HPLC同时测定复方祖师麻片中8种有效成分的含量

目的建立HPLC同时测定复方祖师麻片中芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、甘草酸、瑞香素、7OH香豆素、异甘草苷、西瑞香素含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Hedera ODS2（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相为乙腈(A)0.05%磷酸水溶液(B),1 mL/min梯度洗脱;检测波长:237 nm（检测芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、甘草酸）、327 nm（检测瑞香素、7OH香豆素）、360 nm（检测异甘草苷、西瑞香素）。结果在65 min内复方祖师麻片中的8种有效成分完全分离;峰面积与其浓度呈良好线性关系。结论本方法简便、准确可靠,专属性强,可用于复方祖师麻片的质量控制。      

菊苣化学成分的LC-MS／MS定性分析与HPLC含量测定

目的建立菊苣化学成分的定性、定量分析方法,完善药材质量控制手段。方法以HPLCDAD-ESI-MS方法,对菊苣化学成分进行定性鉴定,并采用HPLC方法同时测定菊苣中5种化学成分含量。结果从菊苣中共鉴定了10个化学成分,其中6个成分的保留时间和质谱碎片离子信息与对照品一致,分别为秦皮甲素、绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、异绿原酸B、异绿原酸A;根据质谱碎片信息并结合文献数据初步确定了另外4个成分的化学结构。建立了菊苣中绿原酸、秦皮乙素、菊苣酸、异绿原酸B、异绿原酸A的回归方程,线性关系均良好(r0.999 5),加样回收率为95.94%~104.41%,采用此方法成功检测了10个菊苣样品中上述5种成分的含量。结论研究建立的方法可定性、定量分析菊苣中的主要化学成分,可用于菊苣药材的质量分析。     

HPLC法同时测定牛黄清感胶囊中8种有效成分的含量

[目的]建立牛黄清感胶囊HPLC含量测定,用于该制剂的质量控制。[方法]运用Waters Alliance 2695高效液相色谱仪,采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液,梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为350 nm。[结果]建立同时测定牛黄清感胶囊8个成分隐绿原酸,绿原酸,异绿原酸C,连翘酯苷A,黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷和汉黄芩素的方法。[结论]该方法稳定、准确、重现性好,专属性强,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。     

HPLC法同时测定二花青叶抗敏洗剂中绿原酸、咖啡酸、芍药苷的含量

目的:建立同时测定二花青叶抗敏洗剂中绿原酸、咖啡酸和芍药苷的HPLC方法。方法:色谱柱:Inertsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相(乙腈-0.02%磷酸水溶液11∶89);流速1.00 m L·min-1;绿原酸和咖啡酸检测波长323 nm,芍药苷检测波长230 nm。结果:绿原酸、咖啡酸和芍药苷与峰面积呈良好线性关系,线性范围分别是:绿原酸1.87~120.00μg(r=0.999 9),加样回收率为99.85%(RSD=0.88%)、咖啡酸1.25~80.00μg(r=0.999 9),加样回收率为99.97%(RSD=2.07%)、芍药苷7.03~450.00μg(r=1.0000),加样回收率为100.42%(RSD=2.20%)。结论:该方法快速、准确,适用于同时测定二花青叶抗敏洗剂中绿原酸、咖啡酸和芍药苷的含量。     

HPLC-DAD法分析栝楼桂枝汤血中移行成分

目的研究栝楼桂枝汤血中移行成分。方法采用HPLC-DAD全波长扫描法,色谱柱:Diamonsial C18（460×250 mm,5μm）;流动相:乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱;流速:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样量:10μL。结果采用相对保留时间和DAD全波长扫描图相结合,推测大鼠灌胃给药栝楼桂枝汤后含药血清中有22个入血移行成分,并经标品比对鉴定其中16个化合物:没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷亚硫酸酯、芍药内酯苷、芍药苷、芹糖甘草苷、甘草苷、五没食子酰葡萄糖、芹糖异甘草苷、异甘草苷、芒柄花苷、甘草素、肉桂酸、苯甲酰芍药苷、异甘草素、甘草酸。结论本研究基于DAD全波长扫描法分析复方血中移行成分,为揭示栝楼桂枝汤在体内抗脑卒中后肢体痉挛与神经保护药效物质提供一定实验依据。     

