血管内皮生长因子及上皮-间充质转化在增生性玻璃体视网膜病变发病中的作用

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是一种发生在孔源性视网膜脱离(RRD)自然病程中或复位手术后的严重并发症,常常导致患者视力丧失。目前,临床缺乏有效的治疗方法。PVR病理特征是多种细胞在细胞因子的作用下发生的过度炎症反应和异常增生,最终在视网膜表面形成增殖膜及进一步的牵拉性视网膜脱离(TRD)。对PVR发病机制的深入研究将有助于为其治疗寻找有前景的分子靶标。近年研究发现,血管内皮生长因子(VEGF)及视网膜色素上皮(RPE)细胞的上皮-间充质转化(EMT)在PVR发病中发挥着重要作用。本文就VEGF及RPE细胞EMT在PVR发病中的作用,以及二者的相互联动机制进行了总结,以期为PVR的治疗和临床研究提供新的思路。     

上皮间充质转化在增生性玻璃体视网膜病变发病机制中的潜在作用

增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR）是一种以纤维化为特点具有潜在致盲性的眼科并发症,其病理改变是产生视网膜前膜（epiretinal membranes,ERMs）。ERMs是一种纤维增殖膜,在视网膜前后表面及玻璃体内形成,当其收缩后导致PVR的发生,最终形成视网膜皱褶和牵引视网膜脱离（tractional retinal detachment,TRD）。多种细胞类型在ERMs中已被确定,视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）在PVR的病理生理学中至关重要。大量的临床和实验证据研究表明,RPE细胞采用了成纤维细胞表型发生了上皮间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,并且还涉及大量的细胞因子、转录因子。EMT的特点是细胞间黏附和顶面-底侧细胞极性的缺失,这增加了细胞的移行性。由此产生的细胞能够通过细胞外基质迁移和转移。细胞间黏附由连接复合体维系着,它们在维护RPE细胞表型方面起重要作用,其通过激活一些信号通路及转录因子破坏这些连接复合体并导致EMT的发生。经过EMT过程后,转化生长因子-β使RPE细胞进一步分化为肌成纤维细胞。源自RPE细胞的成纤维细胞和肌成纤维细胞可以通过细胞迁移、增殖,导致ERMs的形成,这在PVR的病程发展中起着关键性作用。     

微小RNA调控增生性玻璃体视网膜病变的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是一个眼部组织的创伤修复和纤维化过程,其特征性改变是在玻璃体腔和(或)视网膜表面形成由细胞外基质(ECM)和各种类型的细胞组成的视网膜前膜(ERM),ERM收缩形成视网膜皱褶,并牵拉视网膜引起视网膜脱离(RD)。视网膜色素上皮(RPE)细胞发生上皮-间质转化(EMT)和ECM累积是ERM形成的重要病理机制。转化生长因子-β(TGF-β)等诱导RPE细胞发生EMT,细胞失去上皮表型、细胞间黏附减弱和表达间充质表型。由间充质细胞分化而成的成纤维细胞样细胞分泌ECM等成分,与神经胶质细胞、成纤维细胞等共同形成ERM。RPE细胞的EMT过程受许多细胞因子/生长因子、转录因子及微小RNA(microRNA,miRNA)等的调控,研究证明miRNA是一类新型且功能强大的调节基因,在PVR的EMT过程中起着重要调控作用。本文将近年来miRNA调控PVR的作用机制和干预性治疗研究进行综述。     

生长因子与增生性玻璃体视网膜病变相关性的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是眼球穿通伤及孔源性视网膜脱离手术后的常见并发症。该病的发病机制仍未明确,但研究表明,视网膜色素上皮(RPE)细胞具有自分泌细胞因子的能力,许多生长因子在PVR患者的玻璃体或者视网膜下积液中过度表达,这些生长因子及其受体在PVR的发生发展中扮演了重要角色,血-视网膜屏障被破坏后,生长因子的生理平衡即被打破,RPE细胞受到生长因子的刺激发生上皮-间质转化(EMT)、迁移及增殖,进而与其他细胞及细胞外基质形成视网膜前膜,牵拉视网膜造成视网膜脱离。近年来学者们对生长因子在PVR的形成中所涉及的信号通路、促EMT进程及细胞增殖做了大量研究,本文将对近年来促PVR发展的生长因子及拮抗生长因子治疗PVR的研究结果作一综述。     

上皮-间充质转化在增生性玻璃体视网膜病变发病机制中的作用

增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是孔源性视网膜脱离及玻璃体视网膜手术后的常见并发症,其主要特征是在视网膜前形成无血管的纤维细胞膜.超微结构和免疫病理研究表明,多种细胞参与PVR的发生与发展,如视网膜色素上皮细胞、神经胶质细胞、巨噬细胞、玻璃体细胞、成纤维细胞和肌成纤维细胞等.其中,肌成纤维细胞是引起PVR增生膜收缩导致视网膜复位手术失败的主要细胞,主要来自于视网膜色素上皮细胞的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),在PVR的发生发展中具有重要作用.因此,阻断视网膜色素上皮细胞转分化为肌成纤维细胞可能成为预防和治疗PVR的一种有效的方法.     

