工人尿中三硝基甲苯及五种代谢物的质谱鉴定和高效液相色谱测定

为阐明TNT对肝脏损伤的机理,搞清尿中代谢物的种类,结构及含量有着十分重要的意义。将工人尿样加酸水解使代谢物游离,用苯提取液做色谱/质谱分析。鉴定出两个-氨基二硝基甲苯(4-A,2-A);两个二氨基-硝基甲苯(2,4-DA,2,6-DA)。又用化学电离源质谱/质谱法鉴定出易分解的羟氨基二硝基甲苯(4-HA)。用高效液相色谱法测定了某化工厂9名工人尿样。其含量顺序为4-A,4-HA,2-A,2,4-DA,2,6-DA。大多数尿样未检出TNT原形。4-A浓度最大值7.7mg/L,仍低于ILO规定的生物阈限值。     

无火焰原子吸收光谱法测定尿中铅

尿样用4％磷酸二氢铵—6％抗坏血酸溶液稀释一倍后即可直接进样测定。使用涂钼石墨管能进一步降低背景吸收,故本方法能在各类原子吸收仪器上应用。方法的线性范围为0～150μg/L,检出限为1μg/L,回收率在92～105.3％之间,批间精密度为2.3～5.3％,批内精密度为2.7～3.7％。本方法可以用于生物监测,铅中毒诊断和治疗中测定尿铅。     

高效液相色谱法测定工人尿中三硝基甲苯及五种代谢物(二)——分析方法的建立及应用

本文建立了高效液相色谱(HPLC)测定工人尿中TNT及五种代谢物的方法。TNT、4-A、2-A、2,6-DA和2,4-DA的平均回收率66.6～95.0％,变异系数在2.1～10.6％之间,最小检测限为3.0～8.1μg/L尿。本方法已用于35个接触TNT工人尿样的分析。     

基体改进剂石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿铅

研究了利用氯化钯作为基体改进剂的石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿铅浓度。尿样用氯化钯溶液(钯浓度500 mg/L)稀释一倍后即可直接进样测定。方法的线性范围为0～120μg/L,检出限为2.0μg/L,回收率在97％～104％之间,批间精密度为6.6％～7.3％,批内精密度为3.6％～6.2％。本方法可以用于铅的生物监测,铅中毒诊断和治疗中的尿铅分析。     

乙酸乙酯提取比色法测定尿中δ—氨基乙酰丙酸（δ—ALA）

本方法取尿样0.5ml时,检测下限为0.30mg/L,标准曲线线性范围0～5μg/0.5ml尿样。变异系数1.5％～3.6％,铅接触者尿样加标回收率89.0％～95.7％。尿样在4℃可保存至少2周。本方法用于铅中毒诊断。     

人尿8-羟基脱氧鸟嘌呤的HPLC电化学测定方法

目的：建立高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）测定人尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OHdG）的检测方法。方法：采用Bond Elute C18小柱固相萃取尿液，ODS C18分析柱，8％甲醇醋酸缓冲液为流动相，电化学检测器检测，电极电压750mV。结果：本方法线性范围25～400μg/L，r=0．9892，回收率为91．2％～108．8％，批内和批间精密度分别为3．9％～7．5％和4．3％～8．6％，检测限为2μg/L。结论：本方法操作简便、准确度较好，已应用于正己烷接触者现场尿样的测定。     

催化分光光度法测定痕量硒

本文采用正交设计法选择了 Se~(4 )—Fe(EDTA)—NO_3~-催化系统的优化条件,建立了催化分光光度法测定痕量硒的方法。该法线性范围宽(0.03～0.70μg/32ml),选择性好,并有良好的精密度和准确度,检测限达3×10~(-10)g/ml,水样加标回收率为99.8～105.8%,变异系数为4.4～3.4%;尿样加标回收率为86.1～92.1%,变异系数为1.3～2.7%,适用于水质和尿样分析。     

