黄连对2型糖尿病大鼠胰腺内质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通路的影响

目的:观察黄连对2型糖尿病大鼠的炎症因子、血糖、内质网应激信号通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/活化转录因子4(ATF4)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)相关蛋白的干预作用。方法:将80只雄性SPF级大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸二甲双胍组、黄连组,每组20只。采用"10周高糖高脂饲料喂养+经腹腔注入低剂量链脲佐菌素(STZ)"方案对非正常组大鼠造模。盐酸二甲双胍组予盐酸二甲双胍0. 2 g·kg~(-1)·d~(-1),黄连组按照剂量为0. 4 g·kg~(-1)·d~(-1)给药,模型组、正常组大鼠均给予同等体积的蒸馏水,每天1次。待灌胃期终止,取血,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠的空腹血糖(FBG),C反应蛋白(CRP),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用免疫组化法检测各组大鼠胰腺组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78),CHOP,ATF4蛋白的表达;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠胰腺组织PERK,磷酸化(p)-PERK蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG,TNF-α,CRP水平及ATF4,CHOP,GRP78,p-PERK蛋白表达均明显升高(P 0. 05);与模型组比较,黄连组和盐酸二甲双胍组FBG,TNF-α,CRP水平,ATF4,CHOP,GRP78,p-PERK蛋白表达均明显下降(P 0. 05)。结论:黄连能在一定程度上降低大鼠血糖,缓解炎性反应,可抑制质网应激PERK/ATF4/CHOP信号通道,减少CHOP,ATF4,GRP78,p-PERK的表达。     

丹参酮ⅡA减轻棕榈酸诱导的心肌细胞凋亡及内质网应激

【目的】 探讨丹参酮ⅡA对棕榈酸诱导心肌细胞脂毒性损伤模型内质网应激凋亡的影响。【方法】 将对数期H9c2细胞分6组,即对照组,棕榈酸（400 μmol/L）组,丹参酮 ⅡA 20 μmol/L组和棕榈酸+丹参酮 ⅡA（5、10、20 μmol/L）组,另外引入棕榈酸+CCT020312组与棕榈酸+CCT020312+丹参酮ⅡA 20 μmol/L组考察通路激活状态。细胞计数试剂盒8（CCK-8）法测定H9c2细胞活力;流式细胞术测定细胞凋亡情况;实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测细胞内质网应激相关分子葡萄糖调控蛋白78（GRP78）、转录激活因子4（ATF4）和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测细胞 GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-3、Caspase-9、Caspase-12、蛋白激酶 RNA 样内质网激酶（PERK）、磷酸化PERK（p-PERK）、真核生物翻译起始因子2α（eIF2α）、磷酸化eIF2α（p-eIF2α）的蛋白表达水平。【结果】与对照组比较,棕榈酸组细胞存活率显著降低（P < 0.01）,GRP78、ATF4、CHOP mRNA 和蛋白表达水平均显著升高（P <0.01）,H9c2 细胞的凋亡率升高,p-PERK/PERK 和 p-eIF2α/eIF2α 比例也显著增大（P < 0.01）,凋亡相关分子 Caspase-3、Caspase-9和Caspase-12蛋白表达水平均显著升高（P < 0.01）。不同浓度丹参酮 ⅡA作用后,与棕榈酸组比较,棕榈酸+丹参酮 ⅡA（5、10、20 μmol/L）组细胞存活率显著升高（P < 0.01）,GRP78、ATF4、CHOP mRNA 和蛋白表达水平均显著降低（P < 0.01）,H9c2细胞的凋亡率降低,p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α比例也显著减小（P < 0.01）,Caspase-3、Caspase-9和Caspase-12蛋白表达水平显著降低（P < 0.01）,均具有剂量依赖性,且棕榈酸+丹参酮 ⅡA 10 μmol/L组（P < 0.05）和棕榈酸+丹参酮 ⅡA 20 μmol/L 组（P < 0.05）变化显著。加入 PERK 通路激活剂 CCT020312 作用后,与棕榈酸组比较,棕榈酸+CCT020312组的p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α比例,细胞凋亡率,GRP78、ATF4、CHOP 的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P < 0.05）;再经过丹参酮ⅡA处理,与棕榈酸+CCT020312组比较,棕榈酸+CCT020312+丹参酮ⅡA组的p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α比例,细胞凋亡率,GRP78、ATF4、CHOP 的mRNA和蛋白表达水平均显著回降（P < 0.05）。【结论】 丹参酮ⅡA可减轻心肌细胞脂毒性损伤,其机制与其通过抑制PERK信号通路活化来减轻棕榈酸诱导的心肌H9c2细胞凋亡,并且控制内质网应激反应有关。     

