血管内皮生长因子在早产儿视网膜病变动物模型中的表达

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)、视网膜新生血管形成中的表达规律.方法:①动物模型制作:将生后7d的健康C57BL/6 J小鼠20只随机分为正常对照组和高氧组,每组10只.正常对照组于正常空气环境中饲养,不做任何处理;高氧组将生后7d小鼠连续放氧箱5d后回到正常空气环境中饲养.两组小鼠均在出生后17 d处死,摘取右眼制作标本,采用HE染色计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目来判断ROP模型的制做是否成功.②将生后7d的健康C57BL/6 J小鼠64只随机分为正常对照组和高氧组,每组32只,两组均分别于生后12、14、17、19 d各处死8只,摘取右眼制作标本,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子蛋白的表达情况.结果:①HE染色:正常对照组切片中突破视网膜内界膜长入玻璃体的血管内皮细胞核数平均为(1.71±0.472),高氧组突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数为(25.56±2.442),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).②免疫组织化学法见VEGF的表达主要位于视网膜内界膜附近,神经节细胞层,内核层.高氧组视网膜中VEGF的表达12 d最低,14 d已增高,17 d时达到高峰,19 d下降,对照组12～19 d波动不明显.结论:①本实验采用的高氧诱导小鼠视网膜新生血管模型与早产儿视网膜病变发病原因相似,可重复性高,可进行定量研究,是研究ROP比较理想的动物模型.②VEGF在早产儿视网膜病变模型中的形成过程中,早期高氧使VEGF下调,引起血管退化,而随后的缺氧又使VEGF上调,导致视网膜新生血管形成.因此,VEGF的异常表达,是视网膜新生血管形成的主要原因.     

曲安奈德抑制早产儿视网膜病变视网膜新生血管的实验研究

目的:早产儿视网膜病变(Retinopathy of prematurity,ROP)是一种严重影响早产儿生存质量的疾病,目前对ROP的防治研究着重于抑制视网膜新生血管的形成,本实验通过建立高氧诱导的早产儿视网膜病变的动物模型,探讨长效糖皮质激素类药物曲安奈德在抑制视网膜新生血管方面的作用。方法:选择鼠龄为7 d的C57 BL/6 J幼鼠60只,分为大、小剂量治疗组和正常及高氧对照组。大、小剂量治疗组一眼玻璃体腔内分别注射曲安奈德5μl及2.5μl,对侧眼注射相同体积的平衡盐溶液(BSS)作为对照。血管灌注法视网膜铺片,观察视网膜血管情况;视网膜组织切片HE染色观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目。结果:高氧环境对照组与正常环境对照组相比,视网膜有大量新生血管形成,说明高氧诱导的早产儿视网膜病变动物模型制作成功;药物治疗组与高氧对照组相比视网膜血管分布规则、密度减少,且突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目明显减少(P<0.001)。大、小剂量治疗组相比差异不明显(P>0.05),视网膜组织切片未见视网膜毒性及炎症反应。结论:曲安奈德有抑制视网膜新生血管形成的作用。     

早产儿视网膜病变发病机制和治疗进展

早产儿视网膜病变(ROP)是一种潜在的致盲性疾病,尽管及时的治疗,仍有许多患儿发展为视网膜脱离和视力丧失。目前较为有效的治疗方法是激光治疗,但激光治疗可破坏视网膜组织,导致视野缺损。目前针对眼部新生血管疾病投入了大量的研究,通过对血管生成相关因子的研究以寻找可能的方法抗新生血管生成,阻止ROP的发展。其中一些新的治疗干预措施已经进入临床试验阶段。     

氧诱导视网膜病变小鼠模型的研究进展

视网膜新生血管性疾病是一类严重的致盲性疾病,构建与之相关的动物模型是进行该疾病机制研究的重要基础,有利于在临床中更好地预防、诊断和治疗.氧诱导视网膜病变小鼠模型是目前研究视网膜新生血管性疾病最常用的动物模型,此模型构建过程与人类早产儿视网膜新生血管病变的发生、发展极为相似,具有制作方法简单、重复性好等优点.本文重点阐述氧诱导视网膜病变小鼠模型的构建方法及原理,模型相关细胞因子的作用,模型构建的影响因素如动物品种、氧气的百分含量、高氧对母鼠的影响、产后体质量增加量、光照暴露等,并简要介绍模型中常用的量化评估方法,为研究人员准确、有效地构建和评估氧诱导视网膜病变小鼠模型提供帮助.     

