HPLC-荧光检测法测定枸杞子和五子衍宗丸中东莨菪内酯的含量

目的采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定枸杞子和五子衍宗丸中东莨菪内酯的含量。方法色谱条件:色谱柱为Agilent Extend-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸(18∶82);流速为1.0 m L·min?1;柱温30℃;荧光检测器激发波长343 nm,发射波长458 nm。结果东莨菪内酯在41.63~2 082 pg内线性关系良好(r=1),回归方程Y=44 095X–44 660,在枸杞子药材中平均回收率为101.1%,RSD为2.2%(n=9),在五子衍宗丸中平均回收率为102.6%,RSD为1.1%(n=9)。宁夏产的枸杞子东莨菪内酯含量高于其他产地。结论该方法快速、简便、灵敏,专属性、重复性良好,有助于评价枸杞子的道地性以及初步区分样品的来源,适用于枸杞子药材和五子衍宗丸中君药枸杞子的质量控制与评价。     

杜冷丁和东莨菪硷联合使用对产程的影响

如何缩短产程,减少围产儿死亡,是急待解决的问题。现将我们对115例头位初产、足月妊娠的产妇使用杜冷丁和东莨菪硷的效果,报告如下。临床资料我院于1990年1月～1990年12月,为缩短产程,对头位初产、足月妊娠的产妇,按住院顺序随机分为二组。其中115例应用杜冷丁和东莨菪硷为用药组,年龄21～34岁,妊娠37～42~(-1)周110例,≥42周5例。在第一产程中用杜冷丁100mg 加东莨菪硷0.3mg 肌肉注射。用药时宫     

莨菪类药物对大鼠胃粘膜损伤的影响

本文观察了莨菪类药物(东茛菪碱、樟柳碱、山茛菪碱)对大鼠三种实验性胃溃疡的影响,并对其作用机制进行了初步的探讨。结果表明:莨菪类药物有对抗大鼠应激性胃溃疡、药物性胃溃疡及慢性胃溃疡的作用,且有量效依赖关系;对胃液和血液等各项生化指标分析表明,这类药物有抑制胃酸分泌、降低胃蛋白酶活性、增强胃粘液屏障,提高血清胃泌素浓度的作用。提示这些结果可能与其抗溃疡效应有关。     

黄芪多糖对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芪多糖对前列腺癌细胞株PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法分别用浓度为0.5、1、2.5、5、10 mg/ml的黄芪多糖(APS)干预PC3细胞12、24、36 h后,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS对PC3细胞增殖的量效和时效关系;台盼蓝染色法测定细胞生长曲线;APS干预24 h后流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 APS能抑制PC3细胞的增殖,呈时间与浓度依赖性,不同浓度APS组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。APS干预PC3细胞24 h后,对照组细胞凋亡率为5.01%,1 mg/ml和5 mg/ml的APS培养24 h细胞凋亡率分别为14.46%和27.71%,较对照组明显增加,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论APS能够抑制前列腺癌细胞株PC3细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

良性前列腺增生治疗药物对前列腺细胞增殖与凋亡的影响

前列腺细胞的增殖和凋亡受多种因素调节 ,细胞增殖率上调和细胞凋亡率下调是良性前列腺增生的重要原因。此文简要介绍良性前列腺增生治疗药物的一般作用机制 ,对它们诱导前列腺细胞凋亡和抑制前列腺细胞异常增殖的分子机制进行了综述     

二乙基二硫代氨基甲酸钠对人肝癌细胞增殖、再分化与凋亡的作用

目的:测定二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)对人肝癌细胞增殖、再分化与凋亡的作用。方法:采用细胞表面电荷、生化变化、软琼脂细胞生长、单细胞电泳、电子超微结构和流式细胞DNA片断分析等 指标测定细胞分化和凋亡。结果:用DDC 3mmol/L处理后,肝癌细胞的生长和分裂指数显著下降,增殖抑制率达52.4％。与恶化有关的指标显著减轻,如细胞表面电荷明显降低,电泳率从1.6降低到0.8μm·s~(-1)·V~(-1)·cm~(-1),甲胎蛋白由314降为95μg/g(protein),γ-谷氨酰转氨酶活性由0.9降到0.14U/g(protein)。与分化相关的酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶活性显著上升,由11.6升高到36μmol/g(protein),细胞克隆形成力降低95.6％。同时,处理细胞出现了凋亡小体、不贴壁细胞以及其它凋亡特征,且处理细胞DNA发生片断化,流式细胞分析显示处理组42.9％的DNA发生断裂。结论:DDC能够抑制人肝癌细胞增殖,并诱导细胞分化和凋亡。     