地黄提取物对阿霉素诱导心衰大鼠的影响

目的:探讨地黄抗心衰作用最佳有效部位及其作用机制。方法:首先采用体外阿霉素(DOX)诱导的心肌细胞损伤模型,筛选出地黄对心肌细胞保护作用的最佳有效部位;其次采用小剂量多次腹腔注射阿霉素(DOX)诱导大鼠慢性心衰(CHF)。将最佳有效部位连续给药4周后,采用超声心动图检测大鼠左心室舒张末内径(LVEDD)和收缩末内径(LVESD)并计算左室短轴缩短率(LVFS)及射血分数(LVEF),检测大鼠血浆中BNP、c Tn I、AngⅡ、ALD和TNF-α,采用western blot检测大鼠心脏中BNP的表达。结果:地黄提取物能给药4周后,能显著改善DOX损伤心肌细胞的存活率,乙酸乙酯部位效果最佳。动物实验中模型组LVEF、LVFS、BNP、c Tn I、AngⅡ、TNF-α和心肌组织形态均有显著改变;治疗后与模型组比较,地黄乙酸乙酯各剂量组LVEF、LVFS、c Tn I、AngⅡ、ALD、TNF-α显著改善(P0.05,P0.01),各治疗组心肌组织病理形态不同程度好转,尤以乙酸乙酯高剂量组效果最佳。结论:地黄提取物均可提高DOX损伤心肌细胞的存活率,以乙酸乙酯部位效果最佳;乙酸乙酯高、中剂量组能明显改善CHF大鼠的心肌病理形态及血浆LVEF、LVFS、BNP、c Tn I、AngⅡ、TNF-α疾病指标。     

连草泻痢胶囊对溃疡性结肠炎大鼠内质网应激及炎症反应的影响

目的 观察连草泻痢胶囊对溃疡性结肠炎（UC）大鼠内质网应激及炎症反应的影响，探讨其治疗UC的机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、连草泻痢胶囊组和美沙拉嗪组，每组10只。除空白组外，其余各组采用葡聚糖硫酸钠溶液自由饮用法构建UC大鼠模型，连草泻痢胶囊组和美沙拉嗪组同时予相应药物干预，连续7 d。测量大鼠结肠长度，对大鼠进行疾病活动指数（DAI）评分，HE染色观察结肠组织病理形态，ELISA检测血清白细胞介素（IL）-1β、IL-17、γ干扰素（IFN-γ）含量，Western blot检测结肠组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP、Bax、Bcl-2、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、核因子（NF）-κB p65、p-NF-κB p65、NF-κB抑制因子（IκB） α、p-IкBα、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、p-PERK、eIF2α、p-eIF2α、转录激活因子（ATF）4、肌醇需求激酶（IRE）1α、p-IRE1α、xBP1s和Cleaved ATF6蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠结肠长度缩短，DAI评分和结肠组织炎症评分升高，血...     

