黄芪多糖分离与结构特征分析

目的从黄芪中提取分离多糖并对其进行理化性质及结构特征分析。方法采用DEAE-52和Sephadex G-100色谱柱分离纯化,得到黄芪均一多糖APS-Ⅰ和APS-Ⅱ,通过高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)和环境扫描电镜(ESEM)对APS-Ⅰ和APS-Ⅱ进行结构及形貌特征分析。结果 APS-Ⅰ和APS-Ⅱ为均一多糖,APS-Ⅰ中单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖和半乳糖,且摩尔比率为29.12∶1.89∶4.00∶1.35∶1∶81.97;APS-Ⅱ中单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖,且摩尔比率为50.46∶1.16∶1∶2.27∶2.66∶15.72∶7.86。IR显示APS-Ⅰ和APS-Ⅱ均为酸性多糖。ESEM观察显示APS-Ⅰ形貌工整,APS-Ⅱ形貌不规则。结论 APS-Ⅰ是一种呈丝带状结构分子量约为1.06×104Da的杂多糖,APS-Ⅱ是一种分子量约为2.47×106Da的杂多糖。     

九香虫及相似品的多糖组成分析

目的:分析九香虫及相似品的多糖组成。方法:采用水提醇沉法提取多糖,利用苯酚-硫酸法测定多糖含量,通过柱前衍生化HPLC分析单糖组成,使用SIMCA-P软件进行主成分分析(PCA)。结果:小皱蝽的多糖含量相对偏高,其次为无刺蝽;九香虫等的多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等单糖组成,而小皱蝽的多糖主要由葡萄糖组成;从主成分分析来看,除九香虫外,其他品种能聚合为一类。结论:九香虫及相似品多糖含量、单糖组成存在明显差异。     

首批肝素相对分子质量国家对照品的建立

目的《中国药典》2015年版二部肝素钠、肝素钙新增相对分子质量与相对分子质量检查项,需建立首批肝素相对分子质量国家对照品及系统适用性对照品。方法以《美国药典》肝素相对分子质量测定用对照品(USP heparin sodium molecular weight calibrant,批号:F0L483)为肝素相对分子质量对照品,以《美国药典》肝素相对分子质量系统适用性对照品(USP heparin sodium identification,批号:G1L413)为肝素相对分子质量系统适用性对照品,采用《中国药典》2015年版二部肝素钠“相对分子质量与相对分子质量分布”检查法,对肝素相对分子质量国家对照品待标品(批号:140819-201501)及肝素国家对照品待标品(批号:140818-201501)进行相对分子质量与相对分子质量分布测定,由全国12个药检所及肝素生产厂家实验室协作标定。结果对肝素相对分子质量国家对照品待标品(批号:140819-201501)相对分子质量5000~42000的20个点的百分面积进行标定,对实验室内误差进行考察,12个实验室中有2个实验室(2号、7号)部分点的标准差(standard deviation,SD)为1%~2%,其余10个实验室的SD值均小于1%,对实验室间误差进行考察,20个数据点的SD值均小于1%。相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于10%。肝素国家对照品待标品重均相对分子质量实验室内SD值除2号实验室外,其余实验室SD小于180,实验室间SD为180,实验室间RSD为1.1%。结论经国家药品标准物质委员会审定后批准,肝素相对分子质量国家对照品待标品(批号:140819-201501),附带宽分布标样表,及肝素国家对照品待标品(批号:140818-201501),重均相对分子质量16200,可以用于《中国药典》2015年版二部肝素钠、肝素钙相对分子质量与相对分子质量分布检查使用。     

高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成

目的:采用高效液相法测定黄芪中性多糖的单糖组成。方法:正交设计优选三氟乙酸水解黄芪中性多糖的条件;水解产物直接采用高效液相-视差检测器(HPLC-RID)检测或经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后高效液相-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测两种方法,以6种单糖为对照,测定水解产物中单糖的组成。结果:黄芪中性多糖的三氟乙酸完全酸水解最佳条件为采用1M TFA,水解温度100℃,水解时间5 h;两种高效液相色谱法测得水解产物中的单糖均为葡萄糖。结论:采用三氟乙酸完全酸水解条件和高效液相色谱法测定单糖的方法简便易行,可用于黄芪中性多糖的单糖组成研究。     

