延胡索和左旋延胡索乙素对大鼠吗啡条件性位置偏爱效应消退作用的比较

目的观察并比较延胡索及其有效成分左旋延胡索乙素(l-tetrahydropalmatine,l-THP)对大鼠吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)效应消退时间的影响。方法剂量递增法建立大鼠吗啡CPP模型,雄性SD大鼠颈背部注射吗啡和生理盐水训练10 d,在12 d确认CPP模型建立成功后,连续21 d给予延胡索2,1,0.5 g.kg-1水提液(分别含l-THP0.153,0.077,0.038 mg),以及l-THP 3.76,1.88,0.94 mg.kg-1灌胃治疗,观察各组大鼠吗啡CPP效应的消退时间。结果与生理盐水对照组比较,吗啡模型组大鼠在伴药箱停留的时间明显延长(P<0.05);治疗后,延胡索2,1g.kg-1水提液和l-THP 3.76,1.88 mg.kg-1组的CPP效应在用药6 d消退,而模型组、延胡索0.5 g.kg-1和l-THP0.94 mg.kg-1组在用药第2天消退。结论延胡索和l-THP均能加速大鼠吗啡CPP效应的消退,但含一倍量l-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约24倍l-THP单体的效果。     

延胡索和左旋延胡索乙素对大鼠吗啡CPP效应、纹状体谷氨酸含量和NR2B表达的影响及比较

目的:观察并比较延胡索与左旋延胡索乙素(l-THP)对吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱(CPP)效应、谷氨酸递质含量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDAR)亚基NR2B表达的影响。方法:吗啡剂量递增皮下注射10d建立大鼠吗啡CPP模型,延胡索2、1、0.5g/kg水提液(分别含l-THP 0.153、0.077、0.038mg)和l-THP 3.76、1.88、0.94 mg/kg灌胃治疗6d后,CPP实验评价大鼠CPP效应;比色法和免疫组化测定纹状体中谷氨酸递质含量和NR2B的表达。结果:与生理盐水治疗组和吗啡模型组比较,延胡索2、1g/kg及l-THP 3.76、1.88mg/kg能明显减少大鼠在白箱的停留时间(P<0.01),同时纹状体中谷氨酸递质含量和NR2B表达均显著降低(P<0.01)。结论:延胡索和有效成分l-THP单体对吗啡CPP效应均具有明显的抑制作用,逆转纹状体中升高的谷氨酸递质含量和下调NR2B的表达,可能是二者有效抑制吗啡CPP效应的机制之一;含1倍量l-THP单体的延胡索不但在抑制吗啡CPP行为学方面相当于单独应用约24倍l-THP单体的效果,而且,在对纹状体中谷氨酸递质和NR2B的药理作用机制方面也具有很大的相似性。     

延胡索及L-THP对吗啡条件性位置偏爱大鼠奖赏环路多巴胺系统的影响及比较

目的: 研究延胡索及左旋延胡索乙素(L-THP)对吗啡条件性位置偏爱(CPP)模型大鼠奖赏环路各脑区多巴胺递质与D2受体的影响及比较。 方法: 吗啡剂量递增颈背部皮下注射CPP训练10 d(起始剂量10 mg·kg^-1,每天递增10 mg·kg^-1,至注射10 d时为100 mg·kg^-1),末次训练后48 h CPP检测确认模型建立成功,即日(12 d)延胡索水提液2,1,0.5 g·kg^-1(分别含L-THP 0.153,0.077,0.038 mg),以及L-THP 3.76,1.88,0.94 mg·kg^-1灌胃治疗,共6 d,第18天再次CPP检测,次日取材用高效液相法测定其中脑腹侧被盖区-伏核-前额叶皮质(VTA-NAc-PFC)奖赏神经环路各脑区多巴胺递质含量,免疫组化和Western blotting检测D2受体的表达。 结果: 与生理盐水治疗组比较,延胡索2,1 g·kg^-1,以及L-THP 3.76,1.88 mg·kg^-1组大鼠在白箱(吗啡伴药箱)停留时间明显减少(P<0.01或P<0.05),同时VTA,NAc和PFC内多巴胺含量降低,D2受体表达显著增加(P<0.01或P<0.05)。 结论: 下调奖赏神经环路中升高的多巴胺含量和上调D2受体的表达,可能是延胡索与L-THP加速吗啡CPP效应消退的机制之一;对于抑制吗啡CPP效应以及对多巴胺系统的影响,含1倍量L-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约24倍L-THP单体的效果。     