抑制视网膜色素上皮细胞发生上皮-间充质转化的研究进展

视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)是增殖性玻璃体视网膜疾病(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的主要发病机制,也是治疗脉络膜新生血管(choroidal neovascularization, CNV)时,造成抗血管内皮生长因子(anti-vascular endothelial growth factor, anti-VEGF)疗效降低的重要因素。除此之外,随着细胞替代治疗作为年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,ARMD)的新型治疗方式而兴起,人类胚胎干细胞(hESC-RPE)、体细胞诱导多能干细胞(iPSC-RPE)定向诱导分化的RPE细胞以及来自于流产胎儿的胎儿视网膜色素上皮细胞(fetal RPE,fRPE)逐渐受到了研究者们的关注。为了发挥最好的治疗效果,保证治疗用细胞的稳定增殖及高效分化是极其重要的。但是在传代扩增的过程中,由于上皮间充质转化的存在,导致这些细胞出现增殖困难以及再分化能力下降,从而影响治疗效果并阻碍了治疗人群的普及,使细胞替代治疗难以推广。所以,鉴于上皮间充质转化在视网膜疾病的发生和治疗中都造成了重要影响,抑制视网膜色素上皮细胞发生上皮间充质转化就显得尤为重要,为此,我们将阻止上皮间充质转化研究的最新进展综述如下。     

增生性玻璃体视网膜病变发病机制的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy，PVR)是在孔源性视网膜脱离或视网膜脱离复位术后，由于视网膜色素上皮细胞(RPE)及神经胶质细胞的增生和收缩，造成牵拉性视网膜脱离的病变。PVR的病理特征是细胞增生，RPE一旦开始增殖，就产生细胞生长因子，而这些细胞生长因子反过来又刺激细胞增殖。PVR的过程有多种细胞及因子的参与，参与PVR增生的细胞主要是RPE和视网膜神经胶质细胞；涉及PVR的生长因子有：PDGF、EGF、VEGF、TGF、FGF、IGF、HGF等。     

视网膜下液中转化生长因子-β1水平及受体细胞的检测

孔源性视网膜脱离的视网膜下液中的细胞以视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞为主。有认为,RPE细胞对生长因子的特殊敏感性与增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的发生有关。孔源性视网膜脱离患者其视网膜下液中碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)呈现高水平表达,本文将进一步研究PVR患者的视网膜下液中的转化生长因子-β1(transforming growth factor—beta 1,TGFβ1)水平和受体表达细胞。     

腺病毒介导外源性p21WAF1/CIP1基因抑制体外培养人视网膜色素上皮细胞增生及迁移

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是孔源性视网膜脱离等疾病的严重并发症,而视网膜色素上皮(RPE)细胞的异常增生是导致PVR发生的重要病理基础[1].p21 WAF1/CIP1是近年来发现的一种细胞周期负性调控基因,参与抑制细胞生长、发育、分化等多种生物学功能[2].近年研究发现腺病毒介导p21 WAF1/CIP1基因可有效抑制青光眼滤过手术后切口处纤维增生和切口愈合[3].因此,为了探讨腺病毒介导p21 WAF1/CIP1基因是否可以抑制RPE细胞的异常增生,进而抑制PVR的形成,从而探索一条治疗PVR的新途径,我们选用腺病毒介导p21WAF1/CIP1转染人视网膜色素上皮(hRPE)细胞,观察对其增生及迁移的影响,现将结果报道如下.     

增生性玻璃体视网膜病变的药物治疗

增生性玻璃体视网膜病变（PVR）常由于裂孔源性视网膜脱离、眼穿孔伤或眼内手术造成血-视网膜屏障受损,视网膜色素上皮（RPE）细胞进入玻璃体,继而引起RPE细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等在玻璃体内增生,形成以细胞为主的纤维膜。临床上治疗和预防PVR以手术为主,但效果不佳。近来有许多药物治疗PVR的研究报道,就PVR药物治疗研究进展进行综述。     