基于药材原产地芍药甘草汤质量评价体系研究

目的 采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定芍药甘草汤中没食子酸、芍药苷、甘草苷、甘草素和甘草酸5种指标成分的含量并建立芍药甘草汤指纹图谱,探究芍药甘草汤中间体关键质量属性,为其药材基源筛选和质量控制提供参考。方法 制备来自不同产地不同批次的18批芍药甘草汤冻干粉作为中间体样品;采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.8 mL/min,进样量10μL,对指标成分的含量和指纹图谱进行检测,评价多批次芍药甘草汤中间体质量属性差异,为其质量标准的建立提供参考。结果 5种成分线性关系(R²>0.999)、精密度(RSD≤0.89%,n=6)、重复性(RSD≤1.35%,n=6)、稳定性(RSD≤1.87%,72 h)均良好,加样回收率为(98.24±1.85)%～(104.88±1.38)%(n=6)。含量测定结果显示在不同批次芍药甘草汤中间体中仅没食子酸的含量波动范围较小(4.74～5.92 mg/g),芍药苷、甘草苷、甘草素和...     

芍药甘草汤功能与药效组分对应性研究

目的研究经方芍药甘草汤9种药效组分(氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、甘草酸、甘草苷、甘草素、异甘草苷和异甘草素)的变化规律,探讨芍药甘草汤功能与药效组分的对应性。方法以经方芍药甘草汤(《伤寒论》方)为载体,用5个不同配伍组分的芍药甘草汤作为对照,采用高效液相二极管陈列检测法测定含量。结果不同配伍的芍药甘草汤9种药效组分为(mg/ml):《伤寒论》方为1.92、0.90、3.51、0.53、8.35、3.16、0.77、0.77和0.15;《传信适用方》为0.92、0.45、1.62、0.37、0.78、0.34、0.06、0.10和0.01;《朱氏集验方》一为1.59、0.82、3.28、0.49、3.15、1.10、0.27、0.44和0.08;《朱氏集验方》二为1.14、0.52、2.12、0.41、2.92、0.97、0.22、0.36、0.06;《魏氏家藏方》为1.38、0.59、2.70、0.43、2.40、0.35、0.06、0.10和0.01;《医门八法》方为1.52、0.67、2.91、0.45、3.00、1.07、0.24、0.42和0.07。结论 1.9种药效组分变化规律为:《伤寒论》方>《朱氏集验方》一>《医门八法》方;《朱氏集验方》二中的药效组分氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷含量<《魏氏家藏方》,而甘草酸、甘草苷、甘草素、异甘草苷和异甘草素含量>《魏氏家藏方》;《传信适用方》方中9种药效组分含量最低。2.配伍不同,药效组分总量和比例也不同,临床疗效也各异:《伤寒论》方药效组分总量为20.06 mg/ml,用于止痛;《朱氏集验方》一药效组分总量为11.216 mg/ml,用于消渴;《朱氏集验方》二药效组分总量为8.72 mg/ml,用于治脚弱无力;《传信适用方》药效组分总量为4.65 mg/ml,用于治湿气腿脚赤肿疼痛;《魏氏家藏方》药效组分总量为8.02 mg/ml,用于治湿热脚气;《医门八法》方药效组分总量为10.35 mg/ml,用于治胃气痛。     

HPLC测定独活寄生汤水提物中芍药苷、盐酸川芎嗪、蛇床子素的含量

目的建立独活寄生汤水提物中芍药苷、盐酸川芎嗪、蛇床子素的HPLC分析方法。方法色谱柱:UltimateTM XB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:A（水）∶B（甲醇）=010 min,60∶40;1012 min,20∶80;1222 min,20∶8;流速:1.0 m L/min;进样体积:10μL;紫外检测器波长:230 nm;柱温:30℃。结果 HPLC检测独活寄生汤水提物中芍药苷、盐酸川芎嗪及蛇床子素的含量分别为0.100 7%、0.003 1%、0.015 6%。结论 HPLC分析方法可用于独活寄生汤水提物中芍药苷、盐酸川芎嗪、蛇床子素的含量测定,为独活寄生汤水提物质量控制提供参考。     