姜黄素对Saos-2细胞增殖和凋亡的影响

目的观察姜黄素对人骨肉瘤细胞系Saos-2增殖和凋亡的影响及其对Fas蛋白表达的调控。方法体外培养人骨肉瘤细胞系Saos-2,MTT法检测不同浓度姜黄素对骨肉瘤细胞系Saos-2的生长抑制作用,Annexin V/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色,显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化,Western blot法检测Saos-2细胞Fas蛋白表达情况。结果 MTT检测显示姜黄素可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性,在姜黄素浓度为20μmol·L-1时,对细胞生长的抑制作用明显增强;流式细胞检测显示姜黄素可明显诱导骨肉瘤细胞凋亡;Hoechst33258染色可见凋亡小体;Western blot分析显示经姜黄素作用后的骨肉瘤细胞系Saos-2表达Fas较用药前明显增强。结论姜黄素对骨肉瘤细胞系Saos-2的增殖有抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其可能通过上调Fas的表达,启动细胞凋亡程序,发挥其抗肿瘤作用。     

莨菪类药对家兔心肌细胞膜Na-K-ATP酶活性的影响

在家兔心肌细胞膜Na-K-ATPase各测定管中加入不同稀释度的阿托品(0.4mg/ml),东莨菪硷(0.6mg/ml)及樟柳硷(0.6mg/ml)后,最终稀释度为10°～10~(-2)。其释放Pi与对照管的差额,10°～10~(-1)稀释度时,加哇巴因管和不加哇巴因管的代数和均为正值。说明三种莨菪类药对Na-K-ATPase均有兴奋作用。     

臀果木提取物对前列腺组织细胞凋亡的诱导作用

臀果木提取物可诱导大鼠前列腺组织细胞凋亡。用该提取物处理大鼠,４ｄ,９ｄ和１４ｄ后取前列腺,用ＨＥ染色观察细胞形态变化,ＤＮＡ凝胶电泳和流式细胞术（ＦＣＭ）定性、定量ＤＮＡ的降解及凋亡率。结果前列腺组织出现表皮细胞萎缩;ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳出现“梯形”条带;细胞凋亡率背前叶、背侧叶和腹叶分别为０．６７％,３．４２％和６．４９（４ｄ）,０．３２％,７．２５％和１０．１２％（９ｄ）,０．７７％,５．４     

二十二碳六烯酸对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察二十二碳六烯酸(DHA)对人胰腺癌细胞株生长的抑制作用.方法 将DHA与胰腺癌细胞混合培养,采用MTT、流式细胞技术分析细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2含量.结果 50μg/ml DHA作用人胰腺癌细胞株后,Patu8988、SW1990增殖率24 h为(46.89±5.99)、(46.03±7.69),48 h为(35.92±2.91)、(25.70±5.60),肿瘤细胞增殖受到明显抑制(P<0.01).同时细胞凋亡率明显升高,效应呈现时间-剂量依赖关系,72 h后Patu8988、SW1990凋亡率分别为53.2%、13.7.G0～G1期细胞比例增高,S期细胞比例下降.DHA作用24 h后,Patu8988、SW1990 Bcl-2蛋白表达率明显低于对照组(P<0.05).结论 DHA能抑制胰腺癌细胞增殖,并通过下调Bcl-2在细胞中表达来诱导胰腺癌细胞凋亡.     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

金喜素抑制JM细胞增殖并诱导其凋亡的流式细胞术分析

金喜素(topotecan,TPT)为喜树碱类化疗药物,可以选择性地抑制拓扑异构酶I(Topoisomerase I,Topo I)[1].以往的研究表明,该药物可以用于慢性粒单细胞白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)和实体瘤[2～4]等的治疗.T淋巴细胞白血病在临床上多见于儿童,起病急,病情重,严重危害患儿的健康.JM为急性T淋巴母细胞白血病细胞株[5].金喜素对JM细胞株作用的研究未见文献报道.本研究旨在观察金喜素对JM细胞株增殖的抑制作用及其诱导该细胞株发生凋亡的作用.     

特异性阻断Shh信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的:研究Sonic Hedgehog(Shh)信号通路对胃癌细胞系SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法:用四唑蓝(MTT)比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopamine对胃癌细胞系SGC-7901增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)。结果:Cyclopamine对SGC-7901细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性;Cyclopamine作用后使胃癌细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加。结论:Shh信号分子对胃癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胃癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。     

Effects of GM-CSF, IL-3, and GM-CSG/IL-3 fusion protein on apoptosis of human myeloid leukemic cell line Tf-1 induced by irradiation

AIM: To observe the effects of three cytokines on the apoptosis of Tf-1 cells induced by y irradiation and investigate the relationship between apoptosis and caspase-3 activity. METHODS: Different cytokines GM-CSF, IL-3 and GM-CS/IL-3 fusion protein were added into the irradiated Tf-1 cells. MTT assay, morphology, flow cytometry, and DNA fragmentation assay were used to observe the effects of cytokines on apoptosis. The caspase-3 activity was determined with a fluorocytometer. RESULTS: Irradiated Tf-1 cells showed typical morphological characteristic of apoptosis demonstrated by transmission electron microscopy and were accumulated in G0/G1 phase. In the groups treated with growth factors after irradiation, three cytokines significantly increased the viability rate, distinctly decreased the apoptosis rate and the proportion of DNA fragmentation. When Tf-1 cells were irradiated by y     

