急性心肌梗塞时血浆一氧化氮和肿瘤坏死因子的变化

一氧化氮 (ＮＯ)是血管内皮细胞所合成的主要舒张因子之一 ,在心血管系统的调节中具有重要作用[1] ;而肿瘤坏死因子 (ＴＮＦα)作为心肌坏死和炎症反应的主要细胞因子 ,对心肌梗塞及其预后有重要的影响[2 ] 。本文旨在分析ＡＭＩ时血浆中ＮＯ和ＴＮＦα的变化及其与组织纤溶酶原激活物 (ｔ-ＰＡ)的关系。1　资料与方法1 1　研究对象　ＡＭＩ患者 17例 ,男 9例 ,女 8例 ,年龄 (6 5 3± 7 6 )岁 ,所有患者均处于急性发作期 ,有典型的ＡＭＩ心电图改变及血清心肌酶谱改变 ,未经任何溶栓治疗时空腹采血 ,肝素抗凝 ,离心收集血浆 ,- 70℃保存。…     

重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化方法比较研究

目的研究重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化条件。方法采用羊抗人Fab抗体亲和层析柱、14F7单克隆抗体亲和层析柱、离子交换-分子筛层析柱,分别纯化由酵母工程菌(Gs115／Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并对3种纯化方法所得Fab抗体的纯度、收率、与HBsAg的结合活性进行比较。结果3种纯化方法中,14W单克隆抗体柱纯化的Fab抗体的纯度达98％左右,Fab抗体柱纯化的Fab抗体的纯度为95％,但这两种亲和柱的目的蛋白收率都不高,分别为35％、55％。而离子交换柱纯化的Fab抗体的纯度为93．8％,经分子筛柱进一步纯化后,可达98％以上,Fab抗体蛋白收率可达80％以上。经ELISA分析,3种方法纯化的Fab抗体均具有较高的HBsAg抗原结合力和特异性。结论通过对3种纯化方法的比较得出,离子交换一分子筛层析法是重组人抗HBsAg Fab抗体的最佳纯化方法,这为抗HBsAg Fab抗体的产业化生产和临床研究打下良好基础。     

碘[^131I]美妥昔单抗介入治疗肝癌术后病室的防护

[目的]总结原发性肝癌行碘[^131I]美妥昔单抗介入治疗术后病室的防护措施。[方法]使用德国LB-123多功能辐射探测仪分别在设定的碘[^131I]美妥昔单抗介入治疗肝癌术后病人病室内各个位置进行β射线连续监测4d。[结果]病室内任何位置都会受到不同程度的辐射影响。[结论]进入病室的人员有必要采取防护措施,以减少辐射对人体的伤害。     

肝移植术后急性肺水肿的临床研究

目的 探讨肝移植术后早期肺水肿发生原因及处理对策.方法 对35例肝移植术后患者进行回顾性研究,以是否发生肺水肿分为两组,对比分析两组患者术中及术后的输液量、输血液制品量以及氧合指数的变化.结果 有10例患者发生肺水肿,发生率为29%.肺水肿组术中输液量[(9.766±8.613)L]及输血液制品量[(5.092±4.982)L]均明显高于非肺水肿组[分别为(5.432±2.224)L、(2.245±1.289)L],差异均有统计学意义(P均＜0.05);肺水肿组术后1 d输血液制品量也明显高于非肺水肿组[(1.174±0.711)L比(0.877±0.398)L,P＜0.05];肺水肿组无肝前期和新肝期氧合指数[分别为(420.2±103.0)mm Hg,1 mmHg=0.133 kPa和(293.4±115.7)mm Hg]均低于非肺水肿组[分别为(444.5±53.9)mm Hg和(414.9±66.7)mm Hg],且肺水肿组新肝期氧合指数明显低于无肝前期(P＜0.05或P＜0.01).结论 肝移植术后肺水肿发生与术中输液量和输血液制品量有关;肝移植术后肺水肿治疗主要是控制液体入量、利尿和吸氧治疗.     

重组毕赤酵母菌高密度表达人源抗-HBs Fab抗体的研究

目的探讨抗-HBsFab抗体发酵工程菌GS115／Fab的高密度发酵及对发酵产物的纯化与活性鉴定方法。方法采用补料分批培养方法,在5L发酵罐中对发酵工程菌GS115／Fab进行高密度发酵,发酵温度28～30℃,pH值范围为5．0～5．5,溶氧范围20％以上;3次发酵分别于OD600值达到400～450、200～250、300～350时开始诱导,甲醇诱导浓度为0．5％～1％,经96h左右的诱导后终止发酵,对发酵上清进行亲和纯化,并通过ELISA法对纯化产物进行活性鉴定。结果在OD600为300～350时开始诱导有利于发酵过程条件的控制和目的蛋白的表达,目的蛋白表达量为245mg／L。发酵上清通过亲和层析纯化,获得纯度为98％的重组Fab抗体,该抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力及特异性。结论Fab酵母菌工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,为抗-HBsFab抗体的产业化生产及临床研究奠定了基础。     