稳心颗粒调控内质网应激途径抑制心梗大鼠心肌凋亡的机制

目的 探讨稳心颗粒对心梗大鼠内质网应激凋亡通路的影响及分子机制。方法 结扎左冠状动脉前降支建立心梗大鼠模型,术后随机分为假手术组,模型组,稳心颗粒低剂量组、高剂量组及倍他乐克组,每组10只,假手术组与模型组给予10 mL?kg^-1?d^-1去离子水灌胃,稳心颗粒低剂量及高剂量组分别给予1.35,2.7 g?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,倍他乐克组给予2.25 mg?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,治疗2周后,采用导管法检测心脏血流动力学,之后处死大鼠取材,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理形态的变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）,蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）,磷酸化激活的PERK（p-PERK）,活化转录因子6（ATF6）,细胞核转录因子X盒结合蛋白（XBP1）和凋亡蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。结果 与假手术组比较,模型组的左室内压最大上升速率（+dp/dt_max）,下降速率（-dp/dt_max）,左室收缩压（LVSP）明显降低（P<0.05）,左室终末舒张压（LVEDP）明显上升（P<0.05）,内质网应激蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6及XBP1表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）,凋亡蛋白CHOP和Bax表达显著增高（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著降低（P<0.01）,凋亡指数显著增加（P<0.01）;与模型组比较,稳心颗粒低剂量组-dp/dt_max及Bcl-2蛋白表达明显增加（P<0.05）,心肌细胞凋亡指数显著降低（P<0.01）;稳心颗粒高剂量组+dp/dt_max与-dp/dt_max明显增加（P<0.05,P<0.01）,内质网应激通路蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6,XBP1及凋亡相关蛋白CHOP,Bax表达均显著降低（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著增加（P<0.01）,凋亡指数显著降低（P<0.01）。结论 稳心颗粒可抑制过度的内质网应激,减少心肌细胞凋亡,进而改善心梗大鼠心脏血流动力学,其分子机制与下调GRP78,PERK,p-PERK,ATF6,XBP1表达,减少CHOP,Bax表达,增加Bcl-2表达有关。     

艾灸联合贝那普利对慢性心力衰竭大鼠心肌内质网应激相关蛋白磷酸化表达的影响

目的：观察艾灸“心俞”“肺俞”联合贝那普利对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能及心肌组织中蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、真核启动因子2α(eIF2α)蛋白磷酸化的影响,探讨艾灸联合贝那普利防治CHF的潜在机制。方法：采用腹腔注射盐酸多柔比星复制CHF大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、艾灸组、药物组、艾药组,并设立空白组,每组10只。艾灸组予以艾条温和灸双侧“心俞”“肺俞”,每次20 min;药物组予以贝那普利（0.86 mg/kg）灌胃治疗;艾药组艾灸上述穴位同时予以贝那普利灌胃治疗。各组均每日治疗1次,连续干预3周。超声心动图检测大鼠心脏射血分数（EF）、左室内径缩短率（FS）;HE染色法观察心肌组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清B型脑钠肽（BNP）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量;Western blot法检测大鼠心肌组织磷酸化（p）-PERK、p-eIF2α的表达水平。结果：与空白组比较,模型组大鼠EF、FS降低（P<0.01）;血清BNP和AngⅡ含量升高（P<0.01）;p-PERK、p-eIF2α蛋白表达水平升高（P<0.01）;镜下可见...     

茵黄合剂对17-α乙炔雌二醇诱导肝内胆汁淤积模型大鼠内质网应激标志性蛋白表达的影响＊

目的 观察茵黄合剂对雌激素诱导胆汁淤积大鼠肝脏组织内质网应激标志性蛋白CHOP、GRP78和PERK表达的影响，基于内质网应激信号通路，探讨茵黄合剂治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的机制。方法 运用17-α乙炔雌二醇诱导形成肝内胆汁淤积症大鼠模型后，分别用高（259.2 g/kg/天）、中（129.6 g/kg/天）和低（64.8 g/kg/天）剂量的茵黄合剂干预7天，取血，检测血清总胆汁酸（total bile acid，TBA）、总胆红素（total bilirubin）等生化指标；取部分肝脏组织，分别在光学显微镜和透射电镜下观察大鼠肝脏形态和超微结构的改变；另取肝脏组织，置于液氮中保存，分别采用实时定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测大鼠肝脏组织内质网应激标志性蛋白：C/EBP同源蛋白（C/EBP-homologous， CHOP）、葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein， GRP78）和蛋白激酶R样ER激酶（protein kinase R-like ER kinase， PERK）mRNA与蛋白表达情况。结果 不同剂量的茵黄合剂干预均可显著降低胆汁淤积模型鼠肝脏组织内质网应激标志性蛋白CHOP、GRP78和PERK mRNA和蛋白表达，降低血清总胆汁酸和总胆红素水平，减轻肝脏组织形态和超微结构损伤，与模型组比较，差异具有统计学意义。结论 茵黄合剂可能通过减少雌激素诱导肝内胆汁淤积模型鼠肝脏CHOP、GRP78和PERK的表达，缓解内质网应激，从而降低血清总胆汁酸和总胆红素水平，发挥治疗肝内胆汁淤积的作用。     

