基于TGF-β/smad信号通路探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌AGS细胞上皮间质转化过程的影响＊

目的 探究七方胃痛颗粒对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人胃腺癌细胞AGS上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition， EMT）过程的影响及其潜在分子机制。方法 为了探究七方胃痛颗粒对TGF-β1处理的AGS细胞增殖、迁移和侵袭的影响，实验分为四组：AGS细胞对照组，EMT空白模型组，中药血清组，TGF-β/smad通路抑制剂组，分别利用CCK8、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。此外，通过免疫荧光检测EMT过程中相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3）的表达水平。结果 与AGS细胞对照组相比，TGF-β1诱导EMT过程，显著促进AGS细胞增殖、迁移和侵袭，下调了E-cadherin的表达，上调了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达；与EMT空白模型组相比，中药血清组、TGF-β/smad通路抑制剂组显著抑制了细胞增殖、迁移和侵袭，上调了E-cadherin的表达，降低了N-cadherin、14-3-3ζ、Smad2和p-Smad2/3的表达。结论 七方胃痛颗粒通过调控TGF-β/smad信号通路从而抑制人胃腺癌AGS细胞的EMT过程。     

结直肠癌肿瘤组织中TMPRSS4、c-Met、KIF18A表达水平与其病理特性和生存状态的关系

目的探讨结直肠癌肿瘤组织中跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)、间质表皮转化因子(c-Met)、驱动蛋白家族成员18A(KIF18A)表达水平与其病理特性和生存状态的关系。方法选取该院于2015年3月至2017年6月确诊的102例结直肠癌患者作为研究对象,比较癌变组织和癌旁组织TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平的差异,不同病理状态及生存状态患者的TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平的差异,分析患者的病理状态及生存状态与TMPRSS4、c-Met阳性率和KIF18A水平的相关性。结果癌变组织TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平明显高于癌旁组织(P<0.05);不同性别、年龄患者TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),而不同病程、TNM分期、临床分型患者之间比较差异有统计学意义(P<0.05);通过对患者的随访,生存患者61例,死亡患者41例,生存组TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平明显低于死亡组(P<0.05);患者的TNM分期、临床分型、病程及生存状态与TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A的水平呈正相关(r=0.165~0.998,P<0.05)。结论结直肠癌肿瘤组织中TMPRSS4、c-Met阳性率及KIF18A水平与其病理特性和生存状态存在一定的相关性,可作为结直肠癌患者诊断辅助参考之一。     

肾衰宁片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的改善作用及机制研究

目的:探讨肾衰宁片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化(RIF)的改善作用，并分析其可能机制。方法:选取Wistar雄性大鼠45只，随机分为假手术组(S组)、模型组(U组)和治疗组(T组),每组15只。造模成功后，T组从术后的第1日起每日用肾衰宁片0.19 g/(kg·d)灌胃，U组和S组每日给同体积的0.9%氯化钠溶液灌胃。三组大鼠在术后7、14、21 d分别处死5只。检测血清肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)和尿微量白蛋白(mAlb)并进行比较。采用HE染色法观察三组大鼠RIF病变严重程度并进行评分比较。采用Masson染色法观察三组大鼠肾间质胶原体积分数(CVF)变化情况。采用免疫组化染色检测肾间质中Wnt和β-catenin的平均光密度(AOD)并进行比较。结果:术后7、14、21 d, U组血清CREA、BUN水平显著高于S组和T组，且T组高于S组(均P<0.05)。术后7、14 d,三组大鼠尿mAlb水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。术后21 d三组大鼠尿mAlb水平出现显著变化，S组尿mAlb水平最低，T组次之，U组最高，三组比较差异有统计学意...     

人髌下脂肪垫干细胞的分离培养鉴定及初步研究

目的建立人髌下脂肪垫干细胞分离、培养和鉴定的平台，验证其可作为可靠的干细胞来源，并可作为细胞模型参与科学研究。 方法人髌下脂肪垫取自膝关节置换手术患者，经Ⅰ型胶原酶消化，在高糖Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)内扩增，取P5代细胞用于检测其"干性"及三向分化能力。与微尺度支架结合，通过RT－PCR检测成骨基因的表达，应用最小显著性差异法进行组间两两比较，用于验证微尺度支架的成骨诱导特性。 结果人髌下脂肪垫干细胞具备间充质干细胞相关特性，包括黏附贴壁性；成脂肪、成软骨及成骨分化；表达相关表面标记，如分化抗原簇(CD)73、CD90和CD105；不表达造血细胞系的分子表面标记，如c-kit、CD14、CD11b、CD34、CD45、CD19、CD79和人白细胞抗原(HLA)-DR。本课题中人髌下脂肪垫来源干细胞成功作为一种干细胞模型，证明HaCG微尺度支架具备成骨诱导特性，表现为三组中成骨基因ALP、COL1、Runx2表达差异有统计学意义(分别为F＝150，P<0.01；F＝68，P<0.01；F＝16，P<0.01)。HaCG微尺度支架组高于纯明胶微尺度支架组及二维培养组，纯明胶微尺度支架组高于二维培养组(P值均小于0.05)。 结论人髌下脂肪垫干细胞分离、培养和鉴定平台的建立，未来可作为细胞模型应用于多种不同实验。     

