WT1基因和白血病

WT1基因是一种抑癌基因，在生殖泌尿系统的发育和Wilms瘤的发生中起关键作用，近年来发现与白血病的发生和预后也有很大关系、本文就WT1与白血病的发生、发展及其与预后的关系作一综述。1WT1基因与白血病的发生WT1基因定位于染色体11P13［1］，基因长度约50kb，编码约3kb的mRNA，编码蛋白质为核蛋白，分子量52－54kD，具有调节转录的功能。WT1共有10个外显子，外显子7、8、9、10各编码1个锌格结构。锌指结构有结合DNA的功能，结合的靶序列是GCGGGGGCG，它存在于许多生长调控因子基因的启动子内。WTI的锌指结构提示WTI的主要生…     

WT1基因及CD34在急性白血病中的表达及意义

目的研究WT1基因与CD34在急性白血病（AL）中表达的相关性及其临床意义。方法采用实时定量RT-PCR方法检测92例初治AL患者骨髓细胞WT1基因的表达,同时应用流式细胞仪测定骨髓细胞CD34的表达。结果初治AL患者WT1基因、CD34表达的阳性率分别为67．4％（62／92）、44．6％（41／92）,WT1基因、CD34阳性表达者的缓解率显著低于阴性表达者（P〈0．01）;WT1基因与CD34表达呈正相关（rn=0．5304,χ^z=25．88,P〈0．05）;WT1^＋CD34^＋、WT1^＋CD34、WT1-CD34^-AL患者第一次缓解率比较有统计学差异（P〈0．01）。结论WT1基因、CD34在AL患者骨髓细胞中的表达呈正相关,且阳性表达者的缓解率低、疗效差、预后不良。     

急性白血病患者WT1基因表达的临床意义

ＷＴ１基因是从Ｗｉｌｍｓ瘤细胞的染色体１１ｐ１３位点分离出来的肿瘤基因，但其在白血病的发生及发展中也起一定作用。虽然许多学者研究了ＷＴ１基因在白血病中的表达情况，但多数是关于ＷＴ１基因在白血病发病意义上的研究。关于ＷＴ１基因在急性白血病治疗反应方面的...     

WT1基因及蛋白在急性髓性白血病的表达及临床意义

目的探讨WT1基因及其蛋白产物在急性髓性白血病（AML）的表达及临床意义。方法采用RT-PCR及免疫组化的方法检测初治及复发的AML患者、正常志愿者骨髓或外周血单个核细胞中WT1基因及其蛋白产物的表达情况,并结合临床观察可盯1基因及蛋白产物表达与疗效的关系。结果 WT1基因及蛋白在45例AML初治患者中分别有39例（86．7％）和38例（84．4％）表达阳性,在6例复发患者中两者均表达阳性;AML患者WT1基因与蛋白表达呈正相关（r=0．277,P〈0．05）。初治患者中WT1基因和蛋白表达阳性的初次化疗完全缓解率分别为42．4％和40．6％,表达阴性的则分别为83．3％和85．7％;WT1基因相对表达量与初治AML患者首次化疗的完全缓解率有关（χ2=4．356,P〈0．05）。结论AML患者WT基因及蛋白的表达检测可作为判断其临床预后的一种手段,WT1蛋白的表达可以作为AML免疫治疗的靶点。     

WT1基因在白血病中的表达及临床意义

目的　探讨WT1基因在白血病中的作用。方法　用定量RT -PCR方法检测病人外周血或骨髓单个核细胞WT1mRNA表达。结果　 5 0例白血病患者中 ,41例WT1mRNA表达增高 ,阳性率为 82 0 %。急性髓细胞白血病 (AML)和急性淋巴细胞白血病 (ALL)阳性率分别为 84 0 %和 93 8% ,两组无显著差异 (P >0 0 5 ) ,慢性粒细胞白血病 (CML)的WT1mRNA阳性率为 6 6 7% ,其中慢性期均阴性 ,加速期和急变期均阳性。 17例完全缓解患者中 ,15例 (85 2 % )WT1mRNA转阴 ,复发患者WT1mRNA再次升高。结论　WT1mRNA表达的测定对白血病微小残留病检测具有重要意义     