保元汤中黄酮类成分的分离和结构鉴定

目的 对中药复方保元汤中的化学成分进行研究。方法 用多种色谱和光谱方法对保元汤中的化学成分进行分离和结构鉴定。结果 从保元汤水提物中分离得到15个黄酮类化合物,分别是异甘草素葡萄糖芹糖苷(1)、芒柄花苷(2)、芒柄花素(3)、异短尖剑豆酚(4)、达维荚迷苷元(5)、2′,4′二甲氧基3′羟基异黄烷6-O-β-D-葡萄糖苷(6)、(6a-R-,11a-R-)9,10二甲氧基紫檀烷3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、大萼赝靛素(毛蕊异黄酮,8)、甘草素(9)、5去羟山柰素(10)、甘草苷(11)、异甘草苷(12)、异甘草素(13)、7 ,3′二羟基5′甲氧基异黄酮(14)、降香黄烃(odoriflavene,15)。结论 以上化合物均为首次从保元汤中分离得到。     

牛蒡子炮制前后水煎液中主要成分含量变化研究

目的研究牛蒡子炮制前后水煎液中主要成分含量变化,探讨牛蒡子"杀酶保苷"作用。方法采用高效液相色谱法,研究10批不同产地牛蒡子,以牛蒡子中绿原酸、异绿原酸、牛蒡苷及牛蒡苷元4个主要活性成分含量为指标,测定炮制前后水煎液中含量变化。结果牛蒡子炮制后水煎液中牛蒡苷、绿原酸和异绿原酸A的含量降低,而牛蒡苷元的含量升高。从总体上来说,牛蒡子经炮制后有效成分含量降低。结论牛蒡子炮制后并不能显著提高主要成分溶出,反而由于炮制过程引起成分变化,造成炮制后主要成分含量降低。牛蒡子炮制后水煎液中主要成分含量发生显著变化,炮制后"杀酶保苷"机理有待进一步研究。     

人工栽培关白附中二萜生物碱的HPLC-Q-TOF-MS鉴别

建立了快速鉴定3年生人工栽培的关白附中二萜生物碱类化学成分的分析方法。采用碱化乙醚超声提取关白附药材粉末,提取物以流动相定容制备供试液;样品用Zorbax-SB C₁₈柱分离,以含0.2%甲酸和0.1%三乙胺的缓冲溶液/乙腈为流动相,梯度洗脱,应用ESI-Q-TOF检测,正离子模式下采集数据;根据色谱峰的准确分子量、液相色谱保留时间以及质谱裂解方式比较等方法鉴别化合物。结果表明,借助HPLC-Q-TOF-MS方法从关白附中分离检测出60个成分,根据保留时间和二级质谱裂解规律鉴定了其中26个二萜生物碱,为人工载培关白附的化学成分鉴定和未知化合物发现提供了一种快速方法。与此同时总结了C₂₀-二萜生物碱(Hetisine型、Atisine型)及C₁₉二萜生物碱(Lycoctonine型)在ESI正离子模式下的质谱裂解规律。     

UPLC-QTOF-MS分析乌蔹莓成分及多组分定量研究

目的 定性分析乌蔹莓化学成分并对其主要成分建立定量分析方法。方法 采用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS）技术,选用ACQUITY UPLC HSS T₃色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,质谱采用电喷雾（ESI）离子源,在正、负离子模式下采集数据。运用PeakView软件对结果进行分析,根据化合物的相对保留时间、准分子离子峰和碎片离子峰等信息,并结合对照品和相关文献进行成分鉴定。采用UPLC法对4个主要成分（木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素）建立含量测定方法。结果 从乌蔹莓中共推断并鉴定出31个化学成分,包括黄酮及其苷类6个,香豆素类3个,萜类及三萜类7个,脂肪酸酯类7个,其他类8个。3批乌蔹莓中木犀草素-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素、芹菜素含量范围分别为0.061%~0.15%、0.077%~0.14%、0.011%~0.028%、0.020%~0.062%。结论 该分析方法可以快速、准确地分析乌蔹莓中的化学成分,建立的定量方法为乌蔹莓质量控制及制剂开发奠定了基础。      