高效液相色谱法测定工人尿中三硝基甲苯及五种代谢物(二)分析方法的建立及应用

本文建立了高效液相色谱(HPLC)测定工人尿中TNT及五种代谢物的方法.TNT、4-A、2-A、2,6-DA和2,4-DA的平均回收率66.6～95.0%,变异系数在2.1～10.6%之间,最小检测限为3.0～8.1μg/L尿.本方法已用于35个接触TNT工人尿样的分析.     

b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA检测方法的建立

目的 建立竞争酶联免疫吸附分析法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA),测定b型流感嗜血杆菌多糖(PRP)浓度方法以b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺(Ty)为包被抗原,待测多糖为竞争抗原,与优化的抗b型流感嗜血杆菌多糖抗体反应,建立标准曲线,并验证该方法的准确性和精密度.结果 优化后的b型流感嗜血杆菌多糖-酪胺包被浓度为1∶400倍稀释,抗多糖血清稀释度为1∶40K.检测线性范围6.25μg/ml～100μg/ml,最低检测限为3.13μg/ml,回归方程为B/B0=-34.328[PRP]+105.03,线性相关系数为R2 =0.995.批内精密度为3.4％～6.5％,批间精密度为8.48％,测定培养基中b型流感嗜血杆菌多糖的回收率为95.7％.结论 本研究建立的b型流感嗜血杆菌多糖竞争ELISA方法准确性和精密性均较好,可以特异性地检测b型流感嗜血杆菌多糖浓度.     

离子色谱法测定尿中硫氰酸根的方法探究

目的 采用离子色谱检测技术，建立丙烯腈职业接触人群尿中硫氰酸根的检测方法。方法 尿样用去离子水稀释后离心；经固相萃取（ODS-C18）净化，由lonPac AS16(250 mm×4 mm)柱分离，淋洗液浓度为35 mmol/L；等度洗脱；抑制电流87 mA；进样体积25μl，电导检测器检测，外标法定量。结果 该方法线性范围在0.31～100.00μg/ml，相关系数r≥0.999，方法检出限为0.09μg/ml（以取1.00 ml尿样计算），方法定量限为0.31μg/ml（以取1.00 ml尿样计算）。加标回收率在98.40%～102.00%之间，批内精密度为0.37%～3.36%，批间精密度为0.70%～3.14%。结论 该方法可靠、稳定、操作简单，分析时间短、成本较低，对环境友好，适用于对丙烯氰职业接触人群尿中硫氰酸根的检测。     

用硝酸镁-氢氧化钠共沉淀法进行尿锰检测方法的研究

目的：探讨生物尿样中锰检测方法。方法：采用硝酸镁-氢氧化钠共沉淀富集和火焰原子吸收分光光度计对尿样中锰进行测定。结果：100ml尿样富集至25ml后，可以获得较好的灵敏度；硝酸镁作为富集剂可以克服氯化镁的不足；0～30μg/L锰浓度呈线性关系，r值达0．999以上；方法的精密度RSD为1．4％～5．0％，加标回收率为79．3％～101．3％。结论：此方法可用于生物尿样中锰的测定，方法简便易行，准确度高，易于基层推广应用。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定尿中的三甲基氯化锡和三乙基氯化锡

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用快速测定人尿中三甲基氯化锡和三乙基氯化锡的检测方法。方法尿样用超纯水适当稀释后,采用Ruby@C4反相色谱柱对待测化合物进行分离,以4%乙酸水溶液和甲醇为流动相,2种有机锡化合物在7 min内得到了有效分离;利用电感耦合等离子体质谱检测,工作曲线法定量。结果 2种有机锡化合物分别在8. 60μg/L～451. 0μg/L、6. 35μg/L～472. 5μg/L时线性良好,相关系数 0. 998,以尿样稀释5倍计,方法检出限分别为8. 60μg/L和6. 35μg/L,批内精密度为1. 30%～6. 40%,批间精密度为1. 50%～6. 44%,加标回收率为87. 48%～96. 64%。结论本方法操作简便,分离效果好,具有良好的灵敏度和精密度,适用于人尿中三甲基氯化锡和三乙基氯化锡的快速测定。     

