不同产地泽泻HPLC指纹图谱建立及模式识别

目的建立不同产地泽泻HPLC指纹图谱,并对其进行模式识别。方法泽泻乙腈提取物的分析采用Hanbon Hedera ODS-2 C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相水-乙腈,梯度洗脱;柱温35℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长210 nm。对结果进行化学模式识别(聚类分析、主成分分析和正交最小二乘法判别分析)。结果 19批四川产地样品指纹图谱中有17个共有峰,11批广西产地样品指纹图谱中12个共有峰,相似度均大于0.94。正交最小二乘法判别分析结合HPLC-MS/MS及对照品比对,筛选出泽泻醇B、泽泻醇A、11-去氧泽泻醇C、23-乙酰泽泻醇B、泽泻醇O、24-乙酰泽泻醇A6种主要差异性成分。结论该方法稳定可靠,可将四川、广西产地泽泻进行明显区分,从而用于该药材的质量控制与评价。     

建泽泻鲨烯合酶原核表达、功能验证及其免疫检测研究

泽泻鲨烯合酶(Ao SS)催化法呢基焦磷酸[(farnesyl diphosphate,FPP)]合成鲨烯,是碳源流向原萜烷型三萜生物合成的关键调节酶。为深入研究Ao SS基因的功能及表达,课题组将前期克隆获得的建泽泻鲨烯合酶基因(accession No.JX866770)的开放阅读框(ORF)构建到原核表达载体p Czn1上,并在大肠杆菌BL21(Roseta)中进行诱导表达,诱导表达出的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,经纯化获得高纯度的目的蛋白;以此目的蛋白进行体外酶促反应验证其功能,其结果显示该目的蛋白具有催化法呢基焦磷酸生成鲨烯的活性;为进一步研究其表达规律,在此基础上,利用该蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体并纯化,ELISA检测抗体效价大于1∶51 200,Western blotting检测表明其具有较好的特异性;用制备得到的抗体免疫检测建泽泻Ao SS在不同组织中的表达情况,结果显示建泽泻块茎中Ao SS表达最高,其次为叶,根中表达甚微。原核表达载体的成功构建、基因功能的进一步验证及快速免疫检测方法的建立,为进一步开展Ao SS基因功能及其调控的研究奠定基础,为泽泻资源性成分原萜烷型三萜的合成生物学应用提供科学依据。     

乐山产川泽泻质量控制研究

乐山产川泽泻的主要成分为23-乙酰泽泻醇B。按《中国药典》（2010版）泽泻含量测定方法比较,对乐山地区不同育苗期、移栽期、采收期的川泽泻进行质量研究。结果显示,在6月25日育苗、8月27日移栽和12月25日采收的乐山产川泽泻的总体质量最佳。     

泽泻的毒副作用及在肾病中的合理应用

中药泽泻在临床疾病中应用颇广,具有抗动脉粥样硬化、治疗肾炎、利尿、抑制结石等诸多作用。体外实验表明,泽泻提取物对肾小管上皮细胞具有肾毒性作用;在动物实验中安全性较好;临床中尚未见明显肝肾毒性报道。本文基于目前泽泻的大量相关研究,分析泽泻的毒副作用及其剂量、炮制、配伍、药物产地、患者个体差异等可能影响因素,对泽泻的药效成分、临床应用与疗效以及安全性进行了阐述,以更好的指导临床安全用药,尤其是在肾脏病领域的合理有效应用。     

川泽泻种子形态和发芽特性研究

目的:研究川泽泻种子形态和发芽特性的差异.方法:采集4个川泽泻地方种,测定其种子净度、千粒重、含水量、生活力和发芽率,研究不同温度对其发芽率的影响.并进一步研究其种子长度、宽度的相关性,以及千粒重、生活力与发芽率之间的相关性.结果:4个川泽泻地方种种子的外观形态和各种物理特性指标都存在显著差异,其中彭山县的种子最大,其长、宽分别为1.882,1.455 mm,千粒重、生活力、发芽率均最高,分别为0.430 8 g,86%,82%.雅安的种子净度最高,含水量最低,依次为92.3%,12.1%.不同温度对其种子的萌发也存在显著差异,不同产地的川泽泻种子发芽率在30℃下均最高.川泽泻种子长度与宽度呈极显著正相关,千粒重分别与其生活力、发芽率均呈显著正相关,用溴麝香草酚蓝法(BTB)法测定的种子生活力与发芽率呈极显著正相关.结论:彭山的种子质量最高,都江堰的次之,五通桥区的最低,这为泽泻的生长发育及栽培生产提供一定的依据.     

TLC法定性鉴别孕坤通胶囊中4味中药

目的:完善孕坤通胶囊的质量标准.方法:采用TLC法分别鉴别孕坤通胶囊中千斤拔、赤芍、枳实、泽泻.结果:各供试品色谱中,在与对照品及对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点,色谱清晰,附近无杂质斑点干扰.结论:本方法专属行强,可更好地控制本品质量,确保其疗效.     

基于TCMGIS的建泽泻产地适宜性分析

目的 为福建泽泻的科学区划及种植提供产地适宜性分析. 方法选取海拔、土壤、降水量、日照、相对湿度等关键生态因子,应用中药材产地适宜性分析地理信息系统(TCMGIS)进行分析. 结果影响福建泽泻种植的生态因素很多,现产地以建瓯市、建阳市、同安县为主. 结论南平、漳州、三明、龙岩地区适宜大面积推广种植泽泻.     

泽泻中二萜成分的结构测定

目的研究我国常用中药泽泻(Alisma orientalis Juzep.)块茎的乙醇提取物的化学成分。方法将乙醇提取物用硅胶柱色谱进行分离纯化,用IR,NMR,MS及CD等方法解析化学结构。结果共分离出3个ent-kaurane二萜化合物(I～III),其结构分别鉴定为16(R)-ent-kaurane-2,12-dione (I),16(R)-3-hydroxy-ent-kaurane-12-one (II),16(R)-ent-kaurane-12-one 3α-O-β-D-xyloside (III)。结论化合物II和III为新化合物,分别命名为泽泻二萜醇(oriediterpenol)及泽泻二萜苷(oriediterpenoside),I为已知二萜kaurane-2,12-dione。     

不同育苗期、移栽期和采收期川泽泻质量变化研究

目的以川泽泻中主要成分23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇A为指标成分,并通过HPLC指纹图谱比较,进行质量制定。方法采用梯度洗脱法进行色谱分离,使用"中药指纹图谱相似度计算软件"和DPS软件进行数据处理。结果在6月25日育苗、9月10日移栽和当年的12月下旬初采收,川泽泻药材的总体质量最佳。结论随着育苗期、移栽期和采收期的后延,川泽泻药材总体质量下降。     

Two new triterpenes from the rhizomes of Alisma orientalis

Two new triterpenoids, 25-anhydro-alisol F (1) and 11-anhydro-alisol F (2), were isolated from the rhizomes of Alisma orientalis. Their structures were elucidated by spectroscopic methods.