HPLC法测定参苓健体粉中去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ

目的建立梯度洗脱联合波长切换高效液相色谱(HPLC)法对参苓健体粉中去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ同时进行测定。方法采用Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长:210 nm(0~19 min,检测去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸)、220 nm(19~35 min,检测白术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样量为10μL。结果去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸、白术内酯III、白术内酯I质量浓度分别在4.62~92.40μg/m L(r=0.999 7)、3.80~76.00μg/m L(r=0.999 9)、5.76~115.20μg/m L(r=0.999 9)、3.95~79.00μg/m L(r=0.999 8)、5.05~101.00μg/m L(r=0.999 6)与峰面积关系良好;回收率分别为99.24%、97.75%、98.66%、98.49%、99.10%,RSD值分别为1.23%、1.79%、1.66%、0.80%、1.25%。结论建立的方法操作简便、结果可靠,可用于参苓健体粉的质量控制。     

UPLC-MS/MS法测定茯苓、茯苓皮和茯神中茯苓新酸B、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸

目的 建立超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）法同时测定茯苓、茯苓皮和茯神中茯苓新酸B、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸。方法 采用Shim-pack GIST C₁₈ AQ色谱柱（100 mm×2.1 mm,3 μm）,以乙腈–0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,柱温40 ℃,进样量5 μL。质谱采用离子源：ESI,负离子模式采集,采集模式：多反应监测（MRM）,离子源温度150 ℃,毛细管电压2.5 kV,锥孔电压40 V,去溶剂气流量900 L/h,去溶剂气温度500 ℃。结果 茯苓新酸B、去氢土莫酸、猪苓酸C、去氢茯苓酸和茯苓酸在各自的线性范围内线性关系良好,平均回收率分别为97.80%、99.65%、97.32%、102.82%、99.57%,RSD值分别为3.46%、1.29%、3.01%、3.11%、1.89%。茯苓皮中5种三萜类成分含量均高于茯苓和茯神。结论 本法具有分析速度快、准确度高的优点,可为茯苓、茯苓皮和茯神的质量标准提高和开发利用提供依据。     

HPLC法测定八珍液中地黄苷A、地黄苷D、去氢土莫酸和茯苓酸

目的建立HPLC同时测定八珍液中的地黄苷A、地黄苷D、去氢土莫酸和茯苓酸的方法。方法 Kromasil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长:203 nm(0~34 min,检测地黄苷A和地黄苷D)、210 nm(34~65 min,检测去氢土莫酸和茯苓酸);体积流量1.0 m L/min。结果地黄苷A、地黄苷D、去氢土莫酸和茯苓酸分别在5.76~115.20、4.05~81.00、6.10~122.00、6.35~127.00μg/m L线性关系良好;平均回收率分别为98.90%、99.08%、98.71%、97.95%,RSD值分别为1.49%、1.19%、1.63%、0.92%。结论该方法操作简便,准确,重复性好,可作为八珍液的质量控制方法。     

HPLC法测定茯苓中去氢土莫酸的含量

目的:建立测定茯苓中三萜类化合物去氢土莫酸含量的 HPLC 法。方法:采用 YMC ODS-A 柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%三氟醋酸梯度洗脱:0～20min,75%～85%甲醇,20～25min,85%～100%甲醇;流速为1.0mL·min~(-1);检测波长为243nm;柱温:室温。结果:去氢土莫酸进样量在2.5～20μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),回收率为100.7%,RSD 为0.61%(n=5)。结论:此法准确,重复性好,可为评价不同产地的茯苓药材质量提供依据。     

HPLC法测定八味肾气丸中去氢土莫酸、茯苓酸、梓醇和桃叶珊瑚苷

目的建立同时测定八味肾气丸中去氢土莫酸、茯苓酸、梓醇、桃叶珊瑚苷4个成分的高效液相色谱测定方法.方法采用Hypersil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈–0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长:0~18 min, 241 nm(去氢土莫酸);18~50 min,210 nm(茯苓酸、梓醇和桃叶珊瑚苷);体积流量为1.0 mL/min;柱温25℃;进样量20 μL.结果去氢土莫酸、茯苓酸、梓醇和桃叶珊瑚苷分别在3.35~67.00μg/mL、3.50~70.00μg/mL、3.07~61.40μg/mL、3.25~65.00μg/mL线性良好,r值均大于0.999 0,平均回收率分别为96.72%、97.87%、98.21%、98.09%,RSD值分别为1.08%、0.95%、0.64%、1.22%(n=6).结论 该方法简便,结果准确,可用于八味肾气丸中去氢土莫酸、茯苓酸、梓醇、桃叶珊瑚苷的质量控制.     