增生性糖尿病视网膜病变玻璃体切除物中MMP-2和MMP-9的表达

目的:检测增生性糖尿病视网膜病变(PDR)玻璃体切除物中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨2者在PDR发生发展中的作用.方法:使用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和放射免疫方法分别检测20例PDR和10例正常对照玻璃体切除物中MMP-2、MMP-9 mRNA的表达与MMP-2、MMP-9的含量.结果:PDR玻璃体切除物中MMP-2、MMP-9 mRNA与MMP-2、MMP-9的含量均高于正常对照(P＜0.05).结论:MMP-2和MMP-9可能在PDR的发生、发展中起重要作用.     

早产儿视网膜病变研究近况

早产儿视网膜病变(ROP)是一种增殖性视网膜病变,是世界范围内儿童致盲的主要原因,本文阐述了ROP的发病机制、危险因素、诊断、治疗及近年新进展.     

血管内皮生长因子mRNA在早产儿视网膜病变模型中的表达及其意义

目的:探讨高氧诱导视网膜病变(OIR)动物模型的建立及动物模型血管内皮生长因子(VEGF)基因的调节变化规律,阐明VEGFmRNA在早产儿视网膜病变模型中的表达及其意义。方法:①将10只7日龄C57BL/6J幼鼠暴露在(75±2)%浓度的高氧状态下5 d,随后在正常氧环境下5 d,作为氧诱导模型组;采用同日龄幼鼠10只作为正常对照组,空气中饲养。分别在出生后第17 d处死幼鼠。视网膜切片HE染色,观察并计数细胞核数目。②将24只7日龄幼鼠作为实验组,分为3个小组。采用同日龄的幼鼠24只作为正常对照组,同样的方法饲养,分别在出生后第12、14、17 d处死幼鼠,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组VEGFmRNA的变化。结果:①视网膜切片苏木精-伊红(HE)染色法行血管内皮细胞核计数,可见正常组仅在少数切片中见到突破内界膜的血管内皮细胞核,平均每张切片数(0.390±0.099)个;高氧组可见到较多的新生血管芽及突破内界膜的血管内皮细胞核,每张切片突破内界膜的血管内皮细胞核个数平均为(33.590±1.462),差异有统计学意义(P<0.05)。②RT-PCR结果显示,吸氧组新生小鼠第12 d OIR模型组视网膜表达VEGmRNA水平(0.295±0.038)较正常组(0.344±0.047)下降,P<0.05;第14 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平(0.762±0.063)较正常组(0.335±0.032)增高,P<0.05;第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平(0.678±0.046)较正常组(0.318±0.044)增高,P<0.05。③第14 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA水平较第12 d明显升高,P<0.05;第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA较第14 d下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。第17 d OIR模型组视网膜表达VEGFmRNA较第12 d升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。④正常组第12 d、第14 d、第17 d视网膜表达VEGFmRNA水平逐渐下降,经检验差异无统计学意义。结论:①新生C57BL/6J小鼠动物模型制作周期比较短,成功率比较高,是研究视网膜病变的较合适模型。②苏木精-伊红染色可明显显示视网膜突破内界膜的血管内皮细胞核数,且造模组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。③不同时间点,OIR模型组与正常组以及各OIR模型组之间,VEGFmRNA的表达均有显著性差异(P<0.05),高氧环境抑制VEGFmR-NA的表达,而高氧后的相对低氧可促进VEGFmRNA的表达。④推断在小鼠出高氧箱当天这个时间点,给予抗VEGF治疗,有可能在一定程度上减少早产儿视网膜病变的发生。     

