临产后子宫体部平滑肌高表达HSP27和αB-crystallin

 ［摘要］目的:研究临产前后子宫体部平滑肌热休克蛋白27（HSP27）和α-晶体蛋白B链（αB-crystallin）的表达变化,探讨其在临产后子宫平滑肌收缩中的可能作用。方法:采用比较蛋白质组学技术鉴定出足月未临产和自然临产人子宫体部平滑肌中HSP27和αB-crystallin蛋白存在差异性表达,应用RT-PCR、免疫组化和免疫印迹方法对临产前后子宫体部平滑肌中HSP27蛋白的表达进行验证。结果:临产后子宫体部平滑肌高表达HSP27和αB-crystallin（P<0.05）。足月未临产和临产人子宫体部平滑肌双向凝胶电泳图谱均存在4个分子量相等、等电点不同的HSP27蛋白斑点,ImageMaster 2D Platinum 软件分析仅有1个HSP27蛋白斑点具有显著差异（P<0.05）,余3个HSP27蛋白斑点无显著差异（P>0.05）。RT-PCR、免疫组化和免疫印迹对HSP27蛋白验证结果与蛋白质组学一致。结论: HSP27和αB-crystallin蛋白在临产后人子宫体部平滑肌高表达,提示这2个小分子热休克蛋白可能参与了临产后子宫体部平滑肌细胞的收缩事件。     

晶体蛋白糖化作用与白内障

晶状体内的糖可与晶体蛋白发生非酶促的糖化反应，使晶体蛋白交联、高分子聚集物的聚集，最终导致糖尿病性白内障和老年性白内障的形成。各种糖均能使晶体蛋白糖化，但其反应速率不同；不同类型的晶体蛋白被糖化的难易程度也不相同。阿司匹林、氨基胍、Ｇｅ－１３２和游离氨基酸等，能够抑制晶体蛋白的糖化，故可能对人障有一定的治疗作用。     

α-crystallin与多种细胞作用的免疫荧光观察

目的 在α-crystallin(α晶体蛋白)对RGCs保护性作用研究并进行定位研究的基础上,对α-crystallin与其他细胞之间的作用相比较,以期揭示α-crystallin与RGCs作用的本质.方法 原代培养大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)、大鼠巨噬细胞、大鼠心肌细胞以及传代培养的ECV细胞株、293细胞细胞株、猪视网膜色素上皮细胞(RPE).应用免疫荧光结合激光共聚焦技术观察α-crystallin与多种细胞的作用.结果 免疫荧光结合激光共聚焦发现α晶体蛋白在3种细胞中有阳性免疫沉积物出现在细胞膜上,其对照组阴性;3种细胞见实验组和对照组均有阳性免疫沉积物出现在细胞浆、细胞核中.结论 α晶体蛋白不是特异性与RGCs发生作用,它是广泛存在的生物学效应物质.α晶体蛋白具有sHSP的抗应激损伤特性,对于不表达内源性α晶体蛋白的同时又是抗损伤能力较弱的RGCs,可通过增加外源性α晶体蛋白达到有效保护RGCs的目的 .     

建立三种基因工程杀蚊幼蓝藻

基因工程杀蚊幼蓝藻的应用，为持续控制蚊幼虫的研究提供了新的途径。本文将携有球形芽孢杆菌晶体蛋白基因的ｐＤＣ２６穿梭质粒，通过接合转移导入多种鱼腥藻中进行表达。结果表明，所得到的基因工程藻Ａｎａｂａｅｎａｓｐ．７１２０Ａｎａｂａｅｎａｃｙｌｉｄｒｉｃａ和Ａｎａｂａｅｎａｓｕｂｔｒｏｐｉｃ对淡色库蚊幼虫具有较高的毒效，２４ｈ半数致死浓度（ＬＣ５０）分别为：３．５１×１０４细胞／ｍｌ、３．３２×１０４细胞／ｍｌ和４．３４×１０４细胞／ｍｌ，其杂合质粒在蓝藻中有很高的稳定性，具备现场应用的要求。     

晶体蛋白基因的转录调控与其超螺旋构形的关系

本文在一个克隆化的基因组系统中,研究了DNA超螺旋结构在α-晶体蛋白基因表达中的调控作用;测定了调节基因区及其对转录过程的影响.结果显示α-晶体蛋白基因可被RF-36蛋白因子特异性激活.足迹法分析表明其调控结合区为核苷酸“-AGGGCTGGAA-”,能与特定的DNA配位体结合,例如抗Z-DNA单克隆抗体和Chiral金属复合物,此种结合表明α-晶体蛋白基因富含“GC”盒,并具有类似“Z”型的DNA构型.所获结果还提示,DNA高度有序的结构在α-晶体蛋白基因的表达调控过程中起重要作用.     

