丙基戊酸钠对宫颈癌细胞HeLa增殖的影响机制

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)丙基戊酸钠(sodium valproate,VPA)影响宫颈癌细胞HeLa增殖的机制。方法:用MTT法检测不同浓度VPA对HeLa细胞增殖的影响;倒置相差显微镜观察药物作用后细胞形态的变化;流式细胞仪(FCM)分析不同浓度VPA对HeLa细胞凋亡及细胞周期的影响;Western blot观察不同浓度VPA处理后caspase-3、bcl-2蛋白的表达变化。结果:VPA能明显抑制HeLa细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖关系;经4mmol/L VPA处理48h后,HeLa细胞缩小变形成长梭状、胞膜皱缩、贴壁不良;VPA诱导HeLa凋亡、阻滞细胞于G2/M期,同时抑制细胞增殖;随浓度增加,VPA能明显增加caspase-3蛋白表达,并可见到蛋白裂解产物,表明VPA可以促进caspase-3活化,但下调bcl-2蛋白的表达。结论:VPA有抗宫颈癌作用,其重要作用机制之一是诱导HeLa细胞凋亡、直接抑制细胞增殖,有望成为新的抗宫颈癌药物。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合顺铂对宫颈癌细胞化疗增敏作用的研究

目的:通过检测组蛋白去乙酰化酶抑制剂(SAHA)联合顺铂(DDP)对宫颈癌SiHa细胞生长抑制和促凋亡结果,探讨SAHA对宫颈癌细胞化疗增敏的疗效及机制。方法:将SAHA 0.25、0.5、1、2、4、6μmol/L和DDP 1、2、4、6、8、10μg/mL分别组成单药组和不同SAHA+DDP联合用药组,另设不加药对照组。MTT法检测两种药物单用及联合用药对SiHa细胞的增殖抑制作用;通过流式细胞术(FCM)观察药物对细胞周期的影响;用AnnexinV-FITC标记药物作用后的细胞,了解其早期凋亡情况;镜检观察药物作用后细胞形态的变化。结果:SAHA有抑制癌细胞生长的作用,两药联合具有协同作用或相加作用(P<0.05);SAHA使细胞停滞在G1/G0期,与DDP联合作用后凋亡率增加,使细胞周期进一步阻滞在G1/G0期(P<0.05)。镜下可见对照组癌细胞生长旺盛,异型性高,SA-HA组与DDP组则可见细胞缩小变形,胞膜皱缩,贴壁不良,肿瘤细胞大量坏死,联用组尤为明显。结论:SAHA联合DDP可以抑制细胞增殖,停滞细胞周期,促进细胞凋亡,二者联合有协同作用。     

组蛋白去乙酰化酶及其抑制剂与子宫内膜异位症的研究进展

子宫内膜异位症是一个妇科常见病,其发病机制目前尚不明确,目前认为它与表观遗传改变有密切关系。组蛋白乙酰化修饰是表观遗传调控的重要机制之一。现结合国内外文献报道,对组蛋白去乙酰化酶及其抑制剂与子宫内膜异位症的发病及治疗前景做一综述。     

槲皮素对子宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制

的凋亡.     

组蛋白去乙酰化酶1蛋白在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白在早期自然流产发生中的病理生理作用及临床意义。方法:应用免疫组织化学和Western blot法检测早期自然流产和早期正常妊娠者绒毛及蜕膜组织中HDAC1蛋白的表达。结果:免疫组化示:HDAC1主要定位于绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和子宫蜕膜细胞、腺上皮细胞的胞核;早期自然流产绒毛组织中HDAC1的表达强度低于早期正常妊娠组,而蜕膜组织中,早期自然流产组织HDAC1的表达强度高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Westernblot示:早期自然流产绒毛组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.38±0.63,明显低于正常妊娠组(1.92±0.82),差异有统计学意义(P<0.05);而早期自然流产蜕膜组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.02±0.53,明显高于正常妊娠组(0.71±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDAC1在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的异常表达可能在早期自然流产的发生、发展中起重要作用。     

