPK and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Rat/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44MAPK, c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

医源性消化道出血常见病因及其防治

目的分析医源性消化道出血的常见病因,并探讨防治措施。方法就临床所见的69例医源性消化道出血进行分析。结果医源性消化道出血分布于临床各科室,病因各不相同,但以外科手术、外伤、脑血管意外、。肾功能衰竭、呼吸功能衰竭、激素治疗、阿司匹林治疗等为主,临床上多以黑便为主要症状;对于已发生的医源性消化道出血,及时予制酸剂和胃黏膜保护剂治疗,能及时止血,大出血时经积极止血及抗休克治疗,甚至内镜治疗效果良好。结论医源性消化道出血各个临床科室均常见,病因各异,经积极、合理的治疗多预后良好。     

Overweight and Obesity and Progression of ADPKD

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