GC与HPLC用于注射用黄芪多糖组成分析的比较研究

目的:采用GC和HPLC法测定并评价注射用黄芪多糖(APS-P)组成及单糖组成比。方法:以APS-P为研究对象,建立三甲基硅烷(Tri-Sil)衍生化-GC和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-HPLC测定APS-P组成、单糖组成比的方法。通过方法学考察及对15批样品的分析,评价两种方法的适用性。结果:两种方法的专属性、精密度和稳定性较好,但PMP柱前衍生化-HPLC的操作和计算与Tri-Sil衍生化-GC相比更为简便。APS-P的组成较为固定,但单糖组成比在批与批之间呈现一定波动性。结论:PMP柱前衍生化-HPLC用于APS-P组成、单糖组成比分析更具优势。     

市售不同厂家人参多糖注射液的质量评价

目的:评价目前市面上4个厂家5批次人参多糖注射液的质量.方法:从药物分析的角度,对人参多糖注射液进行常规检查,并测定其相对分子质量和单糖组成.结果:4个厂家的产品均符合相关质量标准和2010年版《中国药典》中的相关规定,但是相对分子质量分布和单糖组成差异很大.结论:建议提高人参多糖注射液的质量标准,保障安全用药.     

党参多糖提取纯化工艺优化及其组成研究

目的通过对党参多糖(CPP)的提取纯化工艺优化及其单糖组成和相对分子质量(M)分布进行研究,为进一步分离CPP提供依据。方法采用硫酸-苯酚法测定多糖的量,采用正交设计确定最佳提取工艺;对提取的粗多糖进行脱蛋白、脱色、透析、冷冻干燥处理,得到精制粗多糖,并采用HPLC和高效凝胶色谱(HPGPC)法,对多糖水解后的单糖组成和相对分子质量分布进行测定。结果 CPP的最佳提取工艺为提取温度85℃,料液比1∶12,提取次数2次,提取时间1.5 h。在上述条件下,CPP的提取率可达到22.57%。水解单糖组成为葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、木糖和少量甘露糖,多糖重均相对分子质量(Mw)为21 498。结论为CPP的分级和活性研究提供了理论基础。     

基于多糖受体理论的黄芪多糖质量控制研究思路

黄芪是我国常用的大宗中药材,具有很高的药用及食用价值。其化学成分主要包括皂苷类、黄酮类、多糖类及氨基酸类等。其中黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)作为黄芪的主要活性成分因其非专属性和可控性不强等问题,未能作为质控指标评价黄芪种质资源。多糖受体理论的提出和应用为解决多糖类药品质控的国际性难题提供了新思路。综述了近年来黄芪多糖质量控制与多糖受体理论的研究进展,并提出了黄芪寡糖活性中心的质控研究思路。     

铁皮石斛花多糖相对分子质量及其单糖组成的研究

为了明确铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及其单糖组成,该研究采用高效凝胶色谱和柱前衍生UPLC对11个铁皮石斛花样品的多糖进行了相对分子质量及其单糖组成分析,并利用SPSS 19.0软件根据组成的单糖峰面积进行聚类分析,结果表明11个杂交家系铁皮石斛花的粗多糖均分离为三部分(DOP-1,DOP-2和DOP-3),其平均相对分子质量分别为5.53×10~5,3.49×10~5和2.12×10~5。铁皮石斛花多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖5种单糖组成,其中甘露糖组成比例最高,其与葡萄糖比值为0.302~3.335;不同家系样品多糖中各单糖的相对含量存在一定差异,11个家系按单糖组成及相对含量划分为4类,该研究基本明确了铁皮石斛花中多糖相对分子质量分布及单糖构成,为其资源利用打下基础。     

首批低分子肝素相对分子质量国家对照品的建立

目的国家药典委员会于2017年6月在网上公示了达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙3类低分子肝素标准征求意见稿,作为2020年版《中国药典》拟新增品种,为保证标准的顺利实施,急需建立首批低分子肝素相对分子质量国家对照品及相对分子质量系统适用性对照品。方法以WHO第2次低分子肝素相对分子质量测定用对照品(2ndinternational standard low molecular weight heparin for molecular weight calibration,批号05/112)为低分子肝素相对分子质量对照品,采用公示标准中"相对分子质量与相对分子质量分布"检查法,对低分子肝素相对分子质量国家对照品待标品(批号:140820-201801)、达肝素钠国家对照品待标品(批号:140811-201801)、依诺肝素钠国家对照品待标品(批号:140810-201801)、那屈肝素钙国家对照品待标品(批号:140812-201801)进行相对分子质量与相对分子质量分布测定,由全国13个药检所及低分子肝素生产厂家实验室协作标定。结果对低分子肝素相对分子质量国家对照品待标品相对分子质量6...     