野生型p53抑制宫颈癌HeLa细胞的研究

目的:研究外源性野生型p53(wtp53)基因对宫颈癌HeLa细胞中的致癌基因环氧合酶-2(COX-2)的影响,以及抑制HeLa细胞生长的作用。方法:用脂质体介导的转染技术将野生型p53基因转染到HeLa细胞。实验分为2组,p53转染组(p53-HeLa组)和空白对照组(HeLa组),wtp53表达用逆转录-多聚酶链反应鉴定,并检测p53mR-NA和COX-2mRNA瞬时转染及稳定转染前后表达的变化。CCK-8染色法绘制细胞生长曲线。结果:野生型p53基因转染后HeLa细胞中的p53mRNA表达增加,COX-2mRNA表达减少。通过对细胞生长曲线的分析,转染后与转染前相比,生长明显减慢(P<0.01),wtp53对HeLa细胞有抑制作用。结论:外源性wtp53基因表达可抑制宫颈癌He-La细胞中COX-2mRNA的表达;wtp53可能通过抑制COX-2对宫颈癌HeLa细胞产生抑制作用,进而阻碍肿瘤的生长。     

Netrin-1在HeLa细胞的表达及对HeLa细胞功能的影响

目的:研究Netrin-1在HeLa细胞的表达及对HeLa细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法:利用蛋白质印迹法检测Netrin-1在HeLa细胞的表达,并通过MTT、侵袭实验和流式细胞仪分别检测10,50和100ng/mlNetrin-1对HeLa细胞增殖能力、侵袭能力和凋亡的影响。结果:(1)Netrin-1在HeLa细胞有表达,其相对表达量为0.389±0.026;(2)MTT实验结果显示,Netrin-1可以促进HeLa细胞增值,表现为时间和剂量依赖性,与对照组有显著差异(P<0.05或P≤0.01);(3)Netrin-1处理组细胞迁移数分别为314±16,487±15和553±19,均明显多于对照组180±10(P均<0.05);(4)在Netrin-1干预下,HeLa细胞凋亡率呈递减趋势,与对照组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01)。结论:HeLa细胞表达的Netrin-1与宫颈癌的侵袭转移有关,Netrin-1促进HeLa细胞增殖和侵袭能力,并抑制HeLa细胞凋亡,可能为未来宫颈癌的治疗提供依据。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对宫颈癌细胞的放射增敏作用

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对宫颈癌SiHa细胞的毒性和放射增敏作用。方法 2009年10月至2010年6月在河北联合大学医学院采用MTT法检测SAHA对SiHa细胞的毒性并计算IC50。选择20%IC50的SAHA与放疗联合,克隆形成实验分析SAHA对SiHa细胞的放射增敏作用,采用Sigma Plot 2000 Demo版软件,利用多靶单击模型S=1-(1-eD0/D)n拟合细胞存活曲线,计算放射相关参数和放射增敏比,评价增敏效果。结果 MTT结果显示SAHA对SiHa细胞的毒性反应呈浓度和时间依赖性,SAHA作用SiHa细胞48h的IC50为4.80μmol/L。克隆形成实验结果显示,SAHA联合放疗组细胞的克隆形成率明显低于单独放疗组,二者的平均致死剂量(D0)分别为2.329、1.213,准阈剂量Dq分别为1.721、0.823。放射增敏比(SER)为1.92。结论 SAHA对宫颈癌SiHa细胞有良好的细胞毒性和放射增敏作用。     

