胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达的临床意义

目的：探讨胃癌患者根治术后腹腔冲洗液中CEA mRNA表达情况及其临床意义。方法: 回顾性分析了2013 年1 月至2017 年12 月在南京大学医学院附属鼓楼医院接受胃癌根治切除术后进行腹腔灌洗液CEA mRNA检测的139 名患者的病历资料，并进行术后常规随访。用RT-PCR检测139 胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达情况。卡方检验分析腹腔灌洗液中CEA mRNA表达与临床基本特征、组织病理学资料、血液学指标及复发方式之间的关系。采用Logistic 单因素及多因素回归分析筛查影响CEA mRNA表达水平的因素。结果：139 名患者中44 名（31.7%）患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性。分析显示，胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达与性别、年龄、病理分级、Lauren 分型和HER2、EGFR、VEGFR等标记物间均没有明显的关联（均P>0.05），与病理类型、脉管是否侵犯、局部浸润深度、淋巴结转移程度和临床AJCC 分期有明显的关联（均P<0.05）。CEA mRNA阳性患者腹膜复发率明显高于阴性患者（P=0.012）。Logistic 单因素回归分析显示，印戒细胞癌（P=0.04，HR=2.810，95% CI: 1.050~7.520）、T 分期（P=0.016，HR=6.329，95% CI: 1.417~28.264）、N 分期（P=0.022，HR=3.068，95% CI: 1.172~8.027）、AJCC分期（P=0.016 ，HR=3.971 ，95% CI: 1.295~12.173 ）、神经侵犯（P=0.002 ，HR=6.738，95% CI: 1.995~22.757）、脉管侵犯（P<0.001，HR=16.36，95% CI: 3.85~69.512）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的危险因素。Logistic 多因素回归分析显示，经过对其他因素的校正，脉管侵犯（P<0.001，HR=21.314，95% CI: 4.21~107.907）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的独立危险因素。结论：胃癌腹腔灌洗CEA mRNA阳性的患者腹膜复发转移风险高且预后不良，应考虑包括腹腔局部治疗在内的更加积极的抗肿瘤治疗。     

癌胚抗原、糖类抗原199及甲胎蛋白联合检测对结直肠恶性肿瘤的诊断价值分析

目的探讨癌胚抗原(CEA)、糖类抗原199(CA199)及甲胎蛋白(AFP)联合检测对结直肠恶性肿瘤的诊断价值。方法选取该院2017年6月-2018年5月收治的127例结直肠病变患者作为研究对象,根据内镜及病理结果分为结直肠恶性肿瘤组(n=78)及结直肠良性病变组(n=49),选取同期于该院体检的50例健康者作为对照组。所有入选者均行血清CEA、CA199及AFP检测,对比3组CEA、CA199及AFP水平;对比不同分期结直肠恶性肿瘤组患者CEA、CA199及AFP水平;对比3项指标单独检测及联合检测的灵敏度及特异度。结果结直肠恶性肿瘤组患者CEA、CA199及AFP水平均较结直肠良性病变组及对照组高,差异有统计学意义(P0.05);结直肠良性病变组患者CEA、CA199及AFP水平均较对照组高,差异有统计学意义(P0.05);I、II期组患者的血清CEA及CA199水平较II、IV期组低,差异有统计学意义(P0.05);CEA、CA199及AFP联合检测准确度、灵敏度及特异度均较3项指标单独检测高,差异有统计学意义(P0.05)。结论结直肠恶性肿瘤患者采用CEA、CA199及AFP联合检测诊断价值较高,可有效提升诊断准确率、灵敏度及特异度。     