对照提取物法测定葛根饮片中5种成分含量

目的:建立对照提取物法测定葛根饮片中5种成分含量的方法,考察对照提取物在中药质量标准中应用的适用性和可行性。方法:Zorbax C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.02%磷酸(25∶75),检测波长250 nm。采用自制葛根对照提取物,测定葛根饮片中的3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷元-8-C-芹菜糖-(1→6)葡萄糖苷、大豆苷的含量,并与单一对照品测定法的实验结果进行比较。结果:对照提取物测定法的精密度、稳定性、重复性良好,并且测定结果与单一对照品测定法所得结果一致。2种测定方法所得数据的RSD低于2%。结论:葛根对照提取物可以用于葛根药材的质量控制,该文初步验证了对照提取物在中药应用的可行性。     

桑皮苷A对照品的制备研究

目的 研究从桑白皮中制备桑皮苷A对照品的制备方法.方法 结合大孔树脂吸附、硅胶柱色谱和凝胶柱色谱对桑白皮提取物进行分离、纯化,利用TLC和HPLC-ELSD对分离产物进行质量分数检测,并通过各种波谱手段等对其进行结构确证.结果 从桑白皮中分离、纯化出桑皮苷A对照品,质量分数>98.5%.结论 该方法制备出的桑皮苷A对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为桑白皮药材和含桑白皮成药质量控制,以及中药药效物质基础研究用的化学对照品.     

基于UPLC替代对照品法测定大蒜中大蒜辣素

目的基于UPLC建立替代对照品法测定大蒜中的大蒜辣素。方法新鲜蒜泥甲醇提取物的分析采用Waters Acquity BEH C₁₈柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液;柱温30℃;体积流量0.3 mL/min;检测波长242 nm。结果大蒜辣素、羟苯乙酯在36.02～564.74、12.93～206.80μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 8),加样回收率98.8%～100.9%,定量下限1.73～2.03 mg/kg。外标法与替代对照品法测定结果无统计学差异(P>0.05)。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于大蒜的质量控制。     

基于糖类成分探究黄精炆制前后差异

目的 基于黄精炆制前后糖类成分变化差异探讨黄精炆制后“减毒增效”的作用机制。方法 采用UV（紫外分光光度）法，测定黄精炆制前后的总多糖含量；采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）法测定黄精炆制前后游离糖含量；采用高效凝胶渗透色谱-示差折光检测器（HPGPC-RI）法分析黄精炆制前后的多糖相对分子质量；采用高效液相色谱-紫外检测器（HPLC-PDA）法对黄精多糖的单糖组成进行测定分析。结果 黄精炆制后，总多糖含量下降约60%；游离糖中蔗糖含量降低35%，果糖含量升高22倍，葡萄糖含量升高4.4倍；炆制后相对分子质量2个峰均降低1～5倍；黄精炆制前后多糖均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，生黄精单糖组成物质的量比为甘露糖-鼠李糖-葡萄糖-半乳糖-阿拉伯糖（10∶6∶25∶7∶1）；炆制后物质的量比为7∶5∶1.7∶14∶1。结论 炆法炮制对黄精糖类成分影响较大，炆制后多糖发生水解及结构发生改变，从而使黄精麻舌感消失，药效增强。     

柱前衍生化HPLC法建立苦豆子多糖特征图谱的研究

[目的]建立苦豆子多糖特征图谱。[方法]采用1-苯基-3-甲基本5-吡唑酮(PMP)柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法对苦豆子多糖进行单糖组成分析。[结果]苦豆子多糖特征图谱由7个共有峰组成,为甘露糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖以及1个未鉴定出的单糖。[结论]柱前衍生化HPLC法建立多糖的特征图谱操作简便、准确、重复性良好,为苦豆子多糖的质量评价提供了依据。     