HPLC法同时测定茯苓中去氢茯苓酸和茯苓酸的含量

目的建立同时测定茯苓药材中去氢茯苓酸和茯苓酸含量的反相高效液相色谱法。方法采用HPLC法。色谱柱为Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm,4μm),流动相为乙腈-质量分数为0.1%的磷酸溶液(体积比为75∶25),流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为210 nm。结果在上述色谱条件下去氢茯苓酸和茯苓酸能达到基线分离;去氢茯苓酸和茯苓酸分别在20.4～408.0 mg.L-1和14.4～288.0 mg.L-1内与色谱峰面积之间线性关系良好;二者的平均加样回收率分别为99.4%和100.0%,RSD(n=9)分别为2.2%和1.7%。结论HPLC法可作为茯苓质量控制的一个有效方法。     

波长转换RP-HPLC法同时测定茯苓不同部位中5种三萜酸含量

建立同时测定茯苓不同部位中去氢土莫酸、猪苓酸C、3-表去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸含量的方法。采用紫外-波长转换检测的RP-HPLC法: 色谱柱为Kromasil C₁₈柱 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm); 流动相为乙腈 (A)-0.05%磷酸水溶液 (B) 系统, 梯度洗脱 (0～5 min, 60%A～64%A; 5～35 min, 64%A～65%A; 35～35.01 min, 65% A～73% A; 35.01～53 min, 73% A); 流速为1.0 mL·min⁻¹; 检测波长为0～48 min, 241 nm (去氢土莫酸、猪苓酸C、3-表去氢土莫酸、去氢茯苓酸), 48～55 min, 210 nm (茯苓酸)。去氢土莫酸、猪苓酸C、3-表去氢土莫酸、去氢茯苓酸和茯苓酸分别在30.5～610.0 μg·mL⁻¹ (r = 0.999 6)、12.66～253.2 μg·mL⁻¹ (r = 0.999 5)、2.99～59.7 μg·mL⁻¹ (r = 0.999 7)、6.13～122.5 μg·mL⁻¹ (r = 0.999 5)、11.3～226.0 μg·mL⁻¹ (r = 0.999 5) 内浓度与峰面积呈良好的线性关系; 方法回收率分别为98.5% (RSD = 1.9%)、99.4% (RSD = 1.7%)、97.9% (RSD = 1.2%)、96.7% (RSD = 2.5%) 和97.9% (RSD = 2.3%)。结果表明, 本方法简便、准确、重现性好, 为茯苓药材的质量控制提供了依据。     

RP-HPLC法测定中药茯苓皮中茯苓酸A和3-表去氢土莫酸的含量

目的：建立一种可用于评价茯苓皮药材质量的含量测定方法。方法：采用Dikma Dimonsal C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,以0.1％甲酸水溶液和乙腈为流动相,流速：1.0mL·min^-1,检测波长：243nm,柱温：25℃,用梯度洗脱法同时测定茯苓皮药材中茯苓酸A和3-表去氢土莫酸的含量。结果：测得茯苓酸A和3.表去氢土莫酸的线性范围分别为0.073-0.292g·L^-1（r=0.9997）和0.027—0.135g·L^-1（r=0.9999）;加样回收率分别为102.63％和98.88％。结论：该法能快速、准确地测定茯苓皮中两个活性成分的含量,为茯苓皮的质量控制提供了一个较好的检测方法。     

大鼠口服茯苓素后血浆中的去氢土莫酸药代动力学研究

目的:建立测定大鼠血浆中去氢土奠酸浓度的高效液相色谱方法,并以去氢土莫酸为指标,研究大鼠灌胃给予茯苓素混合提取物后的药代动力学行为。方法:采用HPLC方法测定大鼠灌胃给予茯苓素混合提取物后,血浆中去氢土莫酸的浓度。色谱柱为ODS枉(200mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇乙腈-2％冰醋酸水溶液(13:12:10),流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为242nm,进样量20μL,室温下操作,内标物为丙酸睾丸素。结果:在0.20～20.0μg·mL~(-1)范围内具有良好线性关系(r=0.9981),方法回收率为85.2％～93.6％,日内、日间RSD均小于6.0％,达峰时间约为2h,峰浓度为(10.4±1.4)μg·mL~(-1),药时曲线下面积为32.6μg·mL~(-1)·h~(-1)。结论:此方法稳定、可靠,适用于茯苓素的药代动力学研究。     

茯苓中去氢土莫酸含量测定

目的：建立茯苓中去氢土莫酸HPLC含量测定方法。方法：色谱柱为Shim—packC18（150mm×6．0mm，10μm），流动相：乙腈-四氢呋喃-5％醋酸（65：3：32），流速：1．0ml·min^-1，检测波长：242nm。结果：去氢土莫酸在0～0．8μg范围内线性关系良好（r=0．9998），平均回收率98．6％，RSD2．3％。结论：该方法分离效果好、准确、重复性好，可用于茯苓的质量控制。     