养阴通脑颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠海马内质网应激的影响

目的探讨养阴通脑颗粒减轻脑缺血再灌注损伤的可能作用机制。方法将162只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、养阴通脑颗粒组,每组54只。模型组和养阴通脑颗粒组通过大脑中动脉局灶性栓塞手术建立脑缺血再灌注损伤模型。养阴通脑颗粒组造模成功后每12 h给予养阴通脑颗粒0.5 g/kg灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水。于造模后12、24、48、72 h观察大鼠神经功能缺损评分、大脑海马葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)蛋白及mRNA表达及真核生物翻译起始因子2α(e IF2α)、内质网源性转录因子(chop)、转录激活因子4(ATF4)mRNA表达;并于造模后72 h检测脑梗死体积及脑组织海马区病理变化。结果与假手术比较,模型组大鼠各时间点神经功能缺损评分,GRP78、PERK蛋白及mRNA表达,e IF2α、chop、ATF4 mRNA表达均明显升高,脑梗死体积明显增大(P0.01);与模型组比较,养阴通脑颗粒组各时间点神经功能缺损评分,PERK蛋白及PERK、e IF2α、chop、ATF4 mRNA表达明显降低,GRP78蛋白和mRNA表达均显著升高,脑梗死体积明显缩小(P0.05或P0.01)。结论养阴通脑颗粒可能通过调节海马内质网相关因子表达,抑制内质网应激,从而减轻脑缺血再灌注损伤。     

滋补脾阴方药对脾阴虚糖尿病大鼠海马内质网应激影响的研究

目的:探讨滋补脾阴方药(ZiBu PiYin Recipe,ZBPYR)对脾阴虚糖尿病大鼠海马内质网应激相关分子表达的影响。方法:高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)注射建立2型糖尿病模型,在此基础上,通过复合因素造模的方法建立脾阴虚糖尿病模型,以水迷宫实验评价模型大鼠是否出现学习记忆障碍,之后观察各组大鼠海马内质网应激相关分子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)和真核转录因子2的α亚单位(eukaryotic translation initiation factor 2 subunitα,eIF2α)表达的变化。结果:ZBPYR治疗后GRP78 mRNA水平降低(P0.05),GRP78、磷酸化PERK、磷酸化eif2α蛋白水平明显降低(P0.05),与脾阴虚糖尿病组相比,差异有统计学意义。结论:滋补脾阴方药可能是通过影响内质网应激PERK信号传导改善脾阴虚糖尿病大鼠学习记忆障碍。     

黄芪甲苷对被动型Heymann肾炎大鼠PERK通路的影响

目的:观察黄芪甲苷对被动型Heymann肾炎大鼠PERK通路的影响。方法:用羊抗大鼠Fx1A抗体血清尾静脉注射制备被动型Heymann肾炎大鼠模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组和贝那普利组。造模成功后各治疗组灌胃给药4周。定期检测24 h尿蛋白定量。4周后处死所有大鼠,采血检测血清白蛋白,PASM染色观察肾组织病理学改变,免疫组化检测肾组织磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化真核细胞翻译起始因子2α(p-e IF2α)的表达,Western blot检测肾组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达。结果:模型组大鼠24 h尿蛋白定量较正常对照组显著升高(P0.05),并随着时间推移蛋白尿逐渐增多,至4周后达到高峰。在给药4周后,与正常对照组比较,模型组大鼠肾组织p-PERK、p-e IF2α、GRP78表达明显升高,血清白蛋白明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,黄芪甲苷高剂量组及贝那普利组大鼠24 h尿蛋白显著减少,肾组织p-PERK、p-e IF2α、GRP78表达显著减少,血清白蛋白显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:黄芪甲苷可能通过抑制内质网应激(ERS)中的PERK通路缓解被动型Heymann肾炎大鼠肾脏损伤。     

