利用PCR-RFLP技术检测患儿脑脊液和血液可识别六种主要疱疹病毒感染的类型

目的:根据聚合酶链反应与限制性内切酶片段长度的多态性(PCR-RFLP),对儿童脑脊液(CSF)和血液中的六种主要人疱疹病毒进行检测和鉴别。方法:本研究在人疱疹病毒DN A聚合酶基因合适保留区内结合两种引物。在进行PCR扩增时,一种引物用于扩增巨细胞病毒(CM V)、EB病毒(EBV)、1型单纯疱疹病毒(H SV-1)和2型单纯疱疹病毒(H SV-2),另一引物用于扩增水痘-带状疱疹病毒(V ZV)和6型人带状疱疹病毒(H H V-6)。再利用限制性内切酶Bam H I和BstUI,顺利完成病毒种属识别。利用此技术,共检测98份脑脊液样品和75份血液样品。同时,对全部血…     

具有抗疱疹病毒作用及抗真菌作用的药物现状与进展

1具有抗疱疹病毒作用的药物现状与进展人类疱疹病毒(HerpesVirus)分为8型,其中单纯疱疹病毒1型(HerpesSimplexVirus-1,HSV-1)、单纯疱疹病毒2型(HerpesSimplexVirus-2,HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(Varicella-ZosterVirus,VZV)、巨细胞病毒(CytomegaloVirus,CMV)、Epstein-Barr病     

常见人疱疹病毒PCR-基因芯片技术快速诊断儿童疱疹性脑炎

疱疹性脑炎是儿童常见的中枢神经系统的感染性疾病,引起疱疹性脑炎常见的疱疹病毒有单纯疱疹病毒1型和2型（HSV-1、HSV-2）、水痘-带状疱疹病毒（VZV）、爱泼斯坦-马尔病毒（EBV）、人巨细胞病毒（CMV）和人类疱疹病毒6型（HHV-6A、HHV-6B）。为探索快速、准确、高效的诊断方法,我们对本院290例临床怀疑病毒性脑炎患儿的脑脊液标本进行疱疹病毒PCR-基因芯片方法的检测,     

长沙地区成年人人类疱疹病毒6 型( H H V-6) 抗体的调查

人类疱疹病毒６型（Ｈｕｍａｎｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ６，ＨＨＶ６）系１９８６年从２名艾滋病和４名淋巴细胞异常增生患者的细胞中分离出来的新型疱疹病毒［１］。它与单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ１）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ２）、水痘带状疱疹病毒（ＶＺＶ）、ＥＢ病毒及巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）５型人类疱疹病毒（ＨＨＶ５）的单克隆抗体或高价免疫血清作交互免疫试验和交互核酸探针试验，证明ＨＨＶ６的免疫学和分子生物学特性与前述５型疱疹病毒完全不同。ＨＨＶ６与疱疹病毒属的其它成员均在人群中广泛传播，对人体…     

聚合酶链反应-微孔板杂交技术检测人乳头瘤病毒

目的　建立HPV诊断及分型技术。方法　用HPV通用型引物和型特异性探针作PCR 微孔板杂交检测法(PCR ELISA)。结果　特异性探针只与HPV阳性标本显色 ,A值为 0 32 7± 0 0 2 9;阴性标本均不显色 ,A值为 0 0 0 3± 0 0 0 1,与性传播性疾病相关的病原微生物 (淋球菌、解脲支原体、沙眼衣原体、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒 )均不显色。该法能检出 3 6个HeLa细胞含HPV 18型 144个拷贝 ,A值 0 2 37～ 0 2 0 6 ;空白对照A值为 0 0 0 5～ 0 0 15。结论　PCR ELISA方法快速、敏感、特异且可用自动化酶标仪多量标本检测 ,适合临床实验使用。     