COX-2通过PI3K/Akt通路调节氧诱导视网膜病变模型中视网膜新生血管的形成

目的 探讨环氧化酶-2(COX-2)调节氧诱导视网膜病变(OIR)模型中视网膜新生血管形成的信号转导机制.方法 将乳鼠随机分为正常对照组、OIR模型组以及COX-2选择性抑制剂NS-398组(每组18只乳鼠).正常对照组小鼠生长于正常空气氧浓度(21%),OIR模型组和NS-398组小鼠于出生后第7天放置于高浓度氧环境(75%)生长,第12天调整氧浓度为正常.NS-398组小鼠于出生后第12～17天每日腹腔注射10 mg/kg NS-398.于第17天,获取3组视网膜标本,采用常规病理学检查在光镜下观察视网膜新生血管的变化;应用免疫组织化学法、Real-time PCR以及West-ern blot技术检测视网膜组织中COX-2、VEGF和PI3K/Akt的表达.结果 正常对照组病理切片未见视网膜新生血管形成,OIR模型组和NS-398组均出现与内界膜相连的新生血管,以OIR模型组为甚.COX-2、VEGF和PI3K/Akt在正常对照组均存在一定表达,在OIR模型组呈强表达,在NS-398组的表达明显低于OIR组,但仍高于正常对照组.3组间COX-2、VEGF的吸光度值、mRNA和蛋白相对量及PI3K/Akt的蛋白相对量两两比较,差异均有显著性意义(均P<0.05).结论 COX-2表达受到抑制后通过下调VEGF的表达减少OIR模型中的视网膜新生血管形成,在此过程中涉及到PI3K/Akt信号通路的作用.     

早产儿视网膜病变

早产儿视网膜病变(Reti no Pathy of Prematurity，RoP)是影响未成熟婴儿视网膜血管的一种病变，表现为视网膜缺血，新生血管形成和增殖性视网膜病变，重症者可引起视网膜脱离导致失明。以往传统称为晶体后纤维增生症(Retrolental Fibrop lasia)，这一名称只概括了本病的晚期病变，不能包括本病急性期的表现。该病于1942年首先由Terry报告。1951年Campbe儿发现与患儿大量吸氧有关。     

早产儿视网膜病变

目的评价早产儿视网膜病变发病高危因素.方法对我院2003年9月～2005年12月产科接生的1365例新生儿进行广泛普查,其中205例早产儿均进行眼底检查及早产儿视网膜病变风险评估.结果确诊早产儿视网膜病变患儿31例.结论孕龄小于32w;出生体重小于2000g;多胎儿;吸氧浓度大于40%的早产低出生体重儿均是早产儿视网膜病变的高危因素.     

子宫内膜异位症中MMP-2、MMP-9表达的研究

目的研究MMP-2和MMP-9在子宫内膜异位症发生中的作用。方法采用免疫组化方法研究25例子宫内膜异位症患者的病理组织和22例正常子宫内膜组织中的MMP-2和MMP-9蛋白的表达情况。结果子宫内膜异位症组中的MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显高于对照组(P分别小于0.01和O.05)。结论MMP-2和MMP-9在子宫内膜异位症的发生发展中起一定的作用。     

Pro MMP-2和 MMP-2在大鼠脑梗塞模型中的表达

摘要目的：探讨Pro MMP-2和MMP-2在大鼠脑梗塞模型中的表达。方法：以线栓法制备大鼠脑梗塞模型并用酶谱法检测病灶中Pro MMP-2和MMP-2。结果：聚丙烯酰胺凝胶电泳显示Pro MMP-2进行性增高，MMP-2于2天后开始升高并于第5天达到高峰，第7天呈下降趋势。结论：Pro MMP一2和MMP-2在脑梗塞中表达增加。     

