| ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１胞外区融合蛋白的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 张大为,朱 进,陈仁杰,冯振卿.ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１胞外区融合蛋白的表达及纯化[J].南京医科大学学报,2008,28(4):420-423. |
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| 作者姓名： | 张大为 朱 进 陈仁杰 冯振卿 |
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| 作者单位： | [1]南京医科大学第二附属医院耳鼻咽喉科,江苏南京210029 [2]南京军区军事医学研究所,江苏南京210002 [3]南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏南京210029 |
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| 基金项目： | 南京医科大学校科研和教改项目
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南京军区122工程资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体.方法:用BamH I和EcoR I将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMPI双酶切后,克隆到pGEx4T-2中.重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westemblot法检测鉴定.结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确.SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2 ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合.结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合.
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| 关 键 词： | 鼻咽癌 EB病毒 LMP1 胞外区 重组基因 |
| 文章编号： | 1007-4368(2008)04-0420-04 |
| 收稿时间： | 2007/10/20 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2007年10月20 |
Expression and purification of GST-LMP-1 extracellular domain fusion protein of EB virus |
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| ZHANG Da-wei,ZHU Jin,CHEN Ren-jie and FENG Zhen-qing.Expression and purification of GST-LMP-1 extracellular domain fusion protein of EB virus[J].Acta Universitatis Medicinalis Nanjing,2008,28(4):420-423. |
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| Authors: | ZHANG Da-wei ZHU Jin CHEN Ren-jie and FENG Zhen-qing |
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| Institution: | ZHANG Da-wei,ZHU Jin1,CHEN Ren-jie,FENG Zhen-qing2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | nasopharyngeal carcinoma epstein-barr virus latent membrane protein 1 extracellular peptide recombinant gene |
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