α-晶体蛋白分子伴侣活性在白内障发病中作用的研究进展

α－晶体蛋白是晶状体中重要的成份蛋白质，是由αＡ和αＢ亚基组成的四聚体蛋白。长期被认为其功能主要是维持晶体的结构和屈光性，自１９９２年Ｈｏｒｗｉｔｚ证实α－晶体蛋白具有分子伴侣（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ）作用之后，大量的研究表明α－晶体蛋白能够抑制其它晶状体蛋白和酶的化学性修饰和热凝聚而保护其活性，对长期维持晶体状体的透明性具有重要作用。αＡ亚基Ｃ－端序列和αＢ亚基Ｃ－端的伸展的变化     

βB2晶体蛋白在晶状体内外功能及相关机制研究

βB2晶体蛋白是β族晶体蛋白中含量最多的一种,是脊椎动物眼晶状体中的主要蛋白成分之一,对维持晶状体的透明性和屈光度起主要作用。近年来,研究发现βB2基因不仅在晶状体内表达,而且在晶状体外也有高表达,并行使一定功能,尤其对生殖功能有重要影响。βB2晶体蛋白在晶状体外的功能及相关作用机制成为研究的新热点。该文就βB2晶体蛋白在晶状体内外的功能及可能作用机制进行探讨,以期加深对特殊晶体蛋白新特性的了解。     

Wistar大鼠晶体上皮细胞原代培养及鉴定

目的　探讨Wistar大鼠晶体上皮细胞原代培养方法 ,在形态学方面及晶体蛋白的特异性表达方面 ,对原代和第二代细胞进行鉴定。方法　在无菌条件下 ,取新生Wistar大鼠乳鼠晶体 ,解剖镜下剔除粘附的虹膜及悬韧带 ;室温条件下 ,于终浓度 0 0 8%的胰蛋白酶液中消化 5～ 10min后离心 ,用 199培养液调细胞至适当浓度 ,37℃ 5 %CO2 条件下培养 ,3～ 4d换液 1次 ;待细胞长成连续单层后 ,以 1∶2或 1∶3传代。结果　原代及第二代细胞形态呈典型的上皮细胞表型 ,从第三代起细胞形态发生了较大变化 ,提示细胞已开始分化。以Northern印渍杂交对培养细胞晶体蛋白的特异性表达进行了鉴定 ,发现原代及第二代细胞内仅存在α晶体蛋白mRNA。结论　原代和第二代细胞尚未进入分化状态 ,可用作进一步实验的材料。     

晶体溶解性青光眼三联术18例临床分析

随着白内障手术的广泛开展，越来越多的白内障已在成熟期前手术，白内障过熟期引起的晶体溶解性青光眼已在临床上不多见。但在一些边远穷困地区由于诸多原因，此病仍有发生。它是一种由于晶体皮质溶解，巨噬细胞吞噬晶状体皮质阻塞小梁，另有大分子量可溶性晶体蛋白阻塞房水流出道所致的一种继发性、急性、开角型青光眼。该病以老年人多见，均为白内障过熟期者。为提高对本病的认识，     

人晶体总蛋白质中的43KD多肽

本文使用S.D.S—聚丙烯酰胺凝胶电泳对人胚胎、青年、成年透明晶体及老年性白内障晶体囊上皮、皮质和核三部分的总蛋白质可溶性和脲溶性蛋白质进行了测定,发现在囊上皮部分自胎儿到老年性白内障晶体均有一条43KD多歇.而自14岁开始在晶体皮质及核的可溶性蛋白质中这条43KD多肽带明显加宽.在晶体皮质及核的碌溶性蛋白中这条谱带随年龄增长变得模糊.在老年性白内障晶体中则几乎消失.