病毒感染性眼病病原学诊断的研究进展

多种病毒可导致眼部疾病，包括腺病毒、人类疱疹病毒、人类T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）及新发现的严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）等。这类疾病的鉴别诊断较困难，容易被误诊和漏诊，导致严重的组织损伤和视觉损伤。腺病毒、单纯疱疹病毒1型和水痘-带状疱疹病毒相关眼病的诊断中，病原学诊断可作为一种强有力的辅助诊断工具；而在单纯疱疹病毒2型、巨细胞病毒、EB病毒、人类疱疹病毒6型和7型、人类疱疹病毒8型、HTLV-1和SARS-CoV-2相关眼病的诊断中，病原学诊断则发挥着主导作用。病毒培养、免疫组织化学或免疫荧光法及以PCR为代表的病毒基因诊断法是三种主要的病原检测手段，其中PCR技术检测快速、操作便捷、敏感度和特异度高，成为眼科病毒学诊断中最重要的工具。     

扎伊尔型、苏丹型埃博拉病毒TaqMan探针实时定量PCR核酸检测方法的建立

目的建立针对扎伊尔型(ZEBOV)及苏丹型埃博拉病毒(SEBOV)特异、灵敏和快速的Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法。方法选用世界卫生组织(WHO)参比实验室所使用的引物和探针序列,建立针对扎伊尔型及苏丹型埃博拉病毒的NP基因序列保守区的Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法,验证检测方法的灵敏性、特异性和稳定性,并与常规PCR检测方法进行比较。结果所建立的实时定量PCR方法可用于ZEBOV及SEBOV的特异性检测,较传统PCR方法反应快捷、灵敏,分别可达:ZEBOV 34拷贝/反应、SEBOV 24拷贝/反应;具有良好的特异性、稳定性和可重复性。结论建立了ZEBOV及SEBOV Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法,该方法可有望用于埃博拉病毒(EBOV)的实验室、临床及现场核酸检测。     

猫疱疹病毒Ⅰ型PCR检测方法的建立及初步应用

目的建立猫疱疹病毒Ⅰ型（FHV-1）PCR检测方法,应用于临床样品中FHV-1的快速检测。方法根据已发表的FHV-1TK基因序列设计合成引物,并以此建立FHV-1的PCR检测方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。用建立的方法对15份猫临床样品进行检测。结果建立的FHV-1PCR检测方法与单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-1）、犬疱疹病毒（CHV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猫细小病毒（FPV）均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为7lg TCID50/ml,相应的DNA模板浓度为1.46×102拷贝/ml;FHV-1DNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带。应用该方法从15份猫临床样本中检测出10份FHV-1核酸阳性。结论建立的FHV-1PCR检测方法具有特异、敏感及稳定的特点,适合于临床FHV-1的感染检测。     

登革热病毒多重荧光PCR检测及基因分型方法的研究

目的 建立一种登革热病毒双靶基因多重荧光PCR检测方法,用于登革热病毒的实验室诊断和基因分型.方法 选取登革热病毒Ⅰ-Ⅳ型病毒保守区设计型特异性引物探针和通用型引物探针,评估多重荧光PCR检测方法的特异性、重复性和检测限;并对20份阳性样本进行检测.结果 20个登革热阳性核酸标本在通用型检测全部为阳性,特异性型别检测发现登革热病毒Ⅰ型10例、登革热病毒Ⅱ型3例、登革热病毒Ⅲ型3例、登革热病毒Ⅳ型4例;20名正常无症状人群标本提取的核酸和HIV、HCV和HEV通用型和特异性型别检测全部为阴性.梯度检测的变异系数均小于5％.对登革热Ⅰ-Ⅳ型病毒检测最低检测限达103 copies/ml.结论 本研究建立的登革热病毒双靶基因多重荧光PCR检测及分型方法具有特异性好、重复性好、快速易操作等优点,可用于登革热病毒的快速检测和基因分型鉴定.     

单纯疱疹病毒感染

单纯疱疹病毒引起的感染统称为疱疹病毒感染。除Ⅰ型(唇型)单纯疱疹病毒(HSV)和Ⅱ型(外生殖器型)HSV外,疱疹病毒包括巨细胞病毒、水痘样带状疱疹病毒和非洲淋巴瘤(EB)病毒。常见于猴的B型疱疹病毒即一种EB病毒,可传染给人,有时引起致命性感染。此外,马、牛、猪、猫、狗、豚鼠、小鼠和鸡可为一些疱疹病毒的宿主。疱疹病毒感染的临床表现一般罕见,若一     