高效液相色谱法测定尿中肌酐的方法改进

目的改进高效液相色谱法测定尿液中肌酐的方法。方法尿样经过离心(转速=10 000 r/min)后,取上清液,用流动相(20 mmol/L乙酸铵,pH=3.20)稀释10倍～500倍后,取10.0μl进样,在流速为1.0 ml/min条件下,经EC-C_(18)反相色谱柱(250 mm×4.6 mm, 4μm,柱温:25℃)分离,采用紫外检测器(VWD)检测(检测波长:236 nm),以保留时间定性,峰面积定量。结果本法尿肌酐在2.0μg/ml～10.0μg/ml浓度内呈线性,相关系数为0.999 6,以3倍噪音值估算方法检出限为0.10μg/ml。在2.0μg/ml～10.0μg/ml内添加低、中、高3个浓度水平,样品加标回收率为99.02%～100.26%;批内精密度为0.55%～2.73%(n=6),批间精密度为1.05%～3.20%(n=6)。结论本法操作简便,环境友好,分析时间短,分离效果好,干扰物质少,灵敏度高,定性定量准确,可以满足尿样中肌酐检测的要求。     

直接测定尿中锰含量的石墨炉原子吸收光谱法

目的 建立一种快速有效的尿中锰含量的石墨炉原子吸收光谱测定方法.方法 用基体改进剂0.1％ PdC12/0.5％TritonX-100/1％ HNO3对尿样稀释后直接采用塞曼-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中锰含量.结果 该法尿中锰含量在0～10 μg/L范围内线性良好,r=0.999 4,最低检出量为0.014μg/L,两个不同锰浓度的尿样的精密度为4.23％和3.95％,不同浓度样品加标回收率在97.5％～ 106.0％之间.结论 该法是快速、简便、灵敏、准确可靠的尿中锰含量检测方法.     

电感耦合等离子体质谱法测定兔尿样、血浆及组织器官中的总铂

采用电感耦合等离子体质谱法测定兔尿样、血浆和组织器官中的总铂(Pt),兔血浆和尿样适当稀释后直接测定,脏器类样品湿法消解后测定。在0.02～50.00μg/L范围内方法线性良好,相关系数为1.00;尿样精密度良好,批内相对标准偏差2.17%～3.77%,批间相对标准偏差3.54%～4.35%,加标回收率100.90%～103.65%;血浆样品批内相对标准偏差1.57%～2.27%,批间相对标准偏差2.47%～2.64%,加标回收率100.14%～102.30%;组织样品批内相对标准偏差3.47%～4.45%,批间相对标准偏差3.55%～5.61%,加标回收率96.55%～97.60%;兔尿、血浆和脏器样品的方法定量限分别为0.18μg/L、0.20μg/L、0.03μg/g。本方法检出限低,灵敏度高,精密度好,适用于测定血浆、尿样及动物脏器中总铂含量,可为铂类抗癌药物药理、毒理学研究提供技术支持。     

两种方法检测脑脊液蛋白质含量的比较

目的 分析传统的硫酸钠-磺基水杨酸比浊法(A法)和干化学法(B法)测定脑脊液蛋白质的各自特点,寻求一种快速、准确、适用于临床的检测方法.方法 对两种方法的线性、精密度予以评价.按照美国国家实验室标准委员会( NCCLS) EP9-A文件,以A法为比较方法,B法为实验方法进行对比,计算线性方程和相关系数,进行偏差估计.结果 线性范围:A法为0.10 ～2.5g/L,B法为0.16 ～3.1g/L.批内CV:A法分别为1.64％,1.38％,B法分别为1.72％,1.52％;两种方法相关性好(r =0.992),线性回归方程为Y=0.937X -0.048.在进行新鲜脑脊液标本蛋白测定时,A法和B法测定结果的预期相对偏倚在蛋白浓度=1g/L时为11.1％,蛋白浓度=2g/L时为8.70％,蛋白浓度=3g/L时为7.90％.结论 两法的精密度都较高,相关性良好.A法灵敏度高,但操作较繁琐;B法简便、快速、标本用量少,更适于急诊脑脊液蛋白检测.     