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP 信号通路探讨银杏内酯B 治疗代谢性脂肪性肝病的作用

目的：通过动物实验验证银杏内酯B (GB)治疗代谢性脂肪性肝病（MAFLD）的作用是否与调控PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路,抑制内质网应激,减少肝细胞凋亡及炎症反应相关。方法：72只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,辛伐他汀组,GB低、中、高剂量（GB-L、GB-M、GB-H）组（n=12）,高脂高糖饲料喂养12周构建MAFLD模型（正常组除外）。治疗8周后,收集血清和肝组织。生化试剂盒检测血脂和肝脂[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]及肝功能[天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）];酶联免疫吸附法（ELISA）法检测血清和肝脏中的炎性因子[白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1 (IL-1)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)]水平;HE染色、油红O染色观察肝组织病理学;Western blot法检测肝脏组织中GRP78、PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果：肝脏组织病理学显示,与正常组相比,模型组大鼠肝脏脂肪变性显著,与模型组...     

抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠内质网应激CHOP通路的影响

目的:探究抗纤益心方对扩张型心肌病(Dilated cardiomyopathy, DCM)大鼠内质网应激C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法:采用呋喃唑酮水溶液制备DCM模型大鼠,将大鼠分为模型组、抗纤益心方20、40、80mg生药/kg、卡维地洛10mg/kg组,另设正常对照组,超声检测心室功能变化;右颈总动脉插管检测血流动力学变化;对比全心脏以及左心室心重指数(HW/BW、LVM/BW);HE染色观察大鼠心肌组织病理形态学变化;Tunel染色观察心肌细胞凋亡情况;免疫印迹法检测大鼠心肌组织中钙网蛋白(CRT)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激酶R样内质网激酶(PERK)、转录激活因子4(ATF4)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、cleaved-caspase3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组心肌组织病理半定量评分、LVEDD、LVESD升高,LVEF、SV、FS降低,LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmix降低,HW/BM、LVW/BM升高;心肌细胞大量坏死,间质水肿、纤维化,伴有炎性细胞浸润;心肌细胞凋亡率显著升高;CRT、GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP、Bax、cleaved-caspase3蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低。与模型组相比,抗纤益心方各组、卡维地洛组心肌组织病理半定量评分、LVEDD、LVESD显著降低,LVEF、SV、FS显著升高,+dp/dtmax、-dp/dtmix显著升高,LVEDP显著降低,HW/BM显著降低;心肌细胞坏死、纤维化程度减少,间质水肿、炎性细胞浸润均得到改善,心肌细胞凋亡率显著降低,GRP78、p-PERK、ATF4、CHOP、Bax、cleaved-caspase3蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,抗纤益心方40、80mg/kg组、卡维地洛组LVDP显著升高,LVW/BM、CRT蛋白表达显著降低。结论:抗纤益心方能够改善DCM大鼠心室功能,缓解内质网应激引发的心肌细胞凋亡,其机制可能与下调CHOP通路相关。     

加味人参四逆汤对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的保护机制研究

【目的】 探讨加味人参四逆汤对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能的保护作用。【方法】 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培哚普利组、中药组。除假手术组,其他3组大鼠采用冠状动脉左前降支结扎方法建立急性心肌梗死后心力衰竭模型,假手术组完成穿刺但未结扎冠状动脉左前降支。成功造模后,培哚普利组、中药组大鼠分别对应给予培哚普利片混悬液、加味人参四逆汤灌胃,假手术组、模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,共14 d。给药结束后,记录大鼠心脏频率（HR）、左心室内压最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室内压最大下降速率（-dp/dtmax）、左心室内压（LVSP）、左心室舒张末期压（LVEDP）、左心室射血分数（LVEF）的变化;酶联免疫吸附分析检测血清中脑利钠肽（BNP）、肌钙蛋白T（cTnT）、血管紧张素Ⅰ（AngⅠ）、醛固酮（ALD）、心房钠尿肽（ANP）和心肌组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1（IL-1）水平;苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织变化和纤维化情况。【结果】 与假手术组比较,模型组大鼠HR、+dp/dtmax、LVSP、LVEF和心肌组织SOD水平明显降低（P < 0.05）,-dp/dtmax、LVEDP,血清BNP、cTnT、AngⅠ、ALD、ANP水平和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1水平明显升高（P < 0.05）,心肌结构排列紊乱,出现炎性浸润和心肌纤维化;与模型组比较,中药组大鼠HR、+dp/dtmax、LVSP、LVEF和心肌组织SOD水平明显升高（P < 0.05）,-dp/dtmax、LVEDP,血清BNP、cTnT、AngⅠ、ALD、ANP水平和心肌组织MDA、TNF-α、IL-1水平明显降低（P < 0.05）,心肌结构排列紊乱、炎性浸润和心肌纤维化明显减轻。【结论】 加味人参四逆汤可以改善急性心肌梗死后心力衰竭大鼠的心功能,改善血流动力学,抑制神经体液因子分泌,减轻心肌氧化应激、炎性浸润和纤维化。     

