小叶黑柴胡野生居群生物学特性与活性成分含量对典型生境的响应

目的 探索不同微生境对小叶黑柴胡Bupleurum smithii var.parvifolium药材形成的影响,为其驯化栽培奠定基础。方法 通过样方调查对不同生境中小叶黑柴胡种群结构、优势物种、药用植物多样性及柴胡表观形态特征进行统计分析;采用烘干法对土壤水分含量进行测定,采用550℃烧失量法对土壤有机质含量进行测定;采用HPLC法对柴胡中代表组分柴胡皂苷成分含量进行测定。结果 哈思山地区野生小叶黑柴胡分布的典型生境有3个类型,分别为戈壁型、草甸型和灌丛型。戈壁型生境包括流石滩亚型和岩壁缝隙亚型,生境中无优势植物种群,戈壁型柴胡以匍匐型为主,地上部分生物量相对较少,地下生物量相对较多,活性成分含量相对较高;草甸型生境包括低海拔和高海拔2个亚型,低海拔草甸优势植物为地榆,高海拔草甸优势植物为珠芽蓼;灌丛型包括叉子圆柏灌丛、鲜黄小檗灌丛和峨眉蔷薇灌丛,草甸型和灌丛型柴胡以直立型为主,地上部分生物量相对较多,活性成分含量相对较低。结论 小叶黑柴胡是一种极具开发潜力且对恶劣生境适应性极强的药用植物,不同微生境条件下小叶黑柴胡的表观形态和药材品质不同,为其驯化栽培和野生资源保护奠定了一定基础。     

多指标正交试验优选鳖血柴胡的炮制工艺

目的: 优选鳖血柴胡的炮制工艺。 方法: 以柴胡皂苷a,c,d及醇溶性浸出物含量的综合评分为指标,通过正交试验考察炮制时间、鳖血用量、炮制温度对鳖血柴胡炮制工艺的影响。采用HPLC测定柴胡皂苷a,c,d的含量,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~50 min,25%~90%A;50~55 min,90%A),检测波长210 nm。 结果: 炒制时间对炮制工艺具有显著性影响。最佳炮制工艺为150 ℃炮制10 min,加鳖血量0.05 mL ·g^-1。醇溶性浸出物及柴胡皂苷a,c,d质量分数分别为12.42%,0.85%,0.23%,0.90%。 结论: 优选的炮制工艺合理可靠、重复性好,为规范鳖血柴胡饮片的炮制加工提供参考。     

柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的功效网络研究

目的运用网络药理学分析方法,明确柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的作用机制。方法运用TCMSP、TCMID数据库锁定柴胡桂枝干姜汤7味药的药物靶标,TTD、DrugBank、PubMed数据库查找失眠的疾病靶点,构建"疾病-方剂-靶点"网络,用STRING和Cytoscape分析软件对其关键靶点进行富集分析,明确作用机制。结果柴胡桂枝干姜汤蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络包含靶标640个,失眠的PPI网络包括靶标175个,富集分析得29个关键靶标和其间80条互作关系;GO富集分析及KEGG途径分析结果显示柴胡桂枝干姜汤中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、槲皮素、碳酸钙、6-姜辣醇、山柰酚、汉黄芩素等171个活性成分主要通过CACNA1C、GABRA1、GABRA2、GABRB3、GABRA3等29个关键靶标及突触信号传导、膜电位的调节、G蛋白偶联受体信号通路等生物过程,神经递质受体活性、离子门控通道活动、GABA-A受体活性等分子功能,质膜、突触等细胞组成作用于神经活性配体-受体相互作用、逆行内源性大麻素信号传导、5-羟色胺能突触等多条作用通路发挥治疗失眠作用。结论柴胡皂苷a、柴胡皂苷d等171个活性成分是柴胡桂枝干姜汤治疗失眠的药效物质基础,神经活性配体-受体相互作用等通路和CACNA1C等29个靶标构成了其发挥"疏肝健脾、调和阴阳"的功效作用网络,为临床合理运用柴胡桂枝干姜汤治疗失眠提供了网络药理学证据。     

柴胡皂甙d对实验性膜性肾炎疗效及作用机理研究

本文观察了从中药柴胡中提取的单体成分柴在皂甙ｄ（ＳＳｄ）对被动物Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎（ＰＨＮ）的疗效。结果提示ＳＳｄ的抗肾炎作用与其促进内源性糖皮质激素分泌、抑制ＰＬＡ２活性、阻止ＩｇＧ和Ｃ３在肾小球内沉积、提高ＳＯＤ活性及改善异常的脂质代谢等作用密切相关。     

采用一测多评法同时测定人参-柴胡药对及其制剂中5种皂苷成分

目的采用一测多评法对临床常用药对人参-柴胡及其制剂中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、柴胡皂苷a和柴胡皂苷d进行测定。方法以人参皂苷Rg1为参照,建立该成分与其他4种皂苷成分间的相对校正因子,并以此计算其他4种皂苷成分的含量;同时采用外标法实测5种成分的含量进行对比。使用不同色谱柱确定相对保留时间,评价一测多评法在人参-柴胡药对中测定皂苷成分的可行性和准确性。结果建立了5种皂苷成分的定量控制方法,方法学考察结果良好。采用一测多评法及外标法测定人参-柴胡药对、小柴胡汤、开心解郁方中5种皂苷成分,采用t检验分析,一测多评法与外标法结果无显著性差异。结论一测多评法适用于常用药对人参-柴胡中皂苷成分的含量测定,可为复方中人参-柴胡药对有效成分的测定提供借鉴,以及为复方质量控制方法的建立提供参考。     