黄芪丹参对多囊卵巢综合征大鼠雄激素/胰岛素受体表达影响的研究

目的：研究黄芪联合丹参对多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠雄激素(AR)及胰岛素受体（INSR）表达的影响。方法：通过对大鼠注射外源性雄激素建立高雄激素无排卵模型，将建模成功的大鼠随机分为黄芪组、丹参组、黄芪＋丹参联合组以及模型组，每组10只，分别以黄芪、丹参、黄芪＋丹参联合用药行不同干预治疗，模型组用生理盐水灌胃。比较各组大鼠血清雄激素、胰岛素水平；卵巢AR、INSR mRNA及蛋白水平。结果：1）与模型组比较，黄芪组血清睾酮水平明显下降，丹参组血清胰岛素水平明显下降；联合组血清睾酮及胰岛素水平均明显下降。2）与模型组比较，黄芪组INSR蛋白水平明显下降，丹参组INSR蛋白水平明显上升；黄芪＋丹参联合组AR蛋白水平明显下降，同时INSR蛋白水平明显升高。3）与模型组比较，黄芪组AR mRNA水平明显下降，丹参组INSR mRNA水平明显上升；黄芪＋丹参联合组AR mRNA水平明显下降，同时卵巢INSR mRNA水平明显升高。结论：黄芪可改善PCOS的高雄激素状态，丹参可改善PCOS的高胰岛素状态，联合用药兼具抗雄激素及降低胰岛素的作用，AR、INSR表达的改变是其可能的作用机制之一。     

外周血miR-150-5p、SOCS1 mRNA对类风湿关节炎“病”“证”诊断意义的初步探讨＊

目的 探讨类风湿关节炎患者外周血miR-150-5p、细胞因子信号抑制因子1（suppressor of cytokine signaling 1，SOCS1）mRNA的表达及对类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA）疾病诊断、中医证型判断的意义。方法 纳入符合诊断标准的RA患者57例及健康对照组19例，根据《22个专业95个病种中医诊疗方案》有关RA的中医证候诊断标准，判断RA的中医证型。qPCR检测RA患者及健康对照组miR-150-5p、SOCS1mRNA的相对表达水平，同时检测血常规、肝功能、肾功能等常规指标。双荧光素酶分析方法判断两者是否存在靶向关系。统计分析miR-150-5p、SOCS1 mRNA对RA疾病的诊断意义及其与中医证型的相关性。结果 RA患者外周血miR-150-5p的相对表达水平下调，低于正常人群（t = -19.019，P < 0.05）；其表达水平随疾病活动度升高，有下降趋势；患者外周血SOCS1 mRNA的相对表达水平上调，低于正常人群（t = 5.333，P < 0.05）；其表达水平随疾病活动度升高，有上升趋势。MiR-150-5p与SOCS1 mRNA有靶向结合关系（P < 0.05）。通过AUC曲线比较，miR-150-5p的相对表达水平区分RA的敏感性及特异性分别为98.1%、92.1%（AUC = 0.972，P < 0.05）；SOCS1 mRNA的相对表达水平无法区分RA（AUC = 0.472，P > 0.05）。RA患者中miR-150-5p的相对表达水平低于3.06，RA患者风湿痹阻证、寒湿痹阻证的相对风险分别为8.33、250.00（P < 0.05）。结论 miR-150-5p、SOCS1 mRNA在RA患者中有差异性表达，且有靶向结合关系。miR-150-5p可能是RA的疾病诊断及中医风湿痹阻证、寒湿痹阻证证型诊断的潜在生物标志物。     

糖尿病肛漏创面应用美洲大蠊提取液的lncRNA高通量测序及维恩图分析＊

目的 基于高通量测序及维恩图预测美洲大蠊提取液促进糖尿病肛漏创面愈合的顺、反式lncRNA及Pathway。方法 选取湖南中医药大学第二附属医院收治的糖尿病肛漏患者术后创面12例，利用高通量测序技术检测6例术后创面组（A组）和6例术后创面应用美洲大蠊提取液创面组（B组）中lncRNAs和mRNAs表达，进行GO分析和KEGG通路分析，构建lncRNA-mRNA的共表达网络图，并通过Cis-及Trans-预测与创面愈合相关lncRNA。结果 实验组差异表达的lncRNAs2242个（上调649个，下调1593个），mRNAs有13186个（上调5162个，下调8024个）。GO分析发现差异表达的lncRNA-cis主要富集在表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等；差异表达的lncRNA-trans主要富集在细胞代谢过程、蛋白质结合、细胞内部分等。通过KEGG通路分析，筛选出与本研究相关的3条通路：IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway；lncRNA靶标基因预测中最终筛选出3个lncRNA（ENST00000443364、ENST00000576797、ENST00000620167），进行PCR验证，lncRNAENST00000443364、ENST00000576797与芯片结果一致。结论 美洲大蠊提取液可能通过lncRNAENST00000443364、ENST00000576797顺式及反式调控靶标基因，影响表皮细胞分化、上皮细胞分化、细胞代谢过程的调节等功能以及影响IBD、MAPK signaling pathway、AMPK signaling pathway促进糖尿病肛漏创面愈合。     