肝素和阿霉素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖与凋亡的协同作用

目的:观察肝素联合阿霉素对人鼻咽癌细胞的=增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制.方法:用MTT法、流式细胞术观察肝素联合阿霉素对人鼻咽癌细胞增殖及细胞周期的影响;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westem blot等方法观察肝素与阿霉素联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用.结果:肝素与阿霉素联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强作用,同阿霉素单独应用于诱导细胞凋亡相比,低剂量的肝素与阿霉素联合应用后发现:TUNEL阳性细胞从12.6％±1.1％增加到65.7％±1.3％;G_0/G_1期细胞阻止,S期细胞明显减少,DNA“梯形”变化更加明显;Bax/Bcl-2的比率及p~(53)和p~(21)基因的表达明显升高.结论:肝素与阿霉素对人鼻咽癌细胞在抗增殖及促凋亡方面有协同作用,这可能与Bax/Bcx-2比率的升高及p~(53)和p~(21)的表达上调有关.     

双炔失碳酯、屈洛昔芬、诺美孕酮及米非司酮对离体培养大鼠黄体细胞凋亡的影响(英文)

目的:研究双炔失碳酯、屈洛昔芬、诺美孕酮和米非司酮是否可诱导离体培养的大鼠黄体细胞凋亡,方法:离体培养的大鼠黄体细胞经各种药物作用后HE染色,观察其形态学变化,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳,流式细胞仪定量分析凋亡细胞数,结果:四种药物均降低细胞存活率,屈洛昔芬诱导细胞凋亡,其它三种药物引起细胞坏死.细胞经屈洛昔芬作用后发生DNA断裂,电泳后显示典型的“DNA ladder",屈洛昔芬1.25,2.5或3.75 mg·L~(-1)分别引起15.4％,75.4％或90.5％的细胞凋亡,结论:屈洛昔芬诱导离体培养的大鼠黄体细胞凋亡,而双炔失碳酯、诺美孕酮和米非司酮诱导细胞坏死。     

表没食子儿茶素没食子酸酯调控食管癌细胞线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用研究

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)调控食管癌细胞Ec9706线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用.方法 不同浓度(100、200、300 mg/L) EGCG作用Ec9706细胞24 h后,Annexin V/PI双标流式细胞术方法检测细胞凋亡水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位;Western Blot方法检测细胞中Caspase-3蛋白表达水平,0.9％氯化钠溶液代替EGCG作为对照组.结果 100、200、300 mg/L EGCG作用Ec9706细胞24 h后,与对照组相比Ec9706细胞凋亡率显著增高(P＜0.01),300 mg/L EGCG组细胞凋亡率显著高于100、200 mg/L EGCG组(P＜0.01).EGCG可显著降低细胞线粒体膜电位(P＜0.01),且具有剂量依赖性.western-blot结果显示,EGCG组与对照组相比Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P＜0.05).结论 EGCG具有诱导食管癌Ec9706细胞凋亡作用,其作用机制可能与调控线粒体膜电位引起内源性细胞凋亡有关.     

苯丙素苷类抗氧化剂异毛蕊花苷对人胃癌细胞生长和分化的影响

目的：探讨苯丙素苷类抗氧化剂异毛蕊花苷对人胃癌MGC 803细胞生长和分化的影响。方法：以1．5％二甲基亚砜为阳性对照,采用细胞计数、肿瘤形成率实验、酶活性测试、流式细胞仪分析和Western blot等方法分别评价异毛蕊花苷对MGC 803细胞生长、致瘤性、碱性磷酸酶（ALP）及乳酸脱氢酶（LDH）活性、细胞周期和周期相关基因表达的影响。结果：MC 803细胞经异毛蕊花苷处理后,细胞生长和增殖呈浓度和时间依赖性抑制;异毛蕊花苷20μmol/L可使细胞致瘤性明显受抑,胃癌细胞分化标志酶ALP和LDH活性均呈时间依赖性下降,细胞周期表现为G0／G1期阻滞,G1→S期调控点相关蛋白p53、p21/WAF1和p16/INK4表达上调,C－myc蛋白表达受抑。结论：异毛蕊花苷可明显抑制MGC 803细胞生长及逆转胃癌细胞恶性表型进而诱导分化,这可能与细胞周期G0／G1期阻滞及其对周期相关基因表达的调控作用有关。     

Securinine induced apoptosis in human leukemia HL 60 cells 1

目的：研究一叶秋碱能否诱导ＨＬ６０细胞凋亡．方法：用ＭＴＴ法检测一叶秋碱对细胞增殖影响;应用流式细胞仪检测凋亡细胞数;采用琼脂糖凝胶电泳法观测ＤＮＡ碎片;透射电镜观察凋亡的形态改变．结果：一叶秋碱５－８０ｍｇ·Ｌ－１能诱导ＨＬ６０细胞凋亡．电镜观察到典型的凋亡形态学改变,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到凋亡率随剂量的增高而升高．ＭＴＴ法示一叶秋碱抑制ＨＬ６０细胞增殖,并且呈时间、剂量依赖性,药物作用１２ｈ的ＩＣ５０（９５％可信区间）分别为２７（１５－４７）ｍｇ·Ｌ－１．结论：一叶秋碱诱导ＨＬ６０细胞凋亡