1,3-O,N螺杂环类乙酰肝素酶抑制剂对子宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用

目的：通过观察乙酰肝素酶（HPA）抑制剂对子宫颈癌HeLa细胞体外生长的抑制作用及HPA表达的影响,为子宫颈癌HPA分子靶向治疗提供理论依据。方法优化设计并合成了两个系列共13种1,3-O,N螺杂环类化合物,产品编号为10～22号,其中21号为HPA抑制剂——DMBO化合物,余12种为新合成的化合物。其中,1个系列含甲氧苯基,产品编号为10～14号;另1个系列不含甲氧苯基,产品编号为15～22号。（1）采用乙酰肝素降解检测试剂盒检测新合成的化合物（选择与DMBO结构类似度高的6个化合物,即14、15、16、20、21、22号化合物）对HPA活性的作用,以50%抑制浓度（IC50）表示作用的强弱;（2）四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测新合成的化合物（7个化合物,即11、12、14、15、16、20、22号化合物）作用后HeLa细胞生长的抑制作用,选择抑制作用最大的化合物（即16号化合物）用于以下实验;（3）细胞划痕实验观察16号化合物作用后HeLa细胞迁移能力的变化;（4）流式细胞仪检测16号化合物作用后HeLa细胞的细胞周期比例和细胞凋亡率的变化;（5）实时定量逆转录（RT）-PCR技术、蛋白印迹法和免疫组化法检测16号化合物作用后HeLa细胞中HPA mRNA和蛋白表达的变化。结果（1）6个新合成的化合物（即14、15、16、20、21、22号化合物）对HPA活性均有不同程度的抑制作用,除22号化合物抑制作用不明显无法测出IC50值外,14、15、16、20、21号化合物的IC50值分别为4.47、21.81、8.36、14.13、47.19μmol/L。（2）MTT比色法检测显示,不同浓度（分别为1、5、15、30、60、120、180、240μmol/L）的7个新合成的化合物（即11、12、14、15、16、20、22号化合物）作用48 h对HeLa细胞的生长均有抑制作用,并呈明显的浓度依赖性（P<0.01）,其中16号化合物的抑制效果最显著（IC50值为48.16μmol/L）;进一步检测显示,16号化合物作用不同时间（分别为24、48、72、96 h）后对HeLa细胞生长的抑制作用呈明显的时间依赖性（P<0.01）。（3）细胞划痕实验观察显示,作用24 h后,实验组（加入50μmol/L的16号化合物,下同）HeLa细胞迁移能力明显受到抑制,其划痕的宽度明显大于对照组（不加16号化合物,下同）。（4）流式细胞仪检测显示,作用48 h后,实验组HeLa细胞G0/G1期、G2/M期比例分别为（75.85±1.77）%、（11.65±0.64）%,均明显高于对照组[分别为（49.10±3.11）%、（0.17±0.24）%;P<0.01];S期细胞比例为（12.50±1.13）%,明显低于对照组的（50.70±2.83）%（P=0.003）。实验组HeLa细胞的凋亡率为（11.9±1.2）%,明显高于对照组的（6.6±1.8）%（P=0.013）。（5）实时定量RT-PCR技术和蛋白印迹法检测显示,作用48 h后,实验组HeLa细胞中HPA mRNA和蛋白的表达水平分别为1.23±0.46和0.46±0.31,明显低于对照组的3.43±0.45和1.30±0.58（P<0.05）;免疫组化法检测显示,实验组累积吸光度（IA）值为0.39±0.04,对照组为0.50±0.09,两组比较,差异有统计学意义（P=0.026）。结论新型1,3-O,N螺杂环类HPA抑制剂可能通过凋亡途径显著抑制子宫颈癌HeLa细胞的生长;该类抑制剂可明显抑制HeLa细胞的HPA活性,并下调其HPA mRNA和蛋白的表达。     

PPI1诱导人宫颈癌HeLa细胞G_2/M期停滞及机制研究

目的:探讨Ⅰ型磷酸酶抑制亚基1(PPI1)对人宫颈癌细胞系HeLa细胞周期的影响及其作用机制。方法:分别将PPI1野生型和短片段突变活化型基因通过脂质体介导转染人宫颈癌HeLa细胞,用RT-PCR和Western blot鉴定目的基因的表达;用流式细胞术分析瞬时转染HeLa细胞的细胞周期。对稳定转染的HeLa细胞用脱氧胸苷处理,通过流式细胞术观察PPI1对同步化HeLa细胞的细胞周期进展的影响。用免疫印迹分析细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:野生型和突变活化型PPI1在HeLa细胞中均能有效表达。突变活化型PPI1基因的瞬时转染可使HeLa细胞G2/M期比例明显升高。经脱氧胸苷处理过的同步化的稳定转染的HeLa细胞中,突变活化型和野生型PPI1均可使HeLa细胞停滞在G2/M期的时间长于对照组,而且前者更明显。免疫印迹显示:突变活化型PPI1瞬时表达48h后,cyclin A、cyclin B1、p53和p21表达上调。经脱氧胸苷同步化并恢复正常培养基后,稳定表达突变活化型PPI1的细胞cyclin B1在10.5和12h,p53在6、7.5、9和10.5h表达明显增强;稳定表达野生型PPI1的细胞cyclin B1在10.5h的表达也比对照组明显增强。结论:突变活化型的Ⅰ型磷酸酶抑制亚基1可诱导宫颈癌HeLa细胞G2/M期停滞,它与cyclin A和cyclin B1表达上调及cyclin B1降解滞后有关,而G2/M期停滞的维持与p53和p21表达上调有关。     