延胡索及其有效成分抗吗啡成瘾多巴胺系统作用机制研究和效果比较

为了观察延胡索和左旋延胡索乙素(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)大鼠学习记忆相关脑区海马(Hip)和纹状体(Str)内多巴胺递质含量,多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)和多巴胺D2受体(D2R)表达的影响。对各组大鼠颈背部皮下注射生理盐水或吗啡后(吗啡起始剂量为10 mg·kg-1,逐日递增,至第10天为100 mg·kg-1),末次训练48 h进行CPP测试确认模型建立成功,立即处死生理盐水对照组和模型组大鼠,分别取海马、纹状体脑组织。延胡索高、中、低剂量组大鼠则分别给予延胡索2,1,0.5 g·kg-1水提液(内含L-THP的量分别为0.274,0.137,0.069 mg),L-THP高、中、低剂量组分别给予L-THP 3.76,1.88,0.94 mg·kg-1灌胃治疗,生理盐水治疗组灌胃生理盐水,持续治疗6 d,再次CPP测试后处死,同前取材。采用高效液相色谱法检测多巴胺递质含量;Western blot技术检测DAT和D2R的表达。结果显示,与生理盐水治疗组比较,延胡索和L-THP高、中剂量组大鼠在白箱停留的时间显著减少(P0.01),同时海马和纹状体脑区内多巴胺递质含量明显降低(P0.01或P0.05),DAT表达上调(P0.01),D2R表达上调(P0.01)。学习记忆相关脑区海马和纹状体是延胡索和L-THP治疗精神依赖的又一神经解剖学作用位点,其机制与下调其升高的DA递质含量以及上调DAT和D2R的表达有关;对吗啡CPP效应消退的药效作用,以及对学习记忆相关脑区海马、纹状体中DA递质含量、DAT和D2R的影响,含1倍量L-THP单体的延胡索中药相当于单独应用约14倍L-THP单体的效果。     

延胡索对吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应的影响

目的 观察延胡索水提液对吗啡诱导条件性位置偏爱(CPP)效应的影响.方法 吗啡剂量递增颈背部皮下注射10 d,建立大鼠吗啡CPP模型.在CPP测试后当日,不同剂量延胡索水提液灌胃治疗.结果 在延胡索1 mg·kg-1,2 mg·kg-1组,大鼠吗啡CPP效应6 d消退,相比模型组(21 d消退)提前2/3时程.结论 延胡索单味中药能加速吗啡诱导CPP效应的消退,提示该药具有治疗吗啡精神依赖的潜能.     

钩藤对吗啡条件性位置偏爱效应影响的研究

目的:观察钩藤提取液对吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱效应的影响.方法:采用倾向性程序训练大鼠,建立位置偏爱模型,并观察钩藤提取液对其的影响.结果:吗啡(15mg/kg,sc,每日1次,连续用药5d)引起大鼠显著的位置偏爱效应.在训练阶段每天sc吗啡后12h给予钩藤提取液(3、9g/kg,ig),大鼠在白箱的逗留时间有所缩短,钩藤高剂量组(9g/kg)大鼠在白箱的停留时间与空白对照组相比无显著差异(P＞0.05),与给药前相比亦无显著性差异(P＞0.05).结论:提示预先给予钩藤提取液能在一定程度上抑制吗啡诱导的条件性位置偏爱效应的形成.     

延胡索及白芥子涂方中延胡索乙素经皮渗透的比较研究

经皮给药制剂(Transdermal Drug Delivery Systems,TDDS),是指经皮肤给药而发挥全身治疗作用的控释制剂。作为第三代药物制剂研究的新型给药系统,其优点有:可以绕过肝脏的首过效应及胃肠道的破坏,提供可预定的和较长的作用时间,维持稳定持久的血药浓度,降低药物毒性和副作用,提     

