RP-HPLC法同时检测新麦纤散中5种有效成分含量

[目的]建立同时检测新麦纤散中5种成分:三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷和茯苓酸含量的方法。[方法]采用反相高效液相色谱(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)梯度洗脱法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸的含量。色谱条件:phenomenex-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈和0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃,检测波长为203nm。[结果]三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸分别在0.65~16.25μg·mL~(-1)(r~2=0.9996),0.42~10.50μg·mL~(-1)(r~2=0.9997),0.08~2.00μg·mL~(-1)(r~2=0.9998),0.37~9.25μg·mL~(-1)(r~2=0.9986),0.16~4.00μg·mL~(-1)(r~2=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.53%、99.02%、98.55%、95.43%、97.66%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为1.27%、0.54%、0.53%、1.48%、0.81%。[结论]RP-HPLC梯度洗脱法操作简便,结果准确,精密度高,重现性好,能同时测定新麦纤散中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Coelonin、薯蓣皂苷、茯苓酸的含量,可为完善新麦纤散的质量控制方法提供科学的依据。     

加速溶剂萃取-HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分

目的引入加速溶剂萃取(accelerated solvent extraction, ASE)技术,并结合HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分的含量。方法加速溶剂萃取仪在120℃、1.17 MPa (1 700 psi)压力下,用70%的乙醇静态萃取样品6 min;6种重楼皂苷的含量用HPLC-TOF/MS同时测定,色谱柱: MGC18柱(3.0 mm×100 mm,3.0 μm);流动相: 乙腈与0.1%(V/V)甲酸水,梯度洗脱;流速: 0.8 ml/min;柱温: 25℃;进样量: 3 μl;离子源: ESI正离子模式;雾化气压力: 275.85 kPa(40 psi);干燥气流速: 10 L/min;干燥气温度: 350℃。结果重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷的线性范围(μg/ml)分别为: 0.500 0~50.00(r=0.999 8)、0.422 3~42.23(r=0.999 7)、0.612 0~61.20(r=0.999 9)、0.714 0~71.40(r=0.999 5)、0.448 0~44.80(r=0.999 9)和0.436 0~43.60(r=0.999 7);各成分的平均回收率(n=6)分别为98.9%、98.0%、102.5%、101.9%、103.1%和97.9%。结论该法溶剂消耗少、耗时短、便于自动化,可实现高通量分析,可用于重楼中皂苷类成分的含量测定。     

黄山药化学成分的研究（Ⅱ）

黄山药 Dioscorea panthaica Prain et Burkill为我国特有的薯蓣科薯蓣属植物 ,主要分布于云南、贵州、四川、湖南等地区 ,根茎含薯蓣皂苷元 1 .7%～2 .3% ,生药能祛风除湿 ,清热解毒[1] 。为了进一步探讨黄山药根茎的化学成分 ,我们对其根茎的化学成分进行了研究 ,从中分离鉴定了 4个化合物 :薯蓣皂苷元 ( diosgenin, ) ,延令草次苷 ( trillin, ) ,2 6- O-β- D-葡萄吡喃糖基 ( 2 5 R) -呋喃 - 5 ,2 0 ( 2 2 ) -二烯 - 3β,2 6-二羟基 - 3- O- [α- L-鼠李吡喃糖基 ( 1 - 2 ) ]- β- D-葡萄吡喃糖苷 ( ) ,原薯蓣皂苷 ( protodioscin, …     

HPLC法测定延龄草中薯蓣皂苷元的含量

目的 :采用高效液相色谱法测定延龄草中薯蓣皂苷元的含量.方法 选用Agilent HC-C18 (4.6×250mm;5μm)色谱柱,以甲醇-水(95:5)为流动相,检测波长209nm,流速1mL/min,柱温25℃.结果 :薯蓣皂苷元和其他成分分离良好,线性范围为0.848-8.48μg/mL,r=0.9975,仪器精密度RSD为0.38%,方法重复性RSD为2.6%,平均回收率为96.7%,RSD为1.95%.结论 本方法简便、准确、重现性好,可用于延龄草中薯蓣皂苷元的质量控制.     

薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢的影响

目的:建立测定心肌组织样品中腺苷酸含量的RP-HPLC法,并观察薯蓣皂苷(D)对缺血再灌注大鼠心肌能量代谢的改善作用.方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,以薯蓣皂苷进行干预,大鼠随机分为4组:空白对照组(C组),心肌缺血再灌组(IR组),薯蓣皂苷高剂量组(DH组),薯蓣皂苷低剂量组(DL组).采用反相高效液相色谱法,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1磷酸二氢钾-磷酸氢二钾(10:1)缓冲液(pH=6.0),流速为1.0 ml·min-1,柱温为35℃,检测波长254 nm,测定心肌组织ATP、ADP、AMP含量、腺苷酸池(TAN)水平.结果:ATP、ADP、AMP在浓度2.5～320 μg·ml-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为ATP 97.5%、ADP 105%、AMP 99.5%;批内RSD分别为0.9%、1.0%、0.8%,批间RSD分别为3.1%、3.3%、3.2%.结论:该方法可简便、快速、准确地测定大鼠心肌腺苷酸含量;薯蓣皂苷对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢有明显改善作用.     