p21~(WAF1/Cip1)和p27~(Kip1)在宫颈癌及癌前病变的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期负向调控因子p21WAF1/Cip1和p27Kip1在宫颈癌及癌前病变(CIN)中的表达特点。方法:选择妇科门诊宫颈疾病专科就诊患者163例,用第二代杂交捕获试验(HCⅡ)检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)DNA负荷量,阴道镜下宫颈活检,病理确诊,并用活检组织行p21WAF1/Cip1和p27Kip1免疫组化检测,比较慢性宫颈炎、CINⅠ-Ⅲ及宫颈癌各组间HR-HPV负荷量和p21WAF1/Cip1、p27Kip1表达差异。结果:各病理类型病变(共5组)的HR-HPV阳性率分别为:慢性宫颈炎38.46%(15/39),CINⅠ80%(12/15),CINⅡ81.82%(18/22),CINⅢ93.33%(56/60),宫颈鳞癌88.89%(24/27)。慢性宫颈炎HR-HPV DNA负荷量明显低于其他4组(M=0.56pg/ml,P<0.01),CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(P>0.05)。p21WAF1/Cip1和p27Kip1阳性表达率在CINⅠ~Ⅲ及宫颈癌4组间无显著差异(CINⅠ40.00%、60.00%,CINⅡ54.55%、54.55%,CINⅢ56.67%、70.00%,宫颈癌51.85%、77.78%,P>0.05),但均显著高于慢性宫颈炎组(5.13%、17.95%,P<0.01);p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与HR-HPV DNA负荷量升高和宫颈病变进展呈正相关,相关系数(rs)分别为:p21WAF1/Cip1:0.27、0.34,P<0.01;p27Kip1:0.30、0.46,P<0.01。结论:p21WAF1/Cip1和p27Kip1表达增强与宫颈病变进展密切相关,对宫颈HR-HPV持续感染及高负荷量患者可行p21WAF1/Cip1和p27Kip1检测以预测细胞病变的发生和发展。     

Studies on the molecular mechanism of growth inhibition with p53 adenoviral construct in human ovarian cancer

Mujoo K, Catino JJ, Maneval DC, Gutterman JU. Studies on the molecular mechanism of growth inhibition with p53 adenoviral construct in human ovarian cancer. Int J Gynecol Cancer 1998; 8 : 233–241.
Advanced stage human ovarian cancer exhibits 50–60% mutation of the p53 tumor suppressor gene. We introduced the wild-type p53 gene into the cells using a replication deficient recombinant adenovirus for p53 gene therapy. p53-adenovirus (rAd-p53) inhibited the growth of a number of ovarian cancer cells, which correlated well with the transduction of adenovirus containing β-galactosidase reporter gene in the tested cell lines. Results presented herein demonstrate that p53 induced the expression of CDK inhibitor WAF1/CIP1/p21 in human ovarian cancer cells with null or mutant p53. p53 incorporation also induced the expression of mdm-2 and bax proteins in human ovarian cancer cells. In contrast, we were unable to detect the expression of bcl-2 protein in the tested cells, and the expression bcl-x_L in the tested human ovarian cells was not altered post-infection of cells with rAd-p53. Cell cycle analysis revealed pronounced G1 arrest 24 h post-infection with rAd-p53 in human ovarian cancer cells with only a small percentage of cells (−2%) undergoing apoptosis. rAd-p53 (p53-adenovirus) inhibited the growth of established subcutaneous xenograft tumors (OVCAR-3) of human ovarian carcinoma and completely regressed the tumors in 5/8 mice, indicating a potential for p53 tumor suppressor gene therapy in human ovarian cancer.     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响及其作用机制研究