抗纤益心方通过调控SERCA2a蛋白抑制扩张型心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的:观察抗纤益心方对扩张型心肌病(DCM)大鼠内质网钙ATP酶2a(SERCA2a)的影响,探讨其抑制心肌细胞凋亡的机制。方法:80只Wistar雄性大鼠随机选取8只作为正常对照组,剩余大鼠通过呋喃唑酮水溶液制备DCM模型大鼠,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组及抗纤益心方1. 8、3. 6 g/kg组,卡托普利10. 1 mg/kg组。相应药物或生理盐水连续灌胃8 w后,检测大鼠超声心动图指标,HE染色观察心肌组织病理学改变,Westen blot检测各组大鼠心肌组织中SERCA2a、转录因子C/EBP(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸蛋白酶8(Caspase8)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase3)蛋白表达水平,荧光探针法检测心肌内质网Ca~(2+)浓度。结果:与正常对照组相比较,模型对照组大鼠LVESD、LVEDD明显升高,FS、LVEF明显降低,心肌组织病理损伤明显,内质网钙离子浓度降低、SERCA2a蛋白表达明显下调,CHOP、GRP78、Caspase8、Caspase3蛋白表达明显上调(P <0. 05);与模型对照组相比,抗纤益心方1. 8、3. 6 g/kg组,卡托普利10. 1 mg/kg组大鼠LVESD、LVEDD明显降低,FS、LVEF明显升高,心肌组织损伤程度明显减轻,内质网钙离子浓度升高、SERCA2a蛋白表达明显上调,CHOP、GRP78、Caspase8、Caspase3蛋白表达明显下调(P <0. 05)。结论:抗纤益心方可通过调控SERCA2a蛋白表达,以维持细胞内钙离子稳态,从而改善内质网应激引起的细胞凋亡。     

基于代谢组学研究益心泰颗粒剂对慢性心力衰竭大鼠粪便代谢产物的影响

目的 基于代谢组学研究益心泰颗粒剂对慢性心力衰竭大鼠粪便代谢产物的影响。方法 将SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、造模组。除正常组外,造模组采用冠状动脉结扎和力竭游泳的方法建立慢性心力衰竭模型,模型建立成功后,随机分为模型组、益心泰组、曲美他嗪组,益心泰组和曲美他嗪组。分别给药治疗4周,治疗结束后,观察各组大鼠一般情况,彩超检测大鼠心功能、血清BNP、心脏病理改变、大鼠粪便代谢组学改变。结果 CHF模型大鼠LVIDs升高(P<0.01),LVEF、LVFS显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠血清BNP显著升高(P<0.01),经益心泰颗粒剂治疗后,大鼠LVIDs显著降低(P<0.01),LVPWd升高(P<0.01),LVPWs、LVEF、LVFS显著升高(P<0.01),大鼠血清BNP显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠粪便乙酰肉碱、左旋肉碱、肉桂醛、3-酮鞘氨醇、胆固醇硫酸盐、13-OxoODE、2-氨基-3-甲氧基苯甲酸、月桂酸等代谢物的水平降低,5-氧代庚酸酯、5a-Pregnane-3,20-dione、...     