自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化

目的探讨自体骨髓干细胞（BMSC）移植对肝硬化失代偿期患者的治疗作用。方法23例肝硬化失代偿期患者无菌抽取骨髓60～100ml,分离纯化BMSC,然后经肝动脉导管注入肝脏。术前术后定期检测肝功能,并观察同期的症状体征和不良反应情况。结果与术前比较,术后1周内所有血清学指标均无明显改变;术后1个月,白蛋白为（31．44±2．08）g／LVS（27．63±2．04）g／L（P〈0．01）;谷丙转氨酶为（58．70±25．87）U／Lvs（67．13±27．78）U／L（P〈0．01）;总胆红素、血小板等指标均无明显变化（P〉0．05）。移植后大多数患者症状改善明显,移植后1个月内腹水减轻12例（52％）,食欲改善10例（43％）,体力好转11例（47．8％）,腹胀减轻9例（39．1％）,睡眠改善12例（52．1％）。结论自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化是一种安全的治疗措施,对失代偿期的肝脏可起到一定支持作用。     

Tei指数评估晚期肝病患者右心室功能的临床研究

目的探讨Tei指数在评估晚期肝病患者右心室功能的临床价值。方法对45例晚期肝病患者进行了对比增强超声心动图(CEE)的筛查及右心功能参数的测量,根据CEE检查结果将患者分为有(CEE+)或无(CEE-)肺内分流两组;并根据肺内分流程度分为1+、2+两组,对比分析各组间右心室Tei指数和E/A比值的差异。结果(1)右心室Tei指数在肺内分流组显著高于无肺内分流组(0.47±0.13vs.0.31±0.10,P<0.001);(2)肺内分流2+组较1+组右心室Tei指数增高,但差异无统计学意义。结论晚期肝病患者的右心室Tei指数与肺内分流的出现与否相关,可作为反映右心室功能受损情况敏感、简便的指标。     

肝细胞提取物对癌细胞凋亡相关基因表达的影响

研究资料表明,肝细胞提取物(hepatocyteextraction)在诱导BEL-7402细胞凋亡的同时能促进p53和Fas基因表达,而对bcl-2和C-myc表达具有一定的抑制作用.本研究采用免疫组化技术,进一步观察纯化的肝提取肽(S4)对4种肝癌和4种非肝癌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响.1 材料与方法1.1 肝细胞提取物和S4(subfraction 4)的制备参见文献[2].1.2 细胞系及培养条件SMMC 7721、QGY-7703人肝癌细胞、HCT-8结肠癌细胞、GLC-82低分化肺腺癌细胞引自中国科学院细胞所.BEL-7402人肝癌细胞引自北京中日友好医院中西医结合研究所.Hepe小鼠肝癌细胞、CNE-2鼻咽癌细胞引自中山医科大学.SGC-7901胃腺癌细胞由第四军医大学生化室惠赠.实验时将对数生长期细胞用0.25%胰酶加0.025?TA消化,配成(2.5～5)×10~4/ml细胞悬液,加入内置盖玻片的24孔Costar培养板中,每孔0,5ml.37℃,5%CO_2条件下孵育24小时后,置4℃水浴1小时后立即升到37℃,将S4以不同浓度加入培养孔,每孔0.5ml,继续孵育.洗涤固定细胞,分别做DNA原位末端标记检测和癌基因免疫组化测定.根据预实验结果,选定S4为5μg/ml,作用48小时为统一条件,以利于结果的可比性及准确性.     

hIL-15成熟肽段基因的克隆及其原核表达载体的构建

本文采用ＲＴ ＰＣＲ的方法自成人脾脏中扩增出ｈＩＬ １５成熟肽段基因，定向克隆入ｐＵＣ１９中，筛选带有插段的阳性克隆。经序列测定证实后，插入大肠杆菌融合表达载体ｐＧＥＸ ４Ｔ １中，构建重组表达质粒ｐＧＩＬ １５。ＳＤＳ ＰＡＧＥ证实ｐＧＩＬ １５大肠杆菌中可表达分子量为３８６ｋＤ的融合蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的１８５％。目的蛋白经纯化后具有促进靶细胞ＤＮＡ合成的作用。     

慢性乙肝患者树突状细胞表型和抗原提呈能力的测定

目的：探讨慢性HBV感染者比的表现和功能及其与免疫耐受的关系。方法：选择正常人和慢性HBV感染者，从外周血中分离单个核细胞，用细胞贴壁法富集DC，流式细胞术测定DCHLAⅡ和共刺激分子的表达，同位素掺入法测定DC的抗原提呈能力，ELISA方法测定抗原提呈过程中Th1和Th2类细胞因子的水平。结果：慢性HBV感染者HLAⅡ和共刺激分子表达水平、抗原提至能力和Th1类细胞因子的水平均低予正常(P＜0．05)，而Th2类细胞因子的水平与正常相似(P＞0．05)。结论：慢性HBV感染免疫耐受与DC的缺陷有关。