RP-HPLC法测定熊去氧胆酸胶囊中熊去氧胆酸及有关物质的含量

目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定熊去氧胆酸胶囊中熊去氧胆酸、胆酸、鹅去氧胆酸及胆石酸的含量。方法使用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03 mol·L-1磷酸溶液(体积比为40∶60),流速为1.4 mL·min-1,检测波长为205 nm,柱温为35℃。结果熊去氧胆酸胶囊中熊去氧胆酸、胆酸、鹅去氧胆酸及胆石酸在25 min内洗脱并基线分离。熊去氧胆酸、胆酸、鹅去氧胆酸及胆石酸的线性范围分别为0.80²00.00、0.45200.00、0.45¹10.00、0.30110.00、0.30⁷0.00和0.3070.00和0.30⁸0.00 mg·L-1,平均回收率分别为99.7%、99.3%、98.7%和99.1%,RSD分别为1.30%、1.47%、1.87%和1.95%(n=3)。结论 RP-HPLC可用于同时测定熊去氧胆酸胶囊中熊去氧胆酸、胆酸、鹅去氧胆酸及胆石酸的含量,可应用于熊去氧胆酸胶囊胶囊制剂的质量控制。     

一测多评法测定藏茴香中异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C

目的 建立一测多评法（QAMS）测定藏茴香中6种咖啡酰奎宁酸类成分含量,并验证该方法在藏茴香质量评价中应用的可行性与适用性。方法 取藏茴香粉末（过三号筛）0.5 g,精密加入70%甲醇 20 mL ,超声处理（250 W、频率 53 kHz）30 min,制备供试品溶液;采用Phenomenex GeminiR C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为 330 nm,体积流量 1.0 mL·min^-1,柱温 30 ℃,进行专属性、供试品提取条件、检测波长选择、色谱条件、线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率方法学考察,建立异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸 B、异绿原酸 C成分含量检测的 HPLC法;以异绿原酸 A为内参成分,分别计算新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C 5种成分的相对校正因子,分别采用3种不同色谱仪和3种色谱柱进行相对校正因子、相对保留时间耐用性考察,对藏茴香样品同时采用外标法与 QAMS 测定 6 种成分的质量分数,比较 2 种测定方法结果的差异。结果 建立的6种成分的HPLC检测方法的专属性、供试品提取条件、检测波长选择、色谱条件、线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合要求;新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的相对校正因子平均值分别是 1.362、1.257、1.335、1.470、1.134,3种不同色谱仪和 3种色谱柱对相对校正因子、相对保留时间均无明显影响;QAMS与外标法2种方法测定3批藏茴香样品中6种成分得到的结果之间无显著差异。结论 建立的QAMS简便、准确、可靠,可用于藏茴香中6种咖啡酰奎宁酸类成分——异绿原酸A、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的定量分析。     

绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸与溶菌酶相互作用的荧光光谱法研究

用荧光光谱法研究了绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸与溶菌酶之间的相互作用。绿原酸（cA）、新绿原酸（NcA）、隐绿原酸（CCA）均能显著焊灭溶菌酶的内源荧光并以静态焯灭为主;随着温度的升高其结合常数和结合位点均呈现降低的趋势。根据热力学参数判断确定CA与LYSO之间以疏水作用力为主,NCA与LYSO之间以氢键和范德华力为主,CCA与LYSO之间以静电作用力为主。     

咖啡酸、阿魏酸和香草酸对酪氨酸酶活性的影响

目的 :研究咖啡酸、阿魏酸和香草酸对酪氨酸酶活性的影响 ,寻找酪氨酸酶抑制剂 ,从而为治疗色素增加性皮肤病筛选药物。方法 :酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定药物干预前后酪氨酸酶活性 ,求出酪氨酸酶抑制率。采用Lineweaver Burk双倒数法制得酶动力学曲线 ,推断抑制类型。结果 :3种试药中仅香草酸对酪氨酸酶具有抑制作用 ,与氢醌比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,咖啡酸、阿魏酸对酪氨酸酶具有上调激活作用。结论 :香草酸为良好的混合型酪氨酸酶抑制剂。     

甘露醇-旋光法测定鞣柳硼三酸散中硼酸的含量

目的建立旋光法测定鞣柳硼三酸散中硼酸的含量。方法以低浓度明胶溶液提取制剂中硼酸,利用甘露醇结合硼酸形成具有旋光性复合物,并建立鞣柳硼三酸散中硼酸的含量测定方法。结果硼酸浓度在5～20 g.L-1的浓度范围内与旋光度线性关系良好(r=0.999 2),方法的平均回收率为99.98%,RSD为1.3%。结论旋光法测定鞣柳硼三酸散中硼酸的含量,操作简便、快速,结果准确,重现性好。     