鬼针草乙酸乙酯提取物对内质网应激所致肝细胞损伤的保护作用研究

该研究旨在探讨鬼针草乙酸乙酯提取物对内质网应激所致的肝细胞损伤的保护作用及机制。衣霉素诱导L02细胞建立内质网应激损伤模型;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测鬼针草乙酸乙酯提取物对内质网应激所致L02细胞损伤的存活率;Western blot法检测内质网应激信号通路蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核生物翻译起始因子2α(eIF2α)、转录因子激活蛋白4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)、Bcl-2结合抗凋亡基因(Bax)的表达水平,同时检测加入内质网应激抑制剂(4-苯基丁酸)和shRNA沉默CHOP因子后上述表达情况;免疫荧光法检测L02细胞中GRP78、PERK、CHOP的表达水平。结果显示,鬼针草乙酸乙酯提取物显著提高内质网应激所致L02细胞损伤的存活率(P0.05或P0.01),并在一定范围内呈时间剂量依赖性。给药组的GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、Bax表达水平显著降低(P0.05或P0.01),Bcl-2表达水平显著升高(P0.01);加入内质网应激抑制剂和shRNA沉默CHOP因子后,GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、Bax表达水平显著降低(P0.01),Bcl-2表达水平显著升高(P0.01)。免疫荧光结果显示GRP78、PERK、CHOP表达情况与Western blot法检测结果一致。综上,鬼针草乙酸乙酯提取物对内质网应激所致的L02细胞损伤具有显著保护作用,其机制可能与抑制内质网应激,下调PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路所介导的细胞凋亡有关。     

益心泰对慢性心力衰竭大鼠线粒体分裂蛋白Fis1、Mff的影响

目的 研究益心泰对慢性心力衰竭大鼠线粒体分裂蛋白的干预作用及其机制。方法 60只SD大鼠随机抽取10只作为假手术组，剩余50只采用结扎左冠状动脉前降支法制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、益心泰低、中、高剂量组（1.4、2.8、5.6 g·kg^-1）、曲美他嗪组（10 mg·kg^-1），各给药组予相应剂量药物灌胃，模型组和假手术组给予等体积的生理盐水灌胃，连续给药28 d。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清氨基末端B型利钠肽（NT-pro BNP）、B型利钠肽（BNP）、腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量；彩色多普勒超声成像仪检测心功能指标；苏木素-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色法观察心脏病理形态学改变，使用Image J软件计算胶原容积分数（CVF）；透射电镜观察心肌细胞超微结构变化；原位末端标记法（TUNEL）染色检测心肌组织细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织线粒体外膜线粒体分裂蛋白1（Fis1）、线粒体分裂因子（Mff）表达。结果 与假手术组比较，模型组血清NT-pro BNP、BNP含量显著升高（P<0.01），ATP含量显著降低（P<0.01），左心室射血分数（LVEF）及左心室短轴缩短率（LVFS）下降（P<0.01），左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）升高（P<0.01），心肌细胞排列紊乱、炎性细胞浸润、胶原纤维增多、CVF上升（P<0.01），心肌及线粒体出现损伤，心肌细胞凋亡指数升高（P<0.01），心肌组织线粒体分裂蛋白Fis1、Mff表达上调（P<0.01）；与模型组比较，益心泰低、中、高剂量组及曲美他嗪组血清NT-pro BNP、BNP含量降低（P<0.05），ATP含量升高（P<0.05），益心泰低、中、高剂量组及曲美他嗪组LVEF、LVFS升高（P<0.01），LVIDd、LVIDs均降低（P<0.01），各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌炎症损伤减轻、纤维化得到改善，CVF降低（P<0.01），各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌线粒体结构得到改善，各剂量益心泰治疗组及曲美他嗪组心肌细胞凋亡指数下降（P<0.01）；益心泰中、高剂量组及曲美他嗪组心肌组织Fis1、Mff蛋白表达下调（P<0.05）。结论 益心泰可改善线粒体结构、减轻心肌细胞凋亡、提升心功能，其作用机制可能与抑制心肌组织线粒体分裂蛋白Fis1、Mff表达有关。     

