酸枣仁汤治疗原发性肝癌患者肝血不足型失眠的临床研究

目的观察酸枣仁汤治疗原发性肝癌患者肝血不足型失眠的临床疗效及其对神经-内分泌-免疫网络的调节作用。方法将70例原发性肝癌伴肝血不足型失眠患者随机分为治疗组与对照组,每组35例。两组均以常规中西医结合治疗原发性肝癌为基础,治疗组给予酸枣仁汤颗粒剂,对照组给予安慰剂,连续28 d。比较匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表评分、中医证候评分、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、前白蛋白(PAB)、血清5-羟色胺(5-HT)、褪黑素(MT)、白介素-2受体(IL-2R)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化情况。结果 (1)治疗组总有效率88.2%,对照组总有效率27.3%,治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);(2)治疗组治疗后PSQI总分及各成分评分、中医证候评分较对照组及治疗前显著降低(P0.05),各评分治疗前后差值大于对照组(P0.05);(3)治疗组治疗后血清5-HT、MT含量较对照组及治疗前显著升高(P0.05),治疗组血清IL-2R、IL-8、TNF-α含量较对照组及治疗前显著降低(P0.05),以上指标治疗前后差值均大于对照组(P0.05),治疗组治疗后血清IL-6含量与对照组及治疗前比较,差异无统计学意义(P0.05),治疗前后差值与对照组比较无显著差异(P0.05);(4)治疗组治疗后Hb、PAB较对照组及治疗前显著升高(P0.05),治疗前后差值大于对照组(P0.05)。结论酸枣仁汤可有效改善原发性肝癌伴肝血不足型失眠患者的睡眠情况、营养水平以及肝血不足的症状,能提高患者血清5-HT、MT含量,降低血清IL-2R、IL-8、TNF-α含量,调节神经-内分泌-免疫网络,改善肝癌患者体内炎症环境,提示安神以扶正在恶性肿瘤虚证中具有辅助治疗作用。     

酸枣仁生品及其炮制品的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立酸枣仁生品及其炮制品的HPLC-ELSD指纹图谱,并对酸枣仁生品和炮制品进行对比研究。方法:采用YMC Triart C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测器为蒸发光散射检测器(ELSD),建立生品酸枣仁和炒酸枣仁指纹图谱的分析方法,并采用LC-MS法对酸枣仁中的化学成分进行分析。结果:12批生品酸枣仁样品中有17个共有峰,12批炒酸枣仁样品中有15个共有峰,各样品图谱与对照指纹图谱的相似度均在0.9以上,从生品酸枣仁样品中成功鉴别出9个化合物。结论:该方法准确可靠、专属性良好,可作为控制生品酸枣仁、炒酸枣仁质量的分析方法,并能很好地区分、鉴别酸枣仁生品和炮制品。     

酸枣仁汤合甘麦大枣汤治疗更年期失眠伴焦躁患者效果观察

目的:观察酸枣仁汤联合甘麦大枣汤治疗更年期失眠伴焦躁的临床效果。方法:选取自愿参加本研究的90例更年期失眠症焦躁患者为研究对象,按照随机对照方法分为中医治疗组和常规治疗组,每组45例。中医治疗组给予酸枣仁汤联合甘麦大枣汤治疗,常规治疗组给予常规西药治疗。比较两组治疗后睡眠质量、焦躁情绪及相关症状改善程度,激素水平差异。结果:两组治疗前的睡眠质量评分、焦虑评分、Kupperman评分及雌二醇、黄体生成素、卵泡生成素等指标比较无显著性差异(P0.05);治疗后,两组睡眠质量评分、焦虑评分、Kupperman评分较治疗前显著降低,且中医治疗组低于常规治疗组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组雌二醇值较治疗前明显升高,黄体生成素、卵泡生成素值较治疗前明显降低,且中医治疗组雌二醇值高于常规治疗组,黄体生成素、卵泡生成素值低于常规治疗组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:采用酸枣仁汤联合甘麦大枣汤治疗更年期失眠伴焦躁患者可明显改善患者睡眠质量,缓解患者焦躁等临床症状,调节患者激素水平,疗效显著。     

《金匮要略》方在绝经综合征中的应用

绝经综合征病机为阴阳失衡。心肺阴虚者,属《金匮要略》"百合病""脏躁"范畴,采用百合地黄汤清心润肺滋阴,甘麦大枣汤养心补脾滋阴。阳虚者,属《金匮要略》"奔豚气"范畴,治宜泻肾水,补心阳,方用茯苓桂枝甘草大枣汤通阳降逆利水。阴血亏虚者,属《金匮要略》"血痹虚劳"范畴,方用酸枣仁汤养血虚敛阴气。气虚卫表不固者,属《金匮要略》"湿病"范畴,方用防己黄芪汤益气实卫除湿。阴阳两虚者,属《金匮要略》"虚劳"范畴,方用桂枝加龙骨牡蛎汤调阴阳和荣卫。     