左旋延胡索乙素印迹聚合物的制备及固相萃取应用

目的利用分子印迹技术制备左旋延胡索乙素(L-THP)分子印迹聚合物(MIPs),并进行固相萃取应用研究。方法以L-THP为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,制备左旋延胡索乙素分子印迹聚合物(L-THP-MIPs),并进行固相萃取实验优化萃取条件,考察L-THP-MIPs吸附的选择性和专一性。结果 L-THP-MIPs能特异性地吸附L-THP,而对L-THP的结构类似物延胡索甲素未表现出明显的吸附行为。结论L-THP-MIPs对L-THP具有良好的选择性和专一性。     

延胡索乙素对映体对人肝微粒体细胞色素P450酶抑制作用机制研究

目的考察延胡索乙素(tetrahydropalmatine,THP)对映体对人肝微粒体中主要细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)的抑制作用及其机制。方法采用Cocktail探针药物法分别考察左旋延胡索乙素[(-)-tetrahydropalmatine,(-)-THP]和右旋延胡索乙素[(+)-tetrahydropalmatine,(+)-THP]对人肝微粒体中主要I相药物代谢酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4、CYP2E1和CYP2D6活性的影响;采用两步孵育法考察(-)-THP对人肝微粒体中CYP2D6的底物右美沙芬脱甲基活性的影响,研究其对CYP2D6的抑制机制;采用时间依赖性实验考察(-)-THP对CYP2D6的酶动力学参数。结果 (+)-THP对CYP450各亚型无明显抑制作用,而(-)-THP对CYP2D6的抑制作用强(IC50=0.46μmol/L);在加或不加NADPH[(+)NADPH/(-)NADPH]预孵育体系中,(-)-THP对CYP2D6的IC50值分别为2.40、0.46μmol/L,即IC50(-)NADPH/IC50(+)NADPH=5.22;(-)-THP对CYP2D6的酶动力学参数Ki和Kinact分别为0.690μmol/L和0.084 6 min-1。结论 (-)-THP对CYP2D6的抑制作用强,抑制类型为基于机制抑制(MBI),提示在临床应用中需注意(-)-THP可能引起显著的代谢性药物相互作用。     

川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素在模型与正常大鼠体内药动学比较研究

目的探讨川芎、延胡索中主要活性成分在模型与正常大鼠体内药动学规律与差异。方法 SD大鼠分为对照组和子宫内膜异位症模型组,每组8只,各组均按川芎嗪50mg/kg、阿魏酸30mg/kg、延胡索乙素20mg/kg ig给药,采用高效液相色谱法测定各组大鼠血浆中川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素的质量浓度,DAS2.0程序计算药动学参数。结果模型组川芎嗪药时曲线下面积(AUC_(0~t))、达峰浓度(C_(max))、达峰时间(t_(max))、半衰期(t_(1/2))和平均驻留时间(MRT_(0~t))与对照组相比差异均不显著(P0.05);模型组阿魏酸AUC_(0~t)、C_(max)、t_(max)都小于对照组,但差异没有显著性(P0.05),t_(1/2)、MRT_(0~t)显著小于对照组(P0.05);模型组延胡索乙素AUC_(0~t)、t_(max)、MRT_(0~t)均显著大于对照组(P0.05)。结论川芎、延胡索主要活性成分在正常大鼠和模型大鼠的体内过程有所不同。阿魏酸在模型大鼠体内消除更快,延胡索乙素在模型大鼠体内吸收浓度更高、消除更慢,川芎嗪在正常及模型大鼠的体内过程无显著性差异。     

鲜元胡一体化加工炮制技术研究

目的:研究将鲜元胡初加工与醋制结合的一体化加工技术.方法:通过采用不同的加工方法,并与传统炮制进行对比,测定各样品中延胡索乙素含量、水浸提物和醇浸提物含量.结果:以元胡鲜切片在米醋中减压抽真空2次及鲜切片干燥后用米醋浸润的样品中延胡索乙素含量最高;水热浸提物含量则以鲜切片干燥后用米醋浸润处理最高,其次是鲜切片在米醋中减压抽真空处理,其他处理样品与传统炮制差异不大;醇浸提物含量在各样品间差异不大.结论:可以对鲜元胡直接进行一体化加工及炮制.     