HPLC——MS法测定大鼠血浆中银杏萜内酯的浓度及药代动力学研究

Objective: To establish HPLC-MS method for simultaneous concentration determination of ginkolides(GA) , ginkolides B (GB), and ginkolides C (GC) in rat plasma, and to apply it to the pharmacokinetic study in rats. Methods: Ketone ibuprofen was used as internal standard, ammonium acetate in methanol - 10 mmol/L aqueous solution was used as mobile phase, the plasma samples of GA, GB, GC, and internal standard by were divided the ZORBAX SB - C18 (250 mm x 4.6 mm, 5 microns) chromatographic column separation, and by using electrospray ion source (ESI), negative ion level of full scan mode was detected. The method was used in pharmacokinetic study of shu xuening with intravenous administration in rat. Pharmacokinetic parameters were calculated by DAS2.0 statistical software. Results: GA, GB and GC were in 50 ~ 5000 ng/mL in linear range , and batch variations were less than 10%, the relative errors were -1.0% ~ -3.0%, -1.2% ~ -1.5% and -2.9% ~ -3.2%, respectively. And the methodology met the requirements. Conclusion: The established HPLC-MS method has high sensitivity, strong specificity, and may be suitable for the pharmacokinetic study of the ginkgo biloba extract.     

柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散对抑郁大鼠粪便代谢组学的比较

目的   应用1H-NMR代谢组学技术探究慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁大鼠粪便代谢组学的变化,评价柴胡和白芍醋炙前后组方四逆散的抗抑郁作用,并探讨四逆散中君药柴胡和臣药白芍醋炙的增效机制及炮制内涵。方法   利用CUMS程序建立大鼠抑郁模型,以1H-NMR为技术手段研究不同给药情况下抑郁大鼠粪便代谢组学的变化。结果   CUMS抑郁大鼠模型复制成功。代谢组学结果表明,与空白组比较,模型组大鼠中共有17种代谢物水平发生变化。与模型组比较,四逆散组及柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预后的抑郁大鼠代谢发生显著变化。与四逆散组比较,柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散组干预的抑郁大鼠粪便中乳酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、甲酸、乙酸、苏氨酸6种代谢物的水平发生变化,同时对丙酮酸代谢、糖酵解与糖质新生代谢、甲烷代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、甘氨酸-丝氨酸-苏氨酸代谢、氨酰合成代谢共6条代谢通路产生影响。结论   柴胡和白芍醋炙后组方的四逆散抗抑郁作用更佳,这可能与能量代谢、氨基酸代谢、免疫调控及肠道菌群有关。      

茚三酮比色法测乙肝宁水提物中总游离氨基酸含量

目的:建立乙肝宁复方水提物中总游离氨基酸含量测定的方法。方法:以乙肝宁复方水提物中总游离氨基酸含量和蛋白质含量为指标,对总游离氨基酸含量测定最佳除蛋白的乙醇浓度和药液比进行筛选;采用茚三酮比色分光光度法,于568 nm,测定乙肝宁复方中总游离氨基酸的含量。结果:醇浓度为70%,生药浓度为1 g/mL(生药比1∶6)可较好除去蛋白质等大分子物质,减少测定干扰;采用茚三酮比色法,标准曲线方程为:A=0.055 9C-0.225 3(r=0.999 1),平均回收率为98.8%,RSD为2.07%(n=9),线性关系良好。该法测得乙肝宁复方药材中总游离氨基酸的含量为1.47%,乙肝宁浸膏中含量为5.65%。结论:该方法简便、快速准确,可用于测定乙肝宁复方中游离氨基酸的含量测定。     

尿液中12种全氟化合物的固相萃取-超高效液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱分析方法研究

  目的  建立超高效液相色谱串联四极杆线性离子阱质谱同时测定尿液中12种全氟化合物（PFCs）的方法。  方法  尿样经2%甲酸调节pH后,用WAX柱萃取净化浓缩,收集洗脱液氮吹,10 mmol/L乙酸铵-甲醇（V_水∶V_甲=70∶30）复溶,离心取上清液进样分析。超高效液相色谱采用甲醇和10 mmol/L乙酸铵水溶液在C₁₈柱上梯度洗脱进行分离,质谱采用多反应监测,内标法定量。  结果  方法在线性范围内线性良好,检出限和定量限分别为0.032～6.5 ng/L和0.10～21 ng/L。12种PFCs的加标回收率为91.5%～114%,日内精密度和日间精密度分别为0.57%～16.0%和1.88%～20.1%。将建立的方法应用于某地小学生尿液的测定,可检出9种PFCs,其中全氟丁烷磺酸和全氟辛酸为当地学生尿样的主要组成部分。  结论  建立的方法可同时测定尿液中12种全氟化合物,方法结合固相萃取和同位素内标校正,得到了良好的灵敏度和准确度。     