丹芍颗粒对体外培养大鼠系膜细胞MMP-2、MMP-9表达的影响

目的：研究丹芍颗粒含药血清对大鼠系膜细胞增殖抑制作用及MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响,从细胞因子、基因表达及其调控的角度探讨丹芍颗粒治疗紫癜性肾炎的作用机理。方法：采用CCK-8法观察含药血清对HBEH的增殖抑制率,RT-PCR法检测系膜细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平。结果：不同浓度的丹芍颗粒血清对细胞增值影响不同;经LPS诱导HBEH细胞增殖后MMP-2、MMP-9 mRNA表达量明显升高（与正常组比较,P〈0.05）,而丹芍高剂量组、丹芍低剂量组、生理盐水对照组MMP-2、MMP-9 mRNA表达量与LPS组比较均降低（与LPS组比较P〈0.01）。结论：丹芍颗粒含药血清具有抑制大鼠系膜细胞增生的作用,能够下调经LPS诱导HBEH细胞增殖后MMP-2、MMP-9 mRNA的表达水平,可能是其发挥作用的主要机制之一。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮肤癌中的表达

目的 探讨金属基质蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1在非黑色素性皮肤癌中的表达.方法 取皮肤癌手术切除标本40份,进行免疫组化检测MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1的表达.结果 MMP-2、MMP-9在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著高于正常皮肤.TIMP-2、TIMP-1在非黑色素皮肤癌中的表达的阳性率、染色强度、表达强度均显著低于正常皮肤.结论 基质金属蛋白酶（MMP）在非黑色素性皮肤癌中呈高表达,基质金属蛋白酶组织抑制因子呈低表达,两者比例失衡与皮肤癌的浸润和转移有关.     

基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9在肺组织损伤修复中的表达

目的观察MMP-2和MMP-9在肺组织损伤修复过程中的表达和变化规律,并探讨它们在肺组织损伤修复中作用的分子机制和意义。方法20只Wister大白鼠,随机分为一个正常组和臭氧攻击损伤后不同时间的实验组,制作大鼠肺损伤模型。应用免疫组化法和图像分析技术观察各组MMP-2及MMP-9蛋白表达的强度。结果成功复制大鼠肺组织损伤动物模型;实验观察表明,MMP-2、MMP-9蛋白表达在正常肺组织为弱阳性,在肺组织损伤时,表达上调,且随着肺组织损伤修复行进而先逐渐增强(<0.05),继而逐渐减弱(<0.05),当肺组织损伤修复达正常时,MMP-2、MMP-9表达恢复到正常水平(>0.05)。结论MMP-2、MMP-9的高表达与肺组织损伤密切相关。     

MMP-2、MMP-9及肿瘤抑制基因FHIT在口腔鳞癌组织中的表达

目的:探讨口腔鳞癌中MMP-2、MMP-9及肿瘤抑制基因FHIT的表达及其相关性。方法:应用SP免疫组化法检测70例口腔癌、10例口腔黏膜白斑及15例正常口腔黏膜的MMP-2、MMP-9及FHIT蛋白表达。结果:①MMP-2、MMP-9阳性表达率:口腔鳞癌中分别为64.29%、85.71%,均显著高于黏膜白斑中表达率及正常口腔黏膜中表达率(P<0.05);伴淋巴结转移的口腔癌组分别为75.00%、100%,高于未转移组(P<0.05)。T3、T4期MMP-9的表达高于T1、T2期(P<0.05)。②FHIT在口腔鳞癌组高表达率为40.00%,显著低于口腔黏膜白斑组及正常口腔上皮组(P<0.05)。③口腔鳞癌中MMP-2与MMP-9表达呈正相关,二者分别与FHIT表达呈负相关。结论:MMP-2、MMP-9表达增强及FHIT表达减弱与口腔癌的发生、发展相关,对口腔鳞癌的浸润转移起促进作用且相互协同,是口腔鳞癌侵袭的重要标志物。     