RP-HPLC法测定余甘子中诃黎勒酸、没食子酸、粘酸-2-O-没食子酸酯的含量

目的:建立RP-HPLC法同时测定余甘子(Phyllanthus emblica L.干燥成熟果实)中诃黎勒酸、没食子酸、粘酸-2-O-没食子酸酯含量。方法:采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.2%醋酸水溶液(19:81,v/v)为流动相;检测波长为275 nm;流速为1 mL.min-1;柱温为30℃。结果:诃黎勒酸、没食子酸、粘酸-2-O-没食子酸酯线性范围分别为0.235～1.176μg、0.185～0.924μg、0.418～2.09μg;平均回收率(n=6)分别为101.5%,99.20%,101.5%。结论:建立的方法简便,重现性好,可用于余甘子中诃黎勒酸、没食子酸、粘酸-2-O-没食子酸酯的含量测定。     

Oral antipyretic therapy: Evaluation of the N-aryl-anthranilic acid derivatives mefenamic acid,tolfenamic acid and flufenamic acid

Summary The antipyretic activity of three N-aryl-anthranilic acid derivatives, mefenamic acid, tolfenamic acid and flufenamic acid, was compared and their optimal antipyretic dose determined in a trial in 87 children (aged 5 months to 15 years), who suffered from infections and fever exceeding 38.5°C. Tolfenamic acid proved to be the most potent antipyretic agent of the three drugs; it was eight times more powerful than mefenamic acid and three times more powerful than flufenamic acid. The optimal antipyretic doses were: mefenamic acid 4 mg/kg, tolfenamic acid 0.5 mg/kg and flufenamic acid 1.5 mg/kg. It is evident that the antipyretic activity of these anthranilic acid derivatives is even greater than their antirheumatic effect, the difference being most noticeable in the case of tolfenamic acid.     

HPLC-CAD法测定小柴胡片中琥珀酸、盐酸麻黄碱、黄芩苷、汉黄芩苷、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、甘草酸、甘草次酸和棕榈酸

目的 建立高效液相色谱联合电喷雾检测器（HPLC-CAD）测定小柴胡片中琥珀酸、盐酸麻黄碱、黄芩苷、汉黄芩苷、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、甘草酸、甘草次酸、棕榈酸的分析方法。方法 采用GL Science Inertsil ODS-3色谱柱（250mm×4.6mm,3μm）;流动相：5mmol/L甲酸铵（甲酸调pH值至4.2）–乙腈,梯度洗脱;柱温：35 ℃;进样量：20μL;体积流量：0.7mL/min;CAD雾化器温度为35 ℃,气压为61.0psi,采集频率为10Hz。结果 琥珀酸、盐酸麻黄碱、黄芩苷、汉黄芩苷、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、甘草酸、甘草次酸、棕榈酸的线性范围分别为0.94～18.74、1.23～24.66、8.90～178.06、3.51～70.20、1.52～30.36、1.25～25.02、3.48～69.54、2.50～50.04、1.23～24.56μg/mL;平均回收率分别为97.05%、97.82%、97.85%、96.46%、98.53%、97.58%、97.05%、97.65%、97.03%,RSD值分别为1.46%、2.16%、0.83%、1.00%、1.74%、1.49%、0.75%、1.68%、1.46%。结论 本法简便、准确,为小柴胡片的质量标准提升研究提供有效的技术手段。     

高效液相色谱法测定鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量

目的:探讨用反相高效液相色谱法测定鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量。方法:采用Symetry Shield RP18(5μm 4.6mm×250mm)Columm色谱柱;以0.05mol/L磷酸二氢钠缓冲液(pH2.6)-乙腈(50∶50)为流动相;检测波长233nm。结果:水杨酸在20.4～61.2μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.0%。结论:本法简便、准确、快速,适用于鞣柳硼三酸散中水杨酸的含量测定。     

一测多评法测定丹酚酸A原料药中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和丹酚酸C

目的建立一测多评法测定丹酚酸A原料药中特定杂质迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和丹酚酸C。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.2%磷酸–乙腈,梯度洗脱,检测波长286 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,样品室温度4℃,进样量20μL。以丹酚酸A为内标,建立丹酚酸A原料药中特定杂质(紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸C)的相对校正因子;分别采用一测多评法和外标法测定丹酚酸A原料药中特定杂质,并比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异性。结果丹酚酸A、丹酚酸B、丹酚酸C、迷迭香酸、紫草酸均在0.2~20μg/mL与峰面积呈良好线性关系。在线性浓度范围内,迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸C与丹酚酸A间的相对校正因子分别为1.52、2.09、2.33、1.06。一测多评法计算值与外标法实测值无显著性差异。结论一测多评法可用于丹酚酸A原料中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸C的测定。