甘草地上部分不同提取方法提取物成分HPLC-MS/MS分析

[目的]对甘草地上部分的水提物、醇提物和CO_2超临界萃取物中黄酮类成分的组成进行分析。[方法]高效液相色谱法(HPLC)Agilent SB-C₁₈柱,乙腈-0.5%甲酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL,检测波280 nm。质谱使用电喷雾离子源,负离子模式。[结果]在水提物中共定性出9个化合物,主要为黄酮(醇)苷类物质;在醇提物中共定性出14个化合物,主要为黄酮(醇)苷元类物质和异戊烯基黄酮类物质;在CO_2超临界萃取物中共定性出10个化合物,主要为异戊烯基黄酮类物质。[结论]鉴定出甘草地上部分不同提取方法提取物中有不同性质的黄酮类物质,可以为后续提取富集研究提供依据。     

基于知母多糖干预的T2DM大鼠红细胞磷脂代谢组学判别模型构建及药理标志物筛选

目的 建立大鼠红细胞磷脂的代谢组学判别模型,综合运用多种统计学分析方法寻找知母多糖治疗2型糖尿病的红细胞磷脂药理标志物.方法 以高脂饲料喂饲8周龄的SD大鼠8周后,腹腔注射40 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病模型.给药组分别灌胃知母多糖及二甲双胍干预治疗8周后,取血分离红细胞制备红细胞磷脂.采用UPLC/Q-TOF分析大鼠在2型糖尿病状态下以及经知母多糖干预后红细胞磷脂的变化.数据导入Simca P V12软件进行多元统计分析处理,通过R软件的BioMark包以及MetaboAnalyst 3.0软件进行代谢物筛选.结果 建立了4组大鼠红细胞磷脂的偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)模型,正离子下模型的R2=0.934,Q2=0.534,负离子下模型的R2=0.914,Q2=0.642,由PLS-DA模型的得分图上可见,在正、负离子模式下,前3个主成分均可充分提取4组差异信息.通过R软件的BioMark包筛选并通过ROC分析排除假阳性结果,最终共筛选出知母多糖药理标志物10个,筛选得到的知母多糖药理标志物在模型组与知母多糖干预组间差异具有统计学意义(P<0.01).结论 通过交叉检验及置换检验证明,模型可以充分提取组间差异,并具有较好的预测能力.筛选得到的知母多糖红细胞磷脂标志物可为后续的作用机制研究提供参考.     

基于UHPLC-Q-TOF/MS的地榆化学成分分析及大鼠体内代谢研究

目的  采用超高效液相色谱和-四级杆串联飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)法分析地榆水提物在大鼠血清、尿液及粪便中的原型成分及代谢产物, 探讨地榆中活性成分在大鼠体内的代谢途径。方法  采用Thermo AcclaimTM RSLC 120 C₁₈色谱柱(3.0 mm×100 mm, 2.2 μm), 以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱, 流速0.4 mL·min-1, 进样量3 μL, 柱温40 ℃。运用电喷雾离子源(ESI), 扫描范围m/z 50~1 500, 正、负离子模式采集数据。通过比较灌胃地榆水提物后大鼠血清、尿液和粪便样品和空白组样品的差异, 对原型成分及其代谢产物进行鉴定。结果  灌胃给予地榆水提物后, 从大鼠血清、尿液及粪便中鉴定出69个外源性成分, 包括24个原型成分和45个代谢产物。其中24个原型成分包括16个酚类成分、7个三萜类成分及1个单萜烯醇苷。地榆水提物在大鼠体内的代谢途径主要包括还原、甲基化、脱水、氧化、硫酸化及葡萄糖醛酸结合等。结论  所鉴定出的原型成分和代谢产物可为进一步解析地榆体内代谢过程, 阐明其药效物质基础提供实验依据。      

中毒动物生物检材中乌头类生物碱的LC/MS/MS分析

目的:建立乌头中毒致死的动物检材中乌头类生物碱的LC/MS/MS分析方法。方法:将生物检材用氨水调pH值为8~9,用氯仿/乙醚(1:4)萃取生物检材样品,采用电喷雾离子源,正离子模式检测。结果:在中毒致死的动物检材中发现了乌头碱、中乌头碱和次乌头碱。结论:LC/MS/MS法灵敏可靠,样品处理快速简便,适用于生物检材中乌头类生物碱的检测。