通用引物检测儿童血和脑脊液的6种疱疹类病毒

目的:通过PCR-RFLP、DNA克隆和测序分析来检测和区分6种疱疹类病毒,探讨其在临床上的应用价值.方法:在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物,一对扩增单纯疱疹病毒1型和2型、爱泼斯坦-马尔病毒、人巨细胞病毒4种病毒,另一对扩增水痘-带状疱疹病毒和人类疱疹病毒6型2种病毒,经DNA PCR扩增,并对扩增产物进行分子克隆、序列分析后,选择BamHⅠ或BstUⅠ酶切扩增产物进行鉴别.最后,对临床38份脑脊液(CSF,临床诊断为病毒性脑炎的病例)和49份血标本(其中27份为确诊病例,22份为临床诊断病例)进行疱疹病毒的检测.结果:38份CSF标本中13份阳性(34.2%),27份确诊病例标本均阳性(100%),22份临床诊断病例标本16份阳性(72.7%).这些阳性标本通过BamHⅠ或BstUⅠ两种酶切后能明确系何种疱疹类病毒.68例正常健康儿童的血和9份非病毒感染的脑脊液标本6种疱疹类病毒DNA均为阴性.结论:聚合酶链反应加限制性内切酶片段长度多态性分析为疱疹类病毒感染的临床诊断提供了一种有效的手段.     

疱疹病毒感染性皮肤病的治疗进展

常见的疱疹病毒感染性皮肤病有带状疱疹、复发性单纯疱疹及生殖器疱疹 ,分别由水痘 -带状疱疹病毒 (ＶＺＶ)、单纯疱疹病毒Ⅰ型及Ⅱ型 (ＨＳＶ -Ⅰ、ＨＳＶ -Ⅱ )引起。此类疾病虽然有自限性 ,但带状疱疹中到重度的疼痛、后遗神经痛 ,单纯疱疹及生殖器疱疹的经常性复发仍困扰着患者。所以 ,治疗的主要目的是尽快缩短病程、减轻症状、减少复发。本文就疱疹病毒感染性皮肤病的药物治疗情况作一综述。1　阿昔洛韦 (ａｃｙｃｌｏｖｉｒ ,ＡＣＶ)到目前为止 ,此药仍然是首选的药物 ,对带状疱疹、复发性单纯疱疹及生殖器疱疹均有肯定疗效 ,对疱疹…     

嗜神经病毒与脑性瘫痪:人群病例对照研究

目的:研究脑性瘫痪与围生期嗜神经病毒感染直接证据之间的相关性。试验设计:基于群体的病例对照研究。机构:Adelaide妇幼医院研究中心。试验对象与主要观察指标:443例白种脑性瘫痪患儿,883例白种对照儿童,搜集其新生儿筛查记录卡,根据聚合酶链反应检测结果,判定其体内是否存在肠道病毒属和疱疹病毒属的病毒核酸。A型疱疹病毒包括单纯疱疹病毒1型和2型(H SV-1和H SV-2)、EB病毒(EBV)、巨细胞病毒(CM V)、人疱疹病毒8型;B型疱疹病毒包括水痘-带状疱疹病毒(VZV)、人疱疹病毒6型和7型(H H V-6和H H V-7)。结果:对照群体的病毒核酸检…     

猫疱疹病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

目的建立猫疱疹病毒I型(FHV-1)实时荧光定量PCR检测方法,应用于实验用猫及临床患猫FHV-1的快速检测。方法根据已发表的FHV-1 TK基因序列设计特异引物和Taq Man探针,使用分子生物学方法制备质粒标准品,建立FHV-1实时荧光定量PCR方法,并对方法的线性、特异性、敏感性、及稳定性等进行测定。用建立的方法对48份猫临床样品进行检测。结果成功建立FHV-1实时荧光定量PCR方法;该方法的线性范围为(1×102~1×109)copies/μL,与单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)、犬疱疹病毒(CHV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猫细小病毒(FPV)均无交叉反应,检测灵敏度可达到10 copies/μL。批内变异系数均小于5%。应用该方法从48份猫临床样本中检测出33份FHV-1核酸阳性。结论建立的FHV-1PCR检测方法具有特异、敏感及稳定的特点,适合于临床FHV-1的快速定量检测。     