藿朴夏苓汤治疗早期新型冠状病毒肺炎（COVID-19）湿邪郁肺证物质基础及功效的网络分析

目的筛选藿朴夏苓汤治疗早期新型冠状病毒肺炎(COVID-19)湿邪郁肺证的物质基础,预测其作用机制。方法查阅文献及临床报道分析藿朴夏苓汤与早期COVID-19湿邪郁肺证的方证关系。运用TCMSP数据库筛选藿朴夏苓汤中潜在活性成分,将活性成分与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶、血管紧张素转化酶Ⅱ(ACE2)进行分子对接,根据结合能筛选与两者均有较好结合作用的核心成分。借助Cytoscape软件构建关键成分靶点蛋白互作网络,筛选出核心靶点;通过STRING数据库进行核心靶点的GO分析,Cytoscape软件Clue GO插件进行Pathway、KEGG富集分析。结果方证关系分析藿朴夏苓汤用于治疗早期COVID-19湿邪郁肺证,筛选出藿朴夏苓汤中潜在作用成分12个,核心靶点67个。其中通草中的通脱木皂苷元Ⅰ,茯苓、猪苓中的过氧麦角甾醇,半夏中的黄芩苷与SARS-CoV-2 3CL水解酶、ACE2均具有较好的结合活性。GO、Pathway、KEGG富集分析结果显示藿朴夏苓汤中12个潜在作用成分参与调节刺激反应、信号转导、细胞死亡等生物过程以及白介素信号通路、癌症EGFR信号通路、酪氨酸激酶信号转导途径、编程性细胞死亡途径、MAPK信号通路等。结论藿朴夏苓汤以化湿解毒、宣肺透邪治疗早期COVID-19湿邪郁肺证患者,菲酮、黄芩苷、酸枣仁皂苷、啤酒甾醇、常春藤皂苷元、过氧麦角甾醇、柠檬二烯醇、麦角甾-7,22-二烯-3-酮、通脱木皂苷元Ⅰ、泽泻醇B-23-醋酸酯、泽泻醇B、新橙皮苷可能为其主要的物质基础,通过阻断SARS-CoV-2病毒蛋白合成,阻止病毒进入宿主细胞,通过调控白介素信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、T细胞受体信号通路、C型凝集素受体信号通路,抑制相关炎症因子的表达发挥作用。     

酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠肝脏线粒体能量代谢及其机制的影响

目的 研究酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺模型大鼠肝脏线粒体能量代谢的影响及作用机制。方法 将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组，模型组、舒乐安定组（0.18 mg·kg^-1·d^-1），酸枣仁汤低、高剂量组（6.48，12.96 g·kg^-1·d^-1），除正常组外，其余各组均皮下注射D-半乳糖，于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺，造模结束后各组开始灌胃给药，连续给药7 d。采用透射电镜观察肝脏线粒体形态，采用比色法检测大鼠肝脏三磷酸腺苷（ATP）含量的变化，采用比色法检测大鼠肝脏线粒体呼吸链还原型辅酶Ⅰ（复合物Ⅰ），琥珀酸氧化还原酶（复合物Ⅱ），细胞色素C氧化还原酶（复合物Ⅲ），细胞色素C氧化酶（复合物Ⅳ）活性，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝脏柠檬酸合酶（CS），异柠檬酸脱氢酶（IDH），负责编码ATP合成酶F0亚基的一段核基因（ATP5F1）蛋白的表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠肝脏内线粒体损伤较严重，线粒体发生肿胀、变形，嵴断裂并且数量有一定的减少，与模型组比较，舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组线粒体损伤减轻，肿胀、变形情况显著减少，嵴断裂减少，其中酸枣仁汤高剂量改善较为明显。与正常组比较，模型组大鼠肝脏ATP含量显著降低（P<0.01），线粒体呼吸链复合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ活性均显著降低（P<0.01），IDH，CS，ATP5F1蛋白表达均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，酸枣仁汤高剂量组肝脏ATP含量显著升高（P<0.01），线粒体呼吸链复合物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ活性均明显升高（P<0.05，P<0.01），IDH，CS，ATP5F1蛋白表达均显著升高（P<0.01），舒乐安定组肝脏ATP含量明显升高（P<0.05），线粒体呼吸链复合物Ⅰ，Ⅲ活性显著升高（P<0.01），CS，ATP5F1蛋白表达均显著升高（P<0.01），酸枣仁汤低剂量组肝脏线粒体呼吸链复合物Ⅰ，Ⅲ活性明显升高（P<0.05，P<0.01），ATP5F1蛋白表达明显升高（P<0.05）。结论 酸枣仁汤可以改善老年慢性睡眠剥夺引起的肝脏能量代谢异常，其机制可能与上调线粒体电子链酶活性，CS，IDH及ATP5F1蛋白表达有关。     