南方红豆杉水提物抑制裸鼠A549肺癌移植瘤生长及其机制研究

目的: 研究南方红豆杉水提物对裸鼠A549肺癌移植瘤生长的抑制作用和机制。 方法: 建立荷A549肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、低、中、高剂量南方红豆杉水提物实验组,24 h后以等体积生理盐水及药物灌胃,给药7周,每3 d测移植瘤长短径,绘制移植瘤生长曲线,给药7周后处死裸鼠,取瘤组织,计算抑瘤率,采用Real-time PCR及Western blot方法检测mRNA和蛋白水平。 结果: 南方红豆杉水提物各剂量组均有明显抑瘤效果(P<0.05)。与对照组相比,各实验组移植瘤组织中EGFR及Survivin mRNA水平明显下调(P<0.05),VEGF mRNA水平无明显变化。灰度值之比分析显示:各实验组移植瘤组织中EGFR及VEGF蛋白水平均有下调趋势,但差异无统计学意义,Survivin及p-EGFR蛋白水平明显下调(P<0.05)。 结论: 南方红豆杉水提物对血管生成无明显影响,可能通过抑制Survivin蛋白,抑制EGFR磷酸化,起到抑制移植瘤生长的效果。     

Antidiabetic and antioxidant effects of Annona muricata (Annonaceae), aqueous extract on streptozotocin-induced diabetic rats

Ethnopharmacological relevance

The leaves of Annona muricata are used in Cameroon to manage diabetes and its complications. The aim of this study was to evaluate the antidiabetic, antioxidant activities and the potential toxicity of aqueous extract of Annona muricata in streptozotocin-induced diabetic rats.

Material and methods

Oral administration of Annona muricata aqueous extract (100 mg/kg or 200 mg/kg) was studied in normal and streptozotocin-induced diabetic rats. In long term treatment, 2 weeks after streptozotocin-induced diabetic rats, animals received plant extract during 28 consecutive days. For a protective effect, extract was administered 3 days prior to streptozotocin exposure and animals were observed 2 weeks without treatment.

Results

The plant extract was not effective in normal rats. In diabetic rats, single administration of the extract significantly reduced blood glucose levels by 75% and 58.22% respectively at the dose of 100 mg/kg and 200 mg/kg as compared to the initial value. Treatment of normal rats 3 days prior to diabetes induction showed that, Annona muricata extract has no effect within 72 h following STZ injection. However, after 14 days post-treatment, the extract at the dose of 100 mg/kg significantly reduced blood glucose levels as compared with initial value and diabetic control rats. Immunohistochemical staining of pancreatic β-cells of diabetic rats treated with the dose of 100 mg/kg expressed strong staining for β-cell compared to diabetic control. In a long-term study daily administration of Annona muricata aqueous extract for 28 days to diabetic rats, reduced blood glucose levels, serum creatinine, MDA, AST, ALT activity, and nitrite levels LDL-cholesterol. Total cholesterol, triglycerides, SOD, and CAT activity contents were restored.

Conclusion

These different results show that the antidiabetic activity of Annona muricata aqueous extract can be explained by its hypolipidaemic effect, its antioxidant and protective action on pancreatic β-cells, which in turn improve glucose metabolism.     

高温高压下丹酚酸B,紫草酸水溶液 化学变化的研究

目的:考察中药丹参中主要活性成分丹酚酸B,紫草酸在高温高压处理过程中的化学成分变化,探索其变化机理.方法:采用高温高压(120℃,0.2 MPa)条件对丹参提取物、丹酚酸B及紫草酸进行处理,研究成分的变化情况及稳定性.结果:丹酚酸B与紫草酸经高温高压处理后的主要产物为丹酚酸A;紫草酸是丹酚酸B反应的中间产物,在相同条件下比丹酚酸B更容易转化为丹酚酸A;丹酚酸A在高温高压条件下不稳定,能够继续分解为其他小分子化合物.结论:该实验为丹酚酸A的获取提供了新的制备方法.     

Inhibitory effects of Bulnesia sarmienti aqueous extract on agonist-induced platelet activation and thrombus formation involves mitogen-activated protein kinases

Ethnopharmacological relevance

B. sarmienti has long been recognized in folk medicine as a medicinal plant with various medicinal uses. Traditionally, it has been appreciated for the skin-healing properties of its essence. The bark has also been employed to treat stomach and cardiovascular disorders and reported to have antitumor, antioxidant and anti-inflammatory activities. However, information on its antiplatelet activity is limited.

Aim of the study

To examined the effects of B. sarmienti aqueous extract (BSAE) in platelet physiology.