食管鳞癌中MMP-2TIMP-2的表达及意义

目的：研究基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在食管鳞癌中的表达及其相关性,并探讨其在食管鳞癌进展过程中的意义。方法：应用免疫组化法研究50例食管鳞癌组织和20例食管正常粘膜中MMP-2、TIMP-2的表达情况,分析其表达结果与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤组织分化程度、浸润程度、淋巴结转移及TNM分期间的关系。结果：MMP-2、TIMP-2在食管鳞癌中的表达明显高于食管正常粘膜中的表达,两者比较有显著性差异（P〈0．01）。MMP-2、TIMP-2在食管鳞癌的表达与浸润深度、有无淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0．05）,与患者的年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度无关（P〉0．05）。MMP-2和TIMP-2相关系数r=0．5l;P〈0．01,表明他们之间有明显相关性。结论：食管鳞癌组织中MMP-2、TIMP-2的高表达在食管鳞癌的发生发展过程中起到重要作用,同时MMP-2、TIMP-2与食管鳞癌浸润生长及远处播散有关。     

Ki-67、MMP-7、MMP-2在宫颈CIN和宫颈癌中的表达及意义

目的:检测Ki-67、MMP-7、MMP-2在宫颈CIN及宫颈癌中的表达情况,探讨Ki-67、MMP-7、MMP-2与宫颈癌的发生、发展,增殖和侵袭转移之间的关系.方法:采用免疫组化S-P法和图像分析技术检测Ki-67、MMP-7、MMP-2在已确诊的50例宫颈癌(Invasive cervical cancer,ICC)、23例宫颈上皮内瘤样变(Cervical intraepithelial neoplasm,CIN)和正常官颈(Normal cervical epithelium,NCE)对照20例的表达情况.结果:50例宫颈癌中ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为72.00%、78.00%、76.00%;CIN组ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为47.83%、60.87%、56.52%;正常对照组ki-67、MMP-7、MMP-2的阳性表达分别为10、0、0;Ki-67在子宫颈癌组和CIN组明显高于正常官颈上皮组,在腺癌中的表达高于鳞癌(P<0.05),在CIN Ⅰ和CIN Ⅱ、CIN Ⅲ中表达无明显差异,在低分化癌的表达明显高于高分化癌(P<0.05),在淋巴结转移组中的表达明显高于非淋巴结转移组(P<0.05);MMP-7、MMP-2在宫颈癌组织中的表达水平高于CIN及正常宫颈组织(P<0.01),MMP-7、MMP-2的表达与宫颈癌的病理类型及分化无关,在淋巴结转移组中表达高于非淋巴转移组.结论:Ki-67、MMP-2、MMP-7与宫颈癌肿瘤细胞的侵袭转移行为相关.     

RECK、MMP-2在葡萄胎组织中的表达及其意义

目的 探讨RECK、基质金属蛋白酶 2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在葡萄胎组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化Elivision法检测24例恶性葡萄胎(恶性葡萄胎组)、24例无恶性葡萄胎(无恶性葡萄胎组)和20例正常早孕绒毛(正常对照组)组织标本中RECK及MMP-2的表达.结果 从正常对照组→无恶性葡萄胎→恶性葡萄胎组RECK阳性表达率呈下降的趋势.恶性葡萄胎组RECK阳性表达率与正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05).而从正常绒毛→无恶性葡萄胎→恶性葡萄胎MMP-2阳性表达率呈上升的趋势.恶性葡萄胎组、无恶性葡萄胎组MMP-2阳性表达率与正常对照组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05),恶性葡萄胎组MMP-2阳性表达率与无恶性葡萄胎组比较差异有统计学意义(P＜0.05).恶性葡萄胎组、无恶性葡萄胎组RECK阴性(-)/MMP-2阳性(+-)表达率分别为4.2%、41.7%,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).相关性分析结果显示,RECK表达与 MMP-2表达呈负相关(r=-0.349,P＜0.05).结论 RECK、MMP-2的失衡在葡萄胎的恶变中起一定的作用.RECK和MMP-2两者联合检测对早期诊断葡萄胎的恶变有重要的意义.