胃息肉与胃间质瘤的CT鉴别诊断

【摘要】目的：探讨CT在胃息肉（GP）与胃间质瘤（GST）鉴别诊断中的价值。方法：回顾性分析经手术病理证实且肿瘤最大径≤2cm的27例GST和15例GP患者的CT表现，对肿瘤的大小、位置、形态、生长方式、强化方式、强化程度、囊变、钙化、溃疡以及患者临床资料进行评估。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析肿瘤CT的相关连续变量鉴别诊断GP与GST的效能。结果：GP组与GST组的形态、强化方式、囊变、钙化及患者的年龄、性别、临床症状差异均无统计学意义（P值均＞0.05），肿瘤指标铁蛋白水平在两组间的差异有统计学意义（P＜0.05）。GP组与GST组的肿瘤长径（LD）、短径（SD）、位置、生长方式、静脉期CT值和静脉期增强幅度的差异有统计学意义（P值均＜0.05）。ROC曲线分析结果显示当LD＜1.5cm时，ROC曲线下面积、诊断敏感度、特异度分别为0.686、73.3%（11/15）、59.3%（16/27）；当SD＜1.2cm时，ROC曲线下面积、诊断敏感度、特异度分别为0.758，80.0%（12/15），66.7%（18/27）；当静脉期CT值＞64.4HU时，ROC曲线下面积、诊断敏感度、特异度分别为0.659、93.3%（14/15）和40.7%（11/27）；当静脉期增强幅度CT值＞34.3HU时，ROC曲线下面积、诊断敏感度、特异度分别为0.663、80.0%（12/15）、51.9%（14/27）。结论：患者的铁蛋白水平正常，以及CT特征中的肿瘤位于胃窦部、呈腔内生长、有蒂、LD＜1.5cm、SD＜1.2cm、静脉期CT值＞64.4HU和静脉期增强幅度CT值＞34.3HU时，倾向于GP的诊断，有助于GP与GST的鉴别诊断。     

张忠德以甄氏平调五脏法治疗间质性肺疾病经验

张忠德教授以甄氏平调五脏法辨治间质性肺疾病,强调治疗时不应将病位局限在肺,而应洞察病因,探寻失衡脏腑所在,重视五脏的整体恒动性,治以平调五脏、恢复其动态平衡。甄氏平调五脏法已反复应用于间质性肺疾病的治疗中,临床疗效显著。     

补阳还五汤对特发性肺纤维化模型大鼠肺组织内皮间质转化的影响及其机制研究

目的:探讨补阳还五汤对特发性肺纤维化(IPF)模型大鼠肺组织内皮间质转化(EndMT)的影响,并探讨其可能机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组[0.405 mg/(kg·d)]和补阳还五汤低、中、高剂量组[6.435、12.87、25.74g/(kg·d),以生药总质量计],每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均于气管内注射博来霉素以复制IPF模型。自造模后第2天起,正常组和模型组大鼠均灌胃水[10 m L/(kg·d)],各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续28 d。末次给药24 h后,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中内皮细胞标志物[血小板内皮细胞黏附分子1、血管内皮细胞钙黏蛋白]和间质细胞标志物[α-平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞特异性蛋白1]的表达情况,采用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中Notch4、DLL4的表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织中内皮细胞标志物的表达水平均显著降低,间质细胞标志物以及Notch4、DLL4的表达水平均显著升高(P<0.01)。各给药组大鼠肺组织中内皮细胞标志物的表达水平均显著高于模型组,补阳还五汤低剂量组上述指标显著低于地塞米松组;间质细胞标志物以及Notch4、DLL4的表达水平均显著低于模型组,补阳还五汤低剂量组上述指标显著高于地塞米松组(P<0.05或P<0.01)。结论:补阳还五汤可通过干预EndMT来减轻大鼠的IPF,其机制可能与抑制DLL4/Notch4信号通路有关。     

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响

目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径的影响,探讨其减少细胞外基质(ECM)的沉积,抗肾小管间质纤维化(TIF)及延缓CRF进展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机将分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠则用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。造模成功后所有大鼠改用常规饲料,正常组和模型组大鼠给予20 mL·kg~(-1)生理盐水灌胃;复肾功方低、中、高剂量组大鼠则按体质量分别灌胃4,8,16 g·kg~(-1)复肾功方水煎剂,1次/d,连续灌胃30 d。实验结束后,马松(Masson)染色观察大鼠肾组织病理形态学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织Wnt4,β-catenin mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Wnt4,β-catenin,基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白的表达,免疫组化检测肾组织Wnt4,β-catenin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小管间质纤维化明显增多,肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白的表达均显著升高(P0.01);与模型组比较,复肾功方各组大鼠肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白表达均明显降低(P0.05)。结论:复肾功方减少ECM的沉积、抗肾小管间质纤维化、延缓CRF进展可能与抑制Wnt/β-catenin信号途径的激活有关。     

上皮-间质转化在子宫腺肌病中作用的研究进展

子宫腺肌病(ADS)是子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层导致的以子宫局灶或弥漫性增大为主要改变的良性疾病,其具体发病机制尚不清楚。目前多数研究者认为ADS是基底层内膜细胞增生、侵入到肌层间质的结果。在上皮-间质转化(EMT)过程中,上皮细胞失去细胞极性,细胞间紧密连接和黏附连接减弱,获得了浸润性和游走迁移能力,成为具有间质细胞功能和特性的细胞。EMT在肿瘤形成中赋予细胞迁移、浸润的能力,而ADS发生、发展过程中子宫内膜细胞侵入肌层的生物学行为与之非常相似。已有研究表明EMT在ADS形成中具有重要作用。目前ADS的临床治疗面临较多的挑战,因此阐明ADS的发生机制是寻求临床早期预防、治疗ADS有效方法的关键。