Materials and methods

The anti-platelet activity of BSAE was studied using rat platelets for in vitro determination of the extract effect on agonist-induced platelet aggregation, ATP secretion, [Ca²⁺]_i mobilization and MAP kinase phosphorylation. The extract in vivo effects was also examined in arterio-venous shunt thrombus formation in rats, and tail bleeding time in mice.

Result

HPLC chromatographic analysis revealed that B. sarmienti extract contained (+)-catechin (C), (−)-epigallocatechin (EGC), (−)-epicatechin (EC), and (−)-epicatechin gallate (ECG). BSAE, significantly and dose dependently, inhibited collagen, thrombin, or ADP-induced platelet aggregation. The 50 percent inhibitory concentrations (IC₅₀) of the extract for collagen, thrombin and ADP-induced platelet aggregation were 45.3 ± 2.6, 100 ± 5.6 and 110 ± 4.6 μg/ml, respectively. Collagen activated ATP release and thrombin-induced intracellular Ca²⁺ concentration were reduced in BSAE-treated platelets. In addition, the extract in vivo activity showed that BSAE at 100 mg/kg significantly attenuated thrombus formation in rat extracorporeal shunt model while mice tail bleeding time was not affected. Moreover, BSAE attenuated p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK), c-Jun N-terminal kinase 1 (JNK1) and extracellular-signal-regulated protein kinase 2 (ERK2) phosphorylations.

Conclusion

BSAE inhibits platelet activation, granule secretion, aggregation, and thrombus formation without affecting bleeding time, and that this effect is mediated by inhibition of P38, JNK1 and ERK2 phosphorylations. The ability of BSAE to inhibit platelet function might be relevant in cases involving aberrant platelet activation where the plant extract could be considered as a candidate to anti-platelet and antithrombotic agent.     

木豆叶提取物对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及机制研究

目的研究木豆叶提取物(ECCL)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,于H2O2刺激前加入PI3K信号通路阻断剂LY294002(LY)预处理10 min,加入20、50μg/m L ECCL预处理24 h。MTT法检测细胞存活率,比色法测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,Western blotting检测细胞内p-Akt、p-e NOS蛋白表达。结果与模型组比较,ECCL可明显增加H9c2细胞H2O2损伤后细胞存活率(P0.01),增加SOD活力,降低MDA、LDH水平,增加p-Akt和p-e NOS蛋白表达(P0.05、0.01),LY可阻断ECCL对H9c2的上述作用。结论 ECCL能够减轻H2O2所致的H9c2细胞损伤,可能是通过激活PI3K通路促进其下游因子Akt和e NOS磷酸化发挥作用。     

细辛水提物与尼莫地平合用的镇痛作用及其机制研究

目的 研究细辛水提物和钙通道拮抗剂尼莫地平合用的镇痛作用及其机制。方法 40只健康Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组、细辛组、尼莫地平组和联合用药组,除对照组外其他各组大鼠均进行结扎坐骨神经制备神经病理性疼痛模型。各组大鼠手术后ig给药2周,细辛组大鼠给予细辛水提物（200 mg/kg,相当于细辛药材2 g/kg）,尼莫地平组大鼠给予尼莫地平（40 mg/kg）,联合给药组大鼠给予尼莫地平（40 mg/kg）30 min后给予细辛水提物（200 mg/kg）,对照组和模型组给予生理盐水。各组大鼠分别于手术前1 d及手术后第1、3、5、9、14 天给药30 min后分别测量热缩足潜伏期以及机械刺激缩足反射阈值。结果 各组大鼠手术前的热缩足潜伏期以及机械刺激缩足反射阈值的差异无统计学意义(P＞0.05),手术后各时间点模型组大鼠的热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均较对照组显著降低（P＜0.05、0.01）,细辛组和尼莫地平组大鼠的热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均从术后第5天起较模型组大鼠显著升高（P＜0.05、0.01）,联合用药组大鼠热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值从手术后第3天起均较模型组大鼠显著升高（P＜0.05、0.01）,从手术后第5天起均较细辛组和尼莫地平组高（P＜0.05、0.01）。联合用药组的镇痛作用强于细辛水提物和尼莫地平。结论 细辛水提物和尼莫地平合用具有镇痛作用。