胡芦巴提取物化学成分含量测定及体外抗氧化研究

目的建立高效液相法测定胡芦巴提取物含量的方法,研究不同胡芦巴提取物对DPPH及羟基自由基(.OH)的清除效果。方法采用药典方法测定新疆、安徽产胡芦巴、胡芦巴醇提物及胡芦巴总皂苷(TFGs)中的胡芦巴碱;薯蓣皂苷元的含量测定,色谱柱为大连伊力特Hypersil ODS-1(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-水(86∶14,v/v),流速1.0mL/min,检测波长203nm,柱温35℃;紫外法测定体外抗氧化作用。结果薯蓣皂苷元的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围为43.2～864μg/mL(r=0.999 5);平均回收率(n=9)为100.3%。胡芦巴碱含量:胡芦巴(新疆)0.66%、胡芦巴(安徽)0.62%,胡芦巴醇提物1.78%、胡芦巴大孔树脂提取物(TFGs)0.47%;薯蓣皂苷元含量:胡芦巴(新疆)0.78%、胡芦巴(安徽)0.85%,胡芦巴醇提物4.94%、胡芦巴大孔树脂提取物(TFGs)7.58%;胡芦巴各提取物对DPPH的清除IC50值:TFGs为1.2mg/mL、胡芦巴醇提物为0.6mg/mL、胡芦巴碱提取物为5.0mg/mL;胡芦巴各提取物对羟自由基的清除IC50值:TFGs为6.5mg/mL、胡芦巴醇提物为3.3mg/mL、胡芦巴碱提取物为12.5mg/mL。结论采用HPLC法测定胡芦巴提取物中薯蓣皂苷元的含量,方法准确可靠、重现性好,可用于含量测定;胡芦巴各提取物具有清除DPPH和羟基自由基的作用。     

RP-HPLC法测定金槐冠心片中薯蓣皂苷元的含量

目的建立RP-HPLC法测定金槐冠心片中薯蓣皂苷元含量的方法。方法采用RP-HPLC法,Shim-packCLC-ODS柱(150mm×6.0mm,5μm),以甲醇-乙腈(3∶2)为流动相,在206nm波长下测定样品水解后的薯蓣皂苷元含量。结果该方法专属性强;平均空白回收率为95.6%,RSD为2.44%,平均加样回收率为98.7%,RSD为2.66%(n=6)。结论该方法简便,分离效果好,可用于金槐冠心片中薯蓣皂苷元的质量控制。     

金刚藤分散片中薯蓣皂苷元HPLC法测定研究

目的建立金刚藤分散片中薯蓣皂苷元的测定方法。方法采用HPLC测定薯蓣皂苷元的含量,色谱柱为ODS-C18(4.6mm×250mm,5μm)不锈钢柱(Merck公司),以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相为乙腈-水(90∶10),流速为1ml/min;柱温为35℃;检测波长为203nm。结果薯蓣皂苷元在40～360μg/ml浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9996,n=5),平均回收率为100.00%,RSD%=1.08(n=6)。结论 HPLC法简单、准确、重复性好,可用于金刚藤分散片的含量测定。     

高效液相色谱法测定土茯苓中薯蓣皂苷元的含量

目的:采用高效液相色谱法测定土茯苓中薯蓣皂苷元的含量.方法:色谱柱为Diamonisil(TM钻石)C18柱(150mm×4.6mm,5um);以乙腈-水(90:10)为流动相;检测波长203nm;柱温35℃;流速:1.0mL·min-1.结果:薯蓣皂苷元进样量在0.4896ug～2.448ug范围内线性关系良好(r=0.9995);加样回收率为97.1%,RSD为1.23%.结论:方法操作简便,分离效果良好.     

薯蓣皂苷元对U-2OS细胞MMP-9/TIMP-1 mRNA的影响

为探讨薯蓣皂苷元抗肿瘤作用,采用四氮唑盐还原法(MTT法)观察薯蓣皂苷元对人骨肉瘸U-2OS 细胞体外生长的作用,运用RT-PCR方法探讨人骨肉瘤U-2OS细胞在薯蓣皂苷元作用后,其基质金属蛋白酶- 9(MMP-9)和基质金属酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA所发生的变化,结果薯蓣皂苷元对U-2OS细胞的生长具有明显的抑制作用,IC50(24h)为45 μmol／L:薯蓣皂苷元抑制U-2OS细胞MMP-9基因转录,而TIMP-1基因转录不受影响。说明薯蓣皂苷元明显抑制U-2OS细胞生长,抑制其MMP-9基因转录,对骨肉瘤侵袭和转移有一定抑制作用。