膦乙酸治疗60例单疱性角膜炎

膦乙酸(Phosphonoacetic acid,PAA)是一种在试管内具有显著抗单疱病毒作用的非抗代谢性化合物。它不仅能有效地抑制人疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型Ⅲ,而且对整个疱疹病毒科的多种病毒,诸如巨细胞病毒、EB病毒、水痘带状疱疹病毒、Marek's病毒等,均有明显的抑制作用。其他的DNA病毒,如牛痘苗病毒、非洲猪热病毒等亦可被它抑制。PAA在机体内的抗人疱疹病毒作用亦已有许多报道,兔眼疱疹病毒感染的实     

大鼠细小病毒双重PCR检测方法的建立

目的 建立快速检测大鼠细小病毒的PCR方法.方法 根据大鼠细小病毒基因序列的特点,建立鉴别检测大鼠细小病-(RPV)与其他三种大鼠细小病毒(H-1、KRV、RMV)的双重PCR方法.根据RPV核酸序列的性质,在VP2基因筛选了一对用于特异扩增RPV株的引物,在NS1基因设计了一对用于特异性扩增H-1,KRV和RMV的引物.结果 两对引物组成的二重PCR方法可以特异性的扩增RPV而不扩增核酸同源性高的小鼠细小病毒和多种其他病原微生物;敏感性实验表明,二重PCR的最低检测限可达1 000拷贝/μL.双重PCR结合测序在检测23份临床样本中,检测出7份RMV阳性,包括1份与RPV共感染阳性样本.结论 本研究建立的检测RPV的双重PCR方法具有特异性好、灵敏度高及操作简单等优点,是一种简便、可靠的检测方法.     

单纯疱疹病毒性脑炎

编辑部文章:能导致人类神经系统性疾病的疱疹病毒包括单纯疱疹、水痘—带状疱疹、巨细胞病毒和Epstein-Barr(EB)病毒都是DNA病毒。这类病毒含有糖脂外膜;并且在宿主细胞核内复制繁殖.此组病毒可导致原发性感染和使感染潜伏以后再活化的特性。单纯疱疹病毒(HSV)有2种血     

21例新生儿疱疹病毒感染的临床分析

疱疹病毒由一组病毒组成。到目前为止，发现能致病的疱疹病毒有8种，分别为单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)和Ⅱ型(HSV-2)、水痘一带状疱疹病毒(VZV)、爱泼斯坦一巴尔病毒(EBV)、人巨细胞病毒(HCMV)以及后来发现的人疱疹病毒(HHV)6、7、8型。现对自2003年4月人院的确诊为疱疹病毒感染的21例新生儿病例报告如下。     

药物对特发性血小板减少性紫癜的疗效分析

特发性血小板减少性紫癜 (ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉｃｐｕｒ ｐｕｒＩＴＰ)又称自身免疫性血小板减少性紫癜 ,是儿科最常见的出血性疾病。此病的主要特点是 :皮肤、粘膜自发性出血 ,血小板减少 ,骨髓巨细胞数正常或增多 ;出血时间延长 ,血块收缩不良 ,束臂试验阳性。又可分为急性型、慢性型两种。1　发病原因患儿发病前常有病毒感染史。目前 ,肯定与ＩＴＰ相关的ＤＮＡ和ＲＮＡ病毒已达十余种[1,2 ] 。ＤＮＡ病毒主要有 :ＥＢ病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、Ｂ19病毒、水痘 -带状疱疹病毒、人类疱疹病毒 6型、…     

通用引物检测宫颈脱落细胞中病毒的临床应用

目的：探讨通用引物检测多种病毒的ＰＣＲ方法。方法：应用聚合酶链反应－酶谱法（ＰＣＲ－ＥＣ０和疱疹病毒通用引物,检测宫颈脱落细胞中单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ⅰ）、单纯疱疹病毒Ⅱ型（ＨＳＶ－Ⅱ）、爱泼期坦－巴尔病毒（ＥＢＶ０和人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）。结果：健康人（２０例）和宫颈糜烂患者（３４例）。ＨＣＭＶ阳性检出率分别为１０．０％和４１．２％,两者差异显著;ＨＳＶ－１分别为５．０％和１４．７％;ＨＳ