不同产地和不同品种枸杞子中多糖成分测定

目的 通过比较19批不同产地宁夏枸杞果实和3批北方枸杞果实的总糖含量、重均相对分子质量（M_w）及单糖组成,探索枸杞中多糖成分的差异性。方法 采用水提醇沉法获得22批枸杞的粗多糖成分,以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;Shodex SB-806 HQ型凝胶柱和Shodex SB-804 HQ型凝胶柱串联,流动相为0.1%氯化钠溶液,柱温为40 ℃,柱流速为0.5 mL·min^–1,采用凝胶渗透色谱-示差检测器-多角度激光光散射法（GPC-RI-MALLS）测定M_w及分布系数;选择Zorbax Eclipse XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液,柱温为35 ℃,流速为1.0 mL·min^–1,检测波长为250 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化-高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（HPLC-PDA）测定单糖组成,同时建立单糖组成指纹图谱。结果 22批枸杞样品中粗多糖成分的质量分数为3.24%~8.66%,M_w为0.733×10⁶~3.191×10⁶;多糖成分均由9种单糖组成,其中阿拉伯糖含量最高。结果显示,不同产地宁夏枸杞粗多糖结构较为一致,但北方枸杞中多糖成分在结构上与宁夏枸杞存在较明显差异,主要体现在M_w、色谱峰面积比及半乳糖醛酸含量上。结论 宁夏枸杞和北方枸杞的粗多糖成分在结构上有较大差异,且通过建立的单糖组成及M_w测定方法可以对其进行有效区分,可为枸杞质量标准完善及枸杞资源评价提供方法和思路。     

竹茹中苜蓿素对照品的高效液相半制备色谱制备研究

目的建立高效液相半制备色谱制备竹茹中苜蓿素对照品的方法。方法竹茹用50%乙醇提取,浓缩成浸膏,随后上聚酰胺柱色谱,采用70%乙醇柱色谱洗脱物进行HPLC分离制备。半制备色谱条件:色谱柱为Luna C18ODS(250 mm×10mm,10μm),流动相为乙腈-1%甲酸水溶液(35∶65);体积流量4 mL/min;进样量1 mL;检测波长345 nm。结果该法所得化合物用HPLC归一化法定量,质量分数大于98%,根据波谱学数据鉴定化合物为苜蓿素。结论建立的方法简便,所得苜蓿素纯度高,可作为分析方法的对照品。     

毛细管区带电泳法测定不同虫草菌粉制剂中多糖的单糖组成

目的采用毛细管区带电泳法(CZE)测定不同虫草菌粉制剂中多糖的单糖组成。方法设计正交试验优化制剂中所提取多糖的全降解条件;以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为衍生试剂,采用CZE法测定其单糖组成;电泳条件:未涂层弹性石英毛细管柱(70 cm×50μm,有效长度61 cm);运行缓冲液为40 mmol/L硼砂缓冲液(pH 10.1);检测波长245nm;运行电压13 kV;重力进样(10 cm×8 s)。结果多糖全降解的最优条件为硫酸浓度1.0 mol/L,温度100℃,时间5 h;心肝宝胶囊、百令胶囊、至灵菌丝胶囊和金水宝胶囊的多糖中均含有木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖4种单糖,但含量各有差异;4种制剂中多糖的单糖组成与冬虫夏草多糖中的单糖组成基本一致,且检测出了冬虫夏草中未见报道的木糖、鼠李糖和葡萄糖醛酸等单糖。对所建立的CZE法进行方法学验证,结果显示各单糖在0.01～0.20mg/m L线性关系良好,检测限0.205～0.397μg/m L,定量限0.684～1.323μg/m L,精密度RSD为0.8%～3.6%,重复性RSD为2.7%～4.7%,稳定性RSD为2.8%～4.7%。葡萄糖和半乳糖的平均回收率分别为96.1%～99.8%和95.1%～99.6%,其RSD分别为1.0%～2.0%和1.5%～1.9%。结论该方法快速高效,为虫草菌粉制剂质量标准的完善和虫草菌粉替代冬虫夏草的深入研究提供参考。     

我国鸡血藤属和崖豆藤属药用植物的研究现状及比较

鸡血藤属与崖豆藤属系豆科多年生藤本植物,物种多、分布广,既可药用又可杀虫,还可用于观赏。随着对鸡血藤的需求量不断增加,野生药材蕴藏量濒临枯竭,造成市场上鸡血藤混用品和代用品不断增多,使鸡血藤药材的基原研究较为迫切。经查阅相关资料发现,目前鸡血藤药材主要以密花豆属、鸡血藤属与崖豆藤属三属存在,而鸡血藤属又是由崖豆藤属分出,这两属经历多次分与合的过程,现《中国植物志》官方网站接受将二者修订为两属。笔者拟对这两属药用植物的化学成分和药效作用等进行比较,旨在探索鸡血藤属与崖豆藤属的异同点,以确定从崖豆藤属分出鸡血藤属的合理性与必要性。通过比较后发现,这两属化学成分和药效作用各有不同,支持鸡血藤属从崖豆藤属分出,不建议混用。