WT1和HOX11基因阳性的急性淋巴细胞白血病1例

患者:女,53岁,因"乏力伴全身疼痛1周"于2016年12月入院。入院前无明显诱因出现乏力伴全身疼痛,在当地医院查血常规:白细胞(WBC)3.1×10~9/L,血红蛋白(Hb)69 g/L,血小板(PLT)23×10~9/L。骨髓穿刺(骨穿)提示:原始细胞占93%。为进一步治疗来我院。入院体格检查:体温36℃,呼吸20次/min,心率90次/min,血压108/59 mm Hg     

造血系统恶性肿瘤WT1基因表达

目的 :了解 WT1基因在各造血系统肿瘤中的表达。方法 :应用筑巢式 RT- PCR检测 63例血液系肿瘤 WT1基因表达。结果 :急性白血病初诊时 WT1基因的表达率 81.9% ,完全缓解期的表达率 60 .0 % ;慢性白血病慢性期或加速期并不表达 WT1基因 ,但慢粒进展至原始细胞危象期 ,均表达 WT1基因。造血系统的其它恶性病 ,如恶性组织细胞病和骨髓增生异常综合征的表达率分别为60 .0 %和 58.3%。正常人外周血并不表达 WT1基因 ,造血系统非肿瘤性疾病的骨髓有核细胞 WT1基因表达率极低 ( 1/ 10 )。结论 :WT1基因的异常高表达可能与造血系统的恶性肿瘤发病有关。WT1基因的 RT- PCR检测可作用白血病残留细胞病检测的一个有用的辅助指标。     

用RT—PCR法检测急性白血病患者MDR1基因表达

化疗是治疗急性白血病（Ａｃｕｔｅ Ｌｅｕｋｅｍｉａ ＡＬ）的主要手段。然而，由人ＭＤＲ１基因编码的Ｐｇｐ过表达引起的ＭＤＲ（Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）往往导致化疗的失败。利用检测ＭＤＲ１ＭＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ法，对１４份正常骨髓标本、２９例ＡＬ患者３０份骨髓标本的ＭＤＲ１ＭＰＲＮＡ进行了检测。结果表明：化疗前、后ＡＬ患者的ＭＤＲ１ＭＲＮＡ阳性率分别为１９％和７５％（Ｐ〈０．０１）：     

慢性粒细胞白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓细胞中Wilms瘤抑癌基因（WT1）的表达水平及其临床意义。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用Light Cycler PCR仪检测了46例（109份骨髓细胞cDNA标本）CML患者和23例非白血病患者骨髓细胞中WT1及内参β胆色原脱氢酶（GAPDH）的表达水平,以WT1N=（WT1拷贝数／GAPDH拷贝数）×10^4计算WT1表达水平。结果23份CML加速期与22份CML急变期患者骨髓细胞中WT1N的中位表达水平分别为103．71和129．44,明显高于64份CML慢性期和对照组（分别为3．44和1．47,P〈0．01）,对照组与CML慢性期之间WT1基因表达差异无统计学意义;CML加速期与急变期之间WT1基因表达差异也无统计学意义（P〈0．05）。WT1基因表达水平与BCR／ABL融合基因表达水平具有一定的相关性。对其中7例CML患者行异基因骨髓移植前后动态检测WT1上升可提示白血病复发。结论CML患者加速急变期骨髓细胞中WT1基因表达升高,具有参考意义。     