酸枣仁汤加味对抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响

目的:观察酸枣仁汤加味对慢性束缚应激抑郁大鼠海马谷氨酸受体表达的影响,探讨其基于谷氨酸受体的抗抑郁机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、酸枣仁汤加味低、中、高剂量组、氯胺酮组,每组10只。除正常组外,其余各组采用慢性束缚应激(CRS)制备大鼠抑郁模型,酸枣仁汤加味低、中、高剂量组分别灌胃酸枣仁汤加味6,12,24 g·kg~(-1),氯胺酮组腹腔注射氯胺酮15 mg·kg~(-1),正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,给药干预21 d。采用Morris水迷宫和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,GluR1,mGluR1,CaMKⅡα和CaMKⅡβ蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组新奇摄食时间及逃避潜伏期显著延长(P0.01),空间探索时间显著缩短(P0.01);模型组大鼠海马组织NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平均显著升高(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα水平均显著降低(P0.01)。与模型组比较,酸枣仁汤加味中、高剂量组新奇摄食时间、逃避潜伏期显著缩短(P0.01),空间探索时间显著延长(P0.01);酸枣仁汤加味中、高剂量组NMDAR1,NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ蛋白表达水平均显著降低(P0.01);而GluR1,CaMKⅡα蛋白表达显著增高(P0.01)。结论:酸枣仁汤加味可显著改善慢性抑郁大鼠行为学,其机制可能与下调NMDAR2A,NMDAR2B,mGluR1和CaMKⅡβ表达水平,上调GluR1和CaMKⅡα表达有关。     

酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺模型大鼠核受体PPARγ及其共激活因子PGC-1α表达的影响＊

目的 研究酸枣仁汤对老年慢性睡眠剥夺模型大鼠核受体PPARγ及其共激活因子PGC-1α表达的影响。方法 将50只雄性Wistar大鼠随机分为环境对照组、模型组、阳性对照组、酸枣仁汤低、高剂量组，除环境对照组外，其余各组均皮下注射D-半乳糖，于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺，造模结束后各组开始灌胃给药，连续给药7天。采用自主活动仪检测大鼠光照环境活动时间、黑暗环境活动时间、总活动时间，采用比色法检测大鼠下丘脑ATP含量的变化，采用Real Time-PCR、Western-blot和免疫组化分别检测大鼠下丘脑核受体PPARγ及其共激活因子PGC-1α mRNA和蛋白表达水平。结果 与环境对照组比较，模型组大鼠光照环境活动时间、黑暗环境活动时间、总活动时间均显著增加（P < 0.01）；与模型组比较，阳性对照组、酸枣仁汤高剂量组光照环境活动时间、黑暗环境活动时间、总活动时间均显著减少（P < 0.05，P < 0.01）；与环境对照组比较，模型组下丘脑ATP含量显著降低（P < 0.01）；与模型组比较，阳性对照组、酸枣仁汤高剂量组下丘脑ATP含量显著升高（P < 0.05）；与环境对照组比较，模型组核受体PPARγ及其共激活因子PGC-1α mRNA和蛋白表达水平显著降低（P < 0.01，P < 0.05）；与模型组比较，阳性对照组、酸枣仁汤高剂量组核受体PPARγ及其共激活因子PGC-1α mRNA和蛋白表达水平显著升高（P < 0.01，P < 0.05）。结论 酸枣仁汤有可能基于PPARγ及其共激活因子PGC-1α同时调控昼夜节律与能量代谢。     

对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠海马CA3区细胞凋亡及caspase-12表达的影响

目的:研究对药酸枣仁(SZS)-合欢花(AJF)对抑郁模型大鼠海马CA3区细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(caspase-12)表达的影响,从内质网应激(ERS)角度探讨其抗抑郁作用机制。方法:将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组(Control)、模型组(CUMS)、对药酸枣仁-合欢花组(SZS+AJF)、盐酸文拉法辛组(Venlafaxine),采用孤养加慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,并用旷场实验评价各组大鼠行为学改变。应用DNA原位末端缺口标记(TUNEL)法检测海马CA3区神经元凋亡情况,应用免疫组化检测海马CA3区caspase-12表达。结果:与Control组比较,CUMS组大鼠旷场实验得分降低,海马CA3区细胞凋亡率及caspase-12表达显著增加。与CUMS组比较,SZS+AJF组、Venlafaxine组大鼠旷场实验得分显著增加,海马CA3区细胞凋亡率及caspase-12表达显著减少。结论:对药酸枣仁-合欢花能显著改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,降低海马CA3区caspase-12表达,抑制海马CA3区细胞凋亡。