增生性玻璃体视网膜病变的研究进展

增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是裂孔源性视网膜脱离手术失败最常见的原因。研究结果表明，PVR是视网膜脱离手术后的创伤愈合反应。随着视网膜的创伤，活化的视网膜色素上皮细胞，胶质细胞，纤维母细胞等增殖、迁移，与细胞外间质共同形成了PVR膜而导致牵引性视网膜脱离。就PVR的治疗而言，早期在于控制炎症，中期主要是抑制细胞增殖，晚期着重于防止纤维化的形成。着重就PVR的危险因素、临床分类、病理、手术处理以及最新的药物治疗进展做综合归纳。     

Gravity-dependent distribution of retinal pigment epithelial cells dispersed into the vitreous cavity

Release of viable retinal pigment epithelial (RPE) cells into vitreous cavity and subsequent attachment to the retina may be the first steps in the occurrence of macular pucker and proliferative vitreoretinopathy (PVR) complicating rhegmatogenous retinal detachment. Gravity and post-operative position of the patient together may influence where the cells settle, and, thereby, the location of subsequent membrane formation. To study the effect of gravity on the location of RPE cell attachment, 3H-thymidine-labelled RPE cells were injected into 12 enucleated pig eyes after vitrectomy performed to create a posterior vitreous detachment. The eyes were then positioned to make either the macula or the inferior retina gravitationally dependent. Radioactivity was later measured from several locations on the retina to indicate the proportion of cells attached in each location. Radioactivity measured from the dependent part of the globe (mean 5985 +/- 1728) was always greater than that from other parts (mean 389 +/- 79). The experiment was repeated in live pig eyes with identical results. These findings suggest that patient positioning may affect the location of cellular membrane formation and subsequent retinal traction.     

Pathobiology of epiretinal and subretinal membranes: possible roles for the matricellular proteins thrombospondin 1 and osteonectin (SPARC)

Epiretinal and subretinal membranes are fibrocellular proliferations which form on the surfaces of the neuroretina as a sequel to a variety of ocular diseases. When these proliferations complicate rhegmatogenous retinal detachment (a condition known as proliferative vitreoretinopathy or PVR), the membranes often contain numerous retinal pigment epithelial (RPE) cells and a variety of extracellular proteins. The extracellular proteins include adhesive proteins like collagen, laminin and fibronectin. In addition, several matricellular proteins with potential counter-adhesive functions are present in the membranes. Two such matricellular proteins, thrombospondin 1 and osteonectin (or SPARC: Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine), tend to be co-distributed with the RPE cells in PVR membranes. By virtue of their counter-adhesive properties, thrombospondin 1 and SPARC may reduce RPE cell-matrix adhesion and so permit key RPE cellular activities (for example, migration or shape change) in periretinal membrane development. Furthermore, within a 'cocktail' containing other proteins such as the metalloproteinases and growth factors like the scatter factor/hepatocyte growth factor family, matricellular proteins may play a role in the RPE cell dissociation from Bruch's membrane, which characterises early PVR.     

生长因子与视网膜色素上皮细胞

目前 研究认为视网膜色素上皮(RPE)细胞是构成增生性视网膜疾病中增生膜的主要细胞成分。RPE细胞的增生和移行，使得增生组织长人玻璃体内，最终导致牵拉性视网膜脱离和失明。新近研究的某些生长因子在RPE细胞的增生和移行中发挥了重要作用。介绍几种主要的生长因子对RPE细胞的作用，为RPE细胞的实验研究和临床研究提供理论基础。     

兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变中碱性成纤维细胞生长因子和增殖细胞核抗原表达的变化

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibrob-last growth factor，bFGF）和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）在兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy，PVR）中表达的动态变化及其相关性。方法采用原位杂交法和免疫组化法分别检测兔外伤性PVR模型bFGF和PCNA表达，染色结果行图像分析。结果伤后bFGF和PCNA表达呈现先升高后降低的动态变化，14d组阳性表达最高（平均积分光密度分别为18502.31±10822.69和89343.75±19686.711，与7d、21d、28d组比较差异有显著性：bFGF和PCNA表达之间有显著相关性（r=0.580，P≤0.01）。结论bFGF参与外伤性PVR增殖细胞的生长调控，与细胞增殖的动态变化呈高度相关性。     

Early retinal adhesion from laser photocoagulation

Histopathologic examination of eight cynomolgus monkey eyes and one human eye revealed that both argon and krypton laser photocoagulation cause adhesion between the neurosensory retina and the retinal pigment epithelium (RPE) within 24 hours of treatment. The neurosensory retina remained attached at the sites of laser burns despite surrounding retinal detachment in untreated areas. This early adhesion with the laser is useful for the treatment of eyes in which the retina has been recently reattached such as at the end of a vitrectomy for a retinal detachment with proliferative vitreoretinopathy (PVR) or after a pneumatic retinopexy. It is also useful for the treatment of retinal breaks without detachment.