白血病患者Prame基因的表达及其与WT1基因比较的临床意义

目的：探讨Prame(黑色素瘤特异性抗原)在白血病患者中的表达及其临床意义。方法：应用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)测定58例白血病患者Prame mRNA的表达，并与WTl mRNA的表达相比较。结果：急性髓细胞性白血病(AML)患者Prame阳性表达率为52．2％，急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者Prame阳性表达率为66．7％，慢性粒细胞性白血病(CML)急性变患者Prame阳性表达率为55．6％；慢性及加速期CML患者ll例、l0名正常人外周血及l0例非血液病患者骨髓细胞均未见Prame mRNA表达，其中l例AML和5例ALL患者Prame阳性而WT1阴性。对2例Prame阳性和4例Prame、WTl均阳性的患者短期随访发现所有患者化疗后Prame均有不同程度的下降。l例复发患者Prame表达再次升高且早于WTl l个月，余3例白血病患者Prame和WTl表达的波动呈正比。结论：免疫抗原Prame是白血病的一个重要标记基因，与病程进展密切相关，有望成为白血病微小残留病灶检测和进行白血病免疫治疗的靶基因。     

白血病细胞系WT1的表达及反义核苷酸对其的抑制作用

目的:探讨RT-PCR方法测定白血病细胞系WT1基因的表达以及WT1反义寡核苷酸对白血病细胞系增殖的抑制作用。方法:应用RT-PCR方法测定K562、HL-60、TF-1及U937 4株白血病细胞系WT1基因的表达,然后应用针对WT1翻译起始位点的反义寡核苷酸(WT1 ASO)处理K562细胞系、U937细胞系,采用锥虫蓝拒染法确定白血病细胞的增殖。结果:K562、HL-60及TF-1 3株白血病细胞系均高度表达WT1,而U937细胞系未测到WT1。WT1 ASO能够抑制WT1表达阳性的K562细胞的生长,对WT1表达阴性的U937则无抑制作用;而WT1有义寡核苷酸对K562细胞系、U937细胞系均无抑制作用。结论:RT-PCR测定方法可以检测WT1基因在白血病细胞系表达,WT1反义寡核苷酸对白血病细胞有特异的抑制作用。WT1基因在白血病细胞增殖过程中起一定作用。     

Prognostic implications of mutations and expression of the Wilms tumor 1 (WT1) gene in adult acute T-lymphoblastic leukemia

Background

The role of the Wilms tumor 1 gene (WT1) in acute leukemias has been underscored by mutations found in acute myeloid leukemia identifying patients with inferior survival. Furthermore, aberrant expression of WT1 in acute myeloid leukemia was associated with an increased risk of relapse. No larger studies have performed a combined approach including WT1 mutation and expression analyses in acute T-lymphoblastic leukemia.

Design and Methods

We analyzed the WT1 mutations and the expression status in a total of 252 consecutive adult patients with newly diagnosed T-lymphoblastic leukemia, who were registered on the GMALL 06/99 and 07/03 protocols and had sufficient material available. The GMALL protocols included intensive chemotherapy as well as stem cell transplantation according to a risk-based model with indication for stem cell transplantation in first complete remission for early and mature T-lymphoblastic leukemia patients; patients with thymic T-lymphoblastic leukemia were allocated to a standard risk group and treated with intensive chemotherapy.

Results

Twenty of the 238 patients analyzed had WT1 mutations (WT1mut) in exon 7. WT1mut cases were characterized by immature features such as an early immunophenotype and higher WT1 expression. In thymic T-lymphoblastic leukemia, WT1mut patients had an inferior relapse-free survival compared to WT1 wild-type patients. T-lymphoblastic leukemia patients with aberrant WT1 expression (high or negative) showed a higher relapse rate and an inferior outcome compared to patients with intermediate WT1 expression. In the standard risk group of thymic T-lymphoblastic leukemia, aberrant WT1 expression was predictive for an inferior relapse-free survival as compared to patients with intermediate expression. In multivariate analysis, WT1 expression was of independent prognostic significance for relapse-free survival.

