| 重组毕赤酵母菌高密度表达人源抗-HBs Fab抗体的研究 |
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| 引用本文： | 陈文吟,饶桂荣,粟宽源,邓宁,余宙耀. 重组毕赤酵母菌高密度表达人源抗-HBs Fab抗体的研究[J]. 解放军医学杂志, 2004, 29(9): 810-812 |
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| 作者姓名： | 陈文吟 饶桂荣 粟宽源 邓宁 余宙耀 |
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| 作者单位： | 510602,广州,解放军第458医院;中山大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 广州市科技局重大攻关项目基金资助课题 (编号 99Z0 1 0 0 1 ) |
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| 摘 要： | 目的探讨抗-HBsFab抗体发酵工程菌GS115／Fab的高密度发酵及对发酵产物的纯化与活性鉴定方法。方法采用补料分批培养方法，在5L发酵罐中对发酵工程菌GS115／Fab进行高密度发酵，发酵温度28～30℃，pH值范围为5．0～5．5，溶氧范围20％以上；3次发酵分别于OD600值达到400～450、200～250、300～350时开始诱导，甲醇诱导浓度为0．5％～1％，经96h左右的诱导后终止发酵，对发酵上清进行亲和纯化，并通过ELISA法对纯化产物进行活性鉴定。结果在OD600为300～350时开始诱导有利于发酵过程条件的控制和目的蛋白的表达，目的蛋白表达量为245mg／L。发酵上清通过亲和层析纯化，获得纯度为98％的重组Fab抗体，该抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力及特异性。结论Fab酵母菌工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功，为抗-HBsFab抗体的产业化生产及临床研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 抗-HBs Fab抗体 高密度发酵 毕赤酵母菌 亲和层析 |
| 修稿时间： | 2004-04-22 |
Expression of recombinant humanized anti-HBsAg Fab fragment in genetically engineered Pichia pastoris in high-density fermentation |
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| Chen Wenyin,Rao Guirong,Su Kuanyuan et al . Hospital of PLA,Guangzhou ,China. Expression of recombinant humanized anti-HBsAg Fab fragment in genetically engineered Pichia pastoris in high-density fermentation[J]. Medical Journal of Chinese People's Liberation Army, 2004, 29(9): 810-812 |
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| Authors: | Chen Wenyin Rao Guirong Su Kuanyuan et al . Hospital of PLA Guangzhou China |
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| Affiliation: | Chen Wenyin,Rao Guirong,Su Kuanyuan et al . 458 Hospital of PLA,Guangzhou 510602,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | anti HBsAg Fab fragment high density fermentation Pichia pastoris affinity chromatography |
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