血清异常凝血酶原检测对原发性肝癌诊断的临床价值

  目的   分析血清异常凝血酶原（protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ）对原发性肝癌诊断的临床价值及意义。   方法   选取昆明医科大学附属曲靖医院诊治的150例患者，分为慢性乙型肝炎组50例，慢性丙型肝炎组50例，原发性肝癌组50例，同期选取50例健康体检者作为正常对照组。分别采用日本LUMIPULSE G1200全自动免疫分析仪检测血清PIVKA-Ⅱ浓度，德国罗氏Cobas e601全自动电化学发光免疫分析仪检测血清甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）浓度。   结果   原发性肝癌组血清PIVKA-Ⅱ和AFP浓度均明显高于慢性肝病组和正常对照组（P < 0.05）。PIVKA-Ⅱ诊断原发性肝癌的敏感性为94.0%，特异性为95.3%；AFP诊断原发性肝癌的敏感性为76.0%，特异性为90.0%。受试者工作特征曲线（ROC）分析结果显示，PIVKA-Ⅱ和AFP诊断原发性肝癌的曲线下面积分别为0.963和0.848。   结论   血清PIVKA-Ⅱ诊断原发性肝癌的临床价值优于AFP，值得临床研究推广。      

肿瘤标志物升高与胰十二指肠切除术后恶性肿瘤短期复发的关系

目的探讨肿瘤标志物升高与胰十二指肠切除术(PD)后恶性肿瘤短期复发的关系。方法选取2013年1月至2016年7月在郑州大学第一附属医院接受PD手术的167例恶性肿瘤患者。随访并记录术后1 a复发情况及肿瘤标志物[糖类抗原199(CA199)、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)及甲胎蛋白(AFP)]检测结果,分析肿瘤标志物升高与患者术后恶性肿瘤短期复发的关系。结果术前CA199、CEA升高均与术后1 a内肿瘤复发有关(均P<0.05);术前CA125、AFP升高均与术后肿瘤短期复发无关(均P>0.05)。术前CA199、CEA升高均是术后肿瘤短期复发的危险因素(均P<0.05);术后即服化疗药物可能是术后肿瘤短期复发的保护因素(P<0.05)。结论术前CA199、CEA升高均是术后肿瘤短期复发的危险因素,术后即服化疗药物可延长患者的无瘤生存时间。     

氯化铝染毒对大鼠海马APP基因甲基化的影响

目的观察氯化铝(AlCl_3)对大鼠海马淀粉样前体蛋白(APP)启动子区甲基化及β淀粉样蛋白(Aβ)含量的影响。方法健康6月龄雄性SPF级SD大鼠40只,分成4组(正常对照组和AlCl_3低、中、高剂量组),每组10只,各组分别腹腔注射AlCl_30、10、20和30 mg/kg组,正常对照组注射相应体积生理盐水,连续5天,休息2天,共8周。甲基化特异性PCR法(MSP)检测海马APP启动子区的甲基化状态,实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定APP mRNA表达水平,ELISA法测APP、Aβ_(42)蛋白表达量。结果随着AlCl_3浓度的增加,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P0.05),AlCl_3中、高剂量组穿越平台的次数明显减少(P0.05);AlCl_3染毒组海马APP启动子区甲基化检出率降低(χ~2=27.61,P0.05),其中,高剂量组APP甲基化的检出率低于其余3组(P0.01),APP甲基化的检出率随AlCl_3染毒剂量增加而降低的趋势(趋势χ~2=19.08,P0.01)。各AlCl_3染毒组APP mRNA的表达水平高于生理盐水组(F=8.973,P0.05)。与正常对照组比较,各AlCl_3染毒组大鼠海马APP、Aβ_(42)蛋白浓度均增高(F=11.14,P=0.032;F=17.82,P=0.018)。与低剂量组相比,中剂量组APP蛋白表达量增加,高剂量组APP、Aβ_(42)蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(P0.05)。Aβ_(42)蛋白免疫组化法检测结果示,中、高剂量组海马神经细胞内外出现棕黄色物质,考虑有Aβ的沉积。结论氯化铝染毒可引起大鼠海马APP启动子甲基化水平降低,进而影响APP mRNA表达水平增高,海马组织APP表达量增多,从而导致Aβ产生增多而沉积。