基于miR-584调控内质网应激途径安胃汤干预胃黏膜肠上皮化生作用机制研究

目的 探讨安胃汤基于miR-584调控内质网应激途径干预胃黏膜肠上皮化生细胞的作用机制。方法 运用鹅去氧胆酸诱导人胃黏膜GES-1细胞系构建胃黏膜肠上皮化生细胞模型;实验动物分为正常组、模型组、阴性对照组、安胃汤组,在此研究基础上设置miR 584 inhibitor组、miR 584 inhibitor NC组、miR 584 mimics组、miR 584 mimics NC组,分别进行瞬时转染后给予安胃汤含药血清干预。采用激光扫描共聚焦显微镜观察ER-Tracker Red变化,蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关蛋白Caspase 12、GRP78、ATF6、PERK、CHOP表达情况和肠上皮化生相关蛋白CDX2、MUC2、KLF4、SOX2的表达。结果 安胃汤作用于胃黏膜肠上皮化生细胞,下调CDX2、MUC2、KLF4蛋白表达(P<0.01),上调SOX2表达(P<0.01),显著增强内质网相对荧光强度(P<0.01),显著上调肠上皮化生细胞中内质网应激相关蛋白Caspase 12、GRP78、ATF6、PERK、CHOP的表达(P<0.01);转染后给药...     

补肾助孕方对黄体功能不全模型大鼠卵巢内质网应激的调节

目的 探讨补肾助孕方对米非司酮诱导的黄体功能不全（LPD）模型大鼠卵巢内质网应激（ERS）的调控机制。方法 使用随机数表法将50只SD大鼠分为空白组，模型组，地屈孕酮（0.02 g·kg^-1）组，补肾助孕方低（0.08 g·kg^-1）、高剂量（0.24 g·kg^-1）组。使用蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组大鼠卵巢免疫球蛋白重链结合蛋白（BIP），蛋白激酶R样内质网激酶（PERK），肌醇必需酶-1（IRE-1），活性转录因子6（ATF6），C/EBP同源蛋白（CHOP）蛋白和mRNA表达水平，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组大鼠血清孕酮（P）和雌二醇（E₂）水平。结果 与空白组比较，模型组BIP，PERK，CHOP蛋白表达显著升高（P<0.01），PERK及CHOP mRNA表达明显下降（P<0.05）；而IRE-1，ATF6蛋白表达，IRE-1，BIP，ATF6 mRNA表达，血清E₂，P水平差异无统计学意义。与模型组比较，地屈孕酮组CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），而PERK，IRE-1，BIP，ATF6蛋白表达，PERK，IRE-1，BIP，ATF6，CHOP mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义；补肾助孕方低剂量组CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），CHOP mRNA表达水平明显升高（P<0.05），而PERK，IRE-1，BIP，ATF6蛋白和mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义；补肾助孕方高剂量组PERK，BIP，CHOP蛋白表达显著降低（P<0.01），CHOP mRNA表达水平显著升高（P<0.01），而IRE-1和ATF6蛋白表达，PERK，IRE1，BIP，ATF6 mRNA表达及血清E₂，P水平差异无统计学意义。结论 补肾助孕方可以改善黄体功能不全，其机制可能与缓解内质网应激作用有关。     

水苏碱对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织蛋白激酶R样内质网激酶表达的影响

目的 探讨水苏碱对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）表达的影响。方法 建立单侧输尿管梗阻诱导大鼠肾间质纤维化的动物模型;将大鼠随机分为假手术组,模型组,依那普利组,水苏碱高、中、低剂量组;于术后第14天处死大鼠收集血清测定血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;采用HE染色观察肾脏的病理改变及评定肾小管损伤指数;Masson染色观察肾间质胶原沉积的面积,判断肾间质纤维化程度;采用免疫组织化学方法检测肾组织中PERK、激活转录因子4（ATF4）、C/EBP 同源蛋白（CHOP）的表达。结果 各治疗组与模型组比较,BUN、Scr均明显降低,肾小管损伤程度明显减轻,肾间质胶原相对面积和PERK、ATF4、CHOP的表达显著降低（P<0.05、0.01）。与依那普利组比较,水苏碱高剂量组的抗肾间质纤维化作用更为显著（P<0.05）。结论 水苏碱能够抑制PERK信号通路介导ATF4蛋白表达水平升高及ATF4激活CHOP的蛋白表达,阻止细胞凋亡,从而减缓了肾间质纤维化的发生和发展。