贵州苗药吉祥草中皂苷类化学成分研究

目的研究贵州苗药吉祥草Reineckia carnea中的皂苷类成分。方法用95%乙醇提取,萃取后利用常规硅胶柱、大孔树脂、ODS C18、Sephadex LH-20及Pre-HPLC等进行分离纯化,通过理化性质、HR-ESI-MS和核磁波谱进行结构鉴定。结果从吉祥草的正丁醇部位分离得到10个皂苷类化合物,分别鉴定为(1β,3β,16β,22S)-cholest-5-ene-1,3,16,22-tetrol-1,16-di-(β-D-glucopyranoside)(1)、(1β,3β,16β,22S)-cholest-5-ene-1,3,16,22-tetrol1-[O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]-16-(β-D-glucopyranoside)(2)、(20S,22R)-spirost-25(27)-en-1β,3β,4β,5β-tetraol-5-O-β-D-glucopyranoside(3)、kitigenin 5-O-β-Dglucopyranoside(4)、蜘蛛抱蛋苷A(5)、(17,20-S-trans)-5β-pregn-16-en-1β,3β-diol-20-one-1-O-β-D-xylopyranosyl-(1→2)-[α-L-rhamnopyranosyl]-3-O-α-L-rhamnopyranoside(6)、薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、麦冬皂苷T(8)、prosaikogenin D(9)、柴胡皂苷b2(10)结论化合物3、5、8~10均为首次从吉祥草中分离得到,为进一步阐明和开发吉祥草中皂苷类成分提供了一定的参考。     

柴胡皂苷D通过诱导C2-M期阻滞抑制结直肠癌SW480细胞的增殖

目的:观察柴胡皂苷D（SSD）对于结直肠癌肿瘤细胞增殖的影响并初步探索其潜在的分子机制。方法:运用MTT、细胞计数试验及克隆形成试验观察SSD对细胞增殖的影响。流式细胞仪检测SSD对细胞凋亡及周期分布情况的影响。RT-PCR和Western-blot技术检测G2-M周期阻滞关键调控因子在SW480细胞中的表达。结果:MTT试验发现SSD能够显著抑制结直肠癌肿瘤细胞SW480的增殖,而对正常结直肠细胞FHC的增殖无明显影响。细胞计数试验和克隆形成试验进一步验证了SSD对于SW480细胞增殖的影响(P<0.05)。流式细胞术检测发现SSD不影响细胞的凋亡(P>0.05),但却显著诱导G2-M周期阻滞(P<0.05)。SSD在mRNA水平下调了G2-M周期调控因子CCNA1、CCNA2、CCNB1和CCNB2的表达(P<0.05);在蛋白水平,CCNA2、CCNB1和p34/cdc2明显被下调,p-H3S10上调,p21WAF1/CIP1被明显上调。结论:SSD可以通过上调p21WAF1/CIP1的表达诱导G2-M周期阻滞来抑制结直肠肿瘤细胞SW480的增殖。     

固相萃取-高效液相色谱法测定大鼠血浆中柴胡皂苷d的浓度

目的:建立用固相萃取-高效液相色谱法定量大鼠灌服柴胡水提液后血浆中柴胡皂苷d的方法。方法:大鼠灌服柴胡水提液后在不同时间点眼眶静脉取血,血浆经Waters OasisHLB固相萃取小柱纯化,洗脱液用氮气吹扫至干,流动相溶解后进样;用YMC-Pack ODS C18色谱柱以及乙腈-水为流动相的色谱体系检测其中柴胡皂苷d的含量。结果:柴胡皂苷d在1.28～81.60μg·mL-1的浓度范围内线性关系良好(相关系数r=0.997 8),定量下限为1.28μg·mL-1。相对回收率为94.6%～102.8%,日间、日内RSD均小于8%。结论:该方法灵敏、准确,可用于大鼠血浆中柴胡皂苷d的浓度测定。     

北京东灵山与雾灵山地区不同生境下柴胡中柴胡皂苷的差异

目的:探讨北京东灵山与雾灵山地区不同生境柴胡化学成分的差异,为认识和发展道地柴胡提供理论依据.方法:对东灵山和雾灵山不同生境类型的柴胡居群进行取样,采用HPLC分析不同生境下柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的差异.结果:不同生境下柴胡皂苷含量差异显著,草甸生境下的柴胡皂苷含量较高,而林下生境及灌丛生境柴胡皂苷含量相对较低,经分析柴胡皂苷含量与坡向呈正相关,通风透光的生境条件有利于柴胡皂苷的累积.结论:生境对柴胡皂苷产生与积累起着非常重要的作用,建议考察道地药材,应突破传统区域认识,结合生境层级开展.     

柴胡皂苷防治原发性肝癌机制研究进展

通过回顾分析近年来国内外柴胡皂苷防治肝癌的相关文献,从预防肝癌细胞形成、抑制肝癌细胞增殖、诱导肝癌细胞凋亡与分化、抑制肝癌细胞浸润与转移、增强机体抗肿瘤免疫、逆转肿瘤细胞多药耐药性等六个方面综述了目前对于柴胡皂苷预防与治疗原发性肝癌分子机制的研究进展。柴胡皂苷通过多途径、多靶点防治肝癌,展现出了良好的临床应用前景。