高效液相色谱法测定尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸

尿样经溶剂提取、C18反相柱分离后,在225nm波长对苯乙醛酸(PGA)和苯乙醇酸(MA)进行检测。PGA的标准曲线线性范围0.04-0.4mg／ml,检出限(3倍噪声)5．7ng,回收率为95．9％-102.0％,批内精密度(RSD)为4．5％-7．1％,批间精密度为4．6％-8．9％。MA的标准曲线线性范围0．1-1．0mg／ml,检出限(3倍噪声)8．6ng,回收率为86.8％-95．5％,批内精密度为3．1％-5．3％。批间精密度为5．5％-9．5％。该方法被应用于测定苯乙烯接触者尿中PGA和MA,具有快速、准确、简便、灵敏度高的特点。     

气相色谱联用质谱法同时检测人体尿液中草甘膦及氨甲基膦酸含量

目的建立一种同时检测人尿样中草甘膦(PMG)和氨甲基膦酸(AMPA)含量的气相色谱联用质谱(GC/MS)分析方法。方法采用GC/MS法,EI检测器,色谱柱为DB-5MS毛细管色谱柱。进样前尿样经三氟乙酸酐(TFAA)和七氟丁醇(HFB)衍生化后用氮气吹干,0.2%柠檬醛乙酸乙酯溶液溶解混匀后供GC/MS分析。结果 PMG和AMPA在10~400 ng/ml范围内呈线性关系,最低检测限分别为4.66 ng/ml和1.77 ng/ml,最小检测浓度(LOQ)分别为15.52 ng/ml、5.91 ng/ml,回收率分别为85.2%~97.5%、89.2%~99.1%,精密度均小于10%。结论本实验可同时检测尿液中草甘膦及其代谢产物氨甲基膦酸,且最低检测限较单个检测方法灵敏。     

原子荧光光谱法测定尿硒的标准方法研制

采用超纯硝酸和高氯酸将尿样消解后,以原子荧光光谱仪进行尿硒测定。结果显示,方法在1.12~50.0μg/L范围内线性良好,相关系数0.999;加标回收率在91.6%~97.6%之间,尿样标准物质测定结果在真值范围内;精密度良好,批内相对标准偏差(RSD)1.6%~2.5%,批间相对标准偏差2.7%~3.6%;以尿样稀释5倍计,方法检出限为0.33μg/L,定量限1.12μg/L。本方法检出限低、灵敏度高、精密度好,适用于测定尿液中硒的含量。     

血尿样中汞的原子荧光测定方法

目的 建立血样、尿样中汞含量测定的原子荧光光谱方法.方法 血液或尿液用高纯度硝酸微波消解,定容后经断续流动进样,原子荧光光谱仪检测.结果 尿样、血样的加标回收率范围分别为100.4%～103.3%和105.5%～111.6%,批内精密度分别为1.46%～1.70%和1.68%～2.39%,批间精密度分别为3.93%～5.78%和1.92%～7.58%;在0～20μg/L范围内具有良好的线性关系,回归方程式y=143.9245x+7.3605,相关系数r=0.9999,检出限和定量下限分别为0.04 g/L和0.07μg/L,最低检出浓度为0.7μg/L(以1.0ml血液或尿液计).样品在4℃冷藏可以保存2周.结论 该方法具有较高的灵敏度、准确度及良好的检测精密度,无干扰,该方法满足生物接触限值的要求,可用于检测正常人和职业人群血液和尿液中的汞含量.