目的:探讨阿司匹林对卵巢癌细胞凋亡的影响以及对凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的作用。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)快速比色法分析阿司匹林对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用,用流式细胞术分析方法定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化。用RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2/bax mRNA的表达。结果:阿司匹林对SK-OV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈量效和时效的关系;1、5、10mmol/L3个浓度的阿司匹林处理细胞48h后,细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,而且G0/G1期细胞比例下降,G2/M期细胞比例升高,细胞被阻滞在G2/M期,细胞周期也发生明显改变;阿司匹林可抑制卵巢癌细胞的bcl-2mRNA表达,而上调bax mRNA的表达。结论:阿司匹林能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡。此作用可能与阿司匹林抑制细胞bcl-2mRNA的表达和上调bax mRNA表达有关。     

中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1表达的研究

目的　通过研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒 (HCMV)感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1蛋白丰度变化的影响 ,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断和治疗效应及其机制。方法　 2 0 0 2年 11月至 2 0 0 4年 4月华中科技大学同济医学院附属同济医院采用蛋白免疫印迹 (Westernblot)方法检测HCMV感染后 2 4h、4 8h、72h、96h细胞中p2 1WAF1/CIP1丰度 ,检测中药金叶败毒制剂干预后p2 1WAF1/CIP1丰度的变化。结果　病毒感染后 2 4h、4 8h、72h、96h细胞中 p2 1WAF1/CIP1丰度呈下降趋势 ,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势。结论　中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的p2 1WAF1/CIP1丰度下降 ,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一。     

Time-dependent changes in factors involved in the apoptotic process in human ovarian cancer cells as a response to cisplatin

OBJECTIVES: Apoptosis is believed to be a major mechanism of cisplatin-induced cell death. We investigated the kinetics of apoptosis in four human ovarian cancer cell lines treated with cisplatin to obtain insight into the role and the behavior of a variety of factors involved in this process. METHODS: The cell lines A2780, H134, and IGROV-1 (all wild-type p53) and OVCAR-3 (mutant p53) were exposed to cisplatin for 1 h and the antiproliferative effects were measured after 96 h. At various time points up to 96 h after the 1-h exposure to the individual 90% growth-inhibiting cisplatin concentrations, FACS analysis and May-Grünwald Giemsa staining were carried out to determine the extent of apoptosis. At the same time points protein expression levels of p53, p21/WAF1, Bax, and Bcl-2 and the activity of caspase-3 were measured. FACS analysis was also carried out to determine changes in cell cycle distribution as a response to cisplatin. RESULTS: The four cell lines differed in sensitivity to cisplatin. A2780 was the most sensitive and IGROV-1 was the least sensitive. In contrast, IGROV-1 cells showed the highest percentage of apoptosis (30-40%), while A2780 had the lowest percentage (6-14%) (r = 0.99). The occurrence of apoptosis was not dependent on functional p53. Of interest, caspase-3 activity was in line with the percentage of apoptosis and preceded DNA fragmentation and the visualization of condensed nuclei. Wild-type p53 cells accumulated in the S phase, while OVCAR-3 arrested in the G2/M phase. The protein expression levels of p53, p21/WAF1, Bax, and Bcl-2 varied in time, but were not related to the apoptotic behavior of the cells. Upregulation of p53 was already evident before activation of caspase-3. CONCLUSIONS: Time-dependent changes in the various factors involved in the apoptotic process induced by equitoxic doses of cisplatin vary strongly among the cell lines. Caspase-3 activation plays an important role in cisplatin-induced apoptosis and this precedes morphological changes. The ability of cells to enter apoptosis, however, does not seem to predict sensitivity to cisplatin.     