Conclusions

WT1 mutations were associated with an inferior relapse-free survival in standard risk thymic T-lymphoblastic leukemia patients. Moreover, altered expression associated with inferior outcome also suggests a role of WT1 in T-lymphoblastic leukemia and the potential use of molecularly-based treatment stratification to improve outcome.     

联合定量检测急性髓系白血病患者MDR1和WT1基因表达及临床意义

目的 联合定量检测初治急性髓系白血病(AML)患者MDR1及WT1基因的表达水平,探讨MDR1与WT1的表达量在AML耐药中作用及相互关系.方法 构建实时荧光定量PCR检测WT1和MDR1基因表达水平技术,并检测63例初治AML患者WT1和MDR1基因的表达量及与临床疗效的关系.结果 63例初治AML患者MDRI基因表达(拷贝/μg RNA)的中位数为2863(413～3 410 000),WT1基因表达为52 700(7731～1 020 000).10例正常对照组MDR1和WT1基因表达水平为337(125～840)和849(635～1402).初治AML患者MDR1和WT1基因表达水平均显著高于正常对照组(P＜0.001).且MDR1与WT1基因表达水平呈相关性(P=0.004);FAB各亚型中MDR1和WT1基因表达水平差异无统计学意义(P＞0.05);遗传学危险度分级的高、中、低危3组的WT1和MDR1基因表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).FLT3-ITD突变阳性组MDR1基因表达水平与突变阴性组相比差异无统计学意义(P＞0.05).FLT3-ITD突变阳性组的WT1基因表达水平显著高于阴性组(P＜0.05).AML患者中WT1和MDR1基因共同高表达组完全缓解率显著低于共同低表达组(P＜0.05).结论 AML患者MDR1和WT1基因表达水平存在相关性;联合检测AML患者MDR1和WT1基因表达量更能早期预测预后.     

髓系白血病中EVI1基因的表达及其临床意义

目的研究EVI1基因在成人急性髓系白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)中的表达及其临床意义。方法采用多重逆转录-聚合酶链反应(多重RT-PCR)技术分析2002年9月至2005年3月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的45例AML和43例CML骨髓单个核细胞中EVI1基因mRNA的表达,分析EVI1mRNA阳性白血病患者的临床特征及疗效。结果45例AML患者中有8例(17.8%)EVI1阳性,其中M11例、M23例、M54例。43例CML患者中有8例(18.6%)EVI1阳性,其中慢性期2例,占5.7%(2/35),加速期与急变期各3例,均占75.0%(3/4),加速期与急变期组的EVI1基因表达率高于慢性期组(P<0.01)。EVI1阳性的AML患者早期病死率高;EVI1基因阳性表达与CML白血病临床分期及预后相关。结论EVI1基因的高表达在髓系白血病的发生中,特别是在慢性粒细胞白血病慢性期向急性期转化中起重要作用。     

急性白血病ZO-1基因启动子区甲基化状态分析及其临床意义

目的 探讨紧密连接蛋白-1(Zonula occludens-1,ZO-1)基因启动子区甲基化状态在人急性白血病(AL)发生、发展中的作用及作为通用性基因标志物的临床意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)检测白血病细胞系HL60、Molt4、NK92和40例非恶性血液病以及81例AL骨髓ZO-1基因启动子区的甲基化状态.结果 ZO-1基因启动子区在白血病细胞系中呈完全甲基化状态;而在40例非恶性血液病标本中均为非甲基化;81例AL标本中甲基化阳性率为60.49%(49/81),其中难治复发组为92.86%(13/14),高于初诊未治疗组65.85%(27/41)及完全缓解组34.62%(9/26);急性髓细胞白血病组61.54%(32/52)与急性淋巴细胞白血病组58.62%(17/29)比较差异无统计学意义.结论 首次证明ZO-1基因启动子区高甲基化状态在人AL中具有较高的特异性,与疾病发生、发展密切相关,可作为一个新的白血病通用分子标志.