P~(21)WAF1/CIP_1、CyclinE、PCNA在卵巢上皮性肿瘤中的表达与临床意义

目的 :探讨P2 1WAF1/CIP1、CyclinE、PCNA在恶性卵巢上皮性肿瘤发生、发展中的作用。方法 :应用免疫组化S P法检测P2 1WAF1/CIP1、CyclinE、PCNA在 2 0例良性、10例交界性、5 5例恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达 ,并分析它们与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理指标的关系。结果 :(1)P2 1WAF1/CIP1在良性、交界性至恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达逐渐降低 (P <0 .0 1) ;CyclinE、PCNA的表达结果则相反 (P <0 .0 1,P <0 .0 1) ;(2 )在卵巢上皮癌中P2 1WAF1/CIP1与CyclinE、PCNA的表达呈负相关 (P <0 .0 5 ,r =- 0 .196;P <0 .0 0 1,r=- 0 .2 6) ;CyclinE与PCNA的表达呈正相关 (P <0 .0 5 ,r =0 .13) ;(3)P2 1WAF1/CIP1表达与卵巢上皮癌的早期、高中分化、无淋巴转移、无腹水均有关 (P <0 .0 5 ) ;CyclinE则相反 (P <0 .0 5 ) ;PCNA的表达阳性率与低分化、有淋巴转移均有关系 (P <0 .0 5 ) ,而与临床分期、有无腹水无关 (P >0 .0 5 ) ,但强阳性率在晚期、有腹水组明显高于早期、无腹水组 (P <0 .0 5 )。结论 :P2 1WAF1/CIP1低表达、CyclinE和PCNA的高表达在恶性卵巢上皮性肿瘤的形成和发展中起重要作用     

反义Snail转录因子抑制卵巢癌转移的实验研究

目的探讨反义Snail转录因子抑制卵巢癌转移的机理。方法采用RTPCR技术分别检测卵巢透明细胞癌细胞株ES2、卵巢腺癌细胞株OVCAR3、卵巢浆液性囊腺癌细胞株HO8910和高转移卵巢浆液性囊腺癌细胞株HO8910PM细胞中Snail、E钙黏蛋白mRNA的表达水平。将HO8910细胞分为两组,分别转染反义Snail质粒(反义组)和空载体质粒(对照组),观察Snail对E钙黏蛋白mRNA表达的逆转作用,及对卵巢癌细胞体外侵袭、运动的抑制作用。结果PCR产物凝胶电泳结果显示,SnailmRNA在ES2、HO8910、HO8910PM细胞中有表达,而E钙黏蛋白mRNA仅在OVCAR3细胞中有表达。HO8910细胞瞬时转染0、24、48h时,SnailmRNA的表达水平分别为0.897±0.005、0.865±0.010、0.338±0.014,0与24h时相比,差异有统计学意义(P<0.05);24h与48h时相比,差异有统计学意义(P<0.01);同时,E钙黏蛋白mRNA开始有表达,并随转染时间的增加而增加,0、24、48h时,E钙黏蛋白mRNA表达水平分别为0、0.130±0.001、0.217±0.005,各时间点间分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。HO8910细胞稳定转染后,反义组、对照组SnailmRNA表达水平分别为0.126±0.010、0.355±0.020,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);反义组E钙黏蛋白mRNA开始有表达,表达水平为0.467±0.040,而对照组为0,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);同时,检测间质细胞标志物纤维连接蛋白mRNA的表达水平,反义组为0.191±0.010,显著低于对照组的0.582±0.010(P<0.01)。体外细胞运动实验表明,反义组、对照组跨膜细胞数[分别为(48±2)、(396±29)个/高倍镜(×200)]比较,差异有统计学意义(P<0.01)。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,两组穿透基底膜细胞数[分别为(35±10)、(219±72)个/高倍镜(×200)]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢癌细胞中存在SnailmRNA与E钙黏蛋白mRNA表达的逆转关系,抑制SnailmRNA的表达对卵巢癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点。     

白介素-28 A增加顺铂对卵巢癌细胞毒性的作用及机制研究

目的:探讨白介素-28A(IL-28A)增强顺铂对卵巢癌的细胞毒性作用及其机制.方法:实时荧光定量PCR法检测卵巢癌组织和细胞及正常卵巢上皮组织和细胞中IL-28A水平.IL-28A(100ng/ml)预处理C13K细胞24h,CCK-8和流式细胞术分别检测顺铂对C13K细胞半数抑制浓度(IC50)、细胞存活率和细胞凋...