登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术的建立

目的建立登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术。方法将4株登革病毒接种于C6/36细胞内,5-7d后染色,观察蚀斑情况并计数。将测得值与组织培养半数感染量测定结果比较。结果登革病毒甲基纤维素微量蚀斑技术重复性好,比组织培养半数感染量法敏感。结论甲基纤维素徽量蚀斑技术可靠易行,可用于登革病毒滴定。     

胰酶浓度对轮状病毒蚀斑形成的影响

轮状病毒属于呼肠孤病毒属（reovirus），是世界范围内导致婴幼儿急性肠炎的主要病原。由于轮状病毒存在众多的血清型，且其基因可重排产生新的基因型，所以在研究过程中保持毒株的纯净十分重要。病毒粒子单克隆的筛选是病毒分子遗传和疫苗毒株研究中一项基本和基础的工作，其中蚀斑实验是非常理想的方法，同时也是轮状病毒滴度测定较为客观和准确的方法。但是，轮状病毒蚀斑形成受毒株、细胞的影响，相关试剂特别是胰酶（pancreatin）的浓度，对实验的稳定性及结果判定影响较大。为此，笔者观察了不同浓度胰酶对轮状病毒蚀斑形成的影响，对胰酶浓度进行优选，以期建立稳定的轮状病毒蚀斑实验方法。     

贵州省成人流行性乙型脑炎病毒中和抗体水平调查

  目的  调查贵州省成人流行性乙型脑炎（乙脑）病毒中和抗体水平。  方法  采用多阶段随机抽样的方法,在2017年5~6月采集3个市（州）6个年龄组健康成人血清共360份,应用蚀斑减少中和试验法检测乙脑病毒中和抗体。  结果  360名调查对象中乙脑病毒中和抗体阳性率为55.28%,几何平均滴度（GMT）为1 ∶17.52。不同性别（χ2=10.798,P=0.001）、不同发病率地区（χ2=6.090,P=0.048）成人乙脑病毒中和抗体阳性率差异具有统计学意义（均有P<0.05）;不同年龄成人乙脑病毒中和抗体阳性率在45.00%~60.00%之间（χ2=4.236,P=0.516）;不同民族中,布依族成人乙脑病毒中和抗体阳性率最高（79.17%）。  结论  贵州省成人乙脑病毒中和抗体水平较低,存在成人乙脑流行风险。     

麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验试剂的比较和评价

目的对目前中国市场上已有的两种麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂（德国Virion／Serion试剂和德国IBL试剂）进行比较和评价,筛选适用于2006年全国人群麻疹血清流行病学调查的试剂。方法以蚀斑减少中和试验（Plague Reduction Neutralization Test,PRNT）的检测结果为“金标准”,分别用两种ELISA试剂检测52份麻疹IgG抗体组合血清,然后对试剂的定性和定量能力进行全面分析和评价。结果两种ELISA试剂均能正确的将13份PRNT结果为阴性的血清判定为阴性,特异度均为100％。两种试剂中,Virion／Serion试剂的敏感度为94．9％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．902,相关系数为0．878（P〈0．01）;IBL试剂敏感性为58．8％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．441,相关性系数为0．850（P〈0．01）。结论Virion／Serion试剂的特异性、敏感性较好,有单孔IgG抗体定量能力,价格适中,适于在自动化工作平台工作站中开展大规模血清样本的检测。     

蚀斑法测定呼吸道合胞病毒滴度的建立和验证

目的 建立蚀斑法用于呼吸道合胞病毒的病毒滴度测定，并进行验证。方法 通过测定样品的病毒滴度，比较滴度结果，筛选最佳覆盖物、覆盖物浓度和病毒孵育时间，从而建立蚀斑法用于测定呼吸道合胞病毒滴度。根据国际人用药品注册技术协调会指导原则和《中华人民共和国药典》要求，验证该方法的准确性、精密性、线性和耐用性。结果 采用0.8%微晶纤维素作为覆盖物，病毒孵育2～3 h为建立蚀斑法的最优条件。该蚀斑法测定不同浓度样品病毒滴度的结果相对偏倚均小于10%;试验内和试验间精密性几何变异系数分别为11%和18%;本方法的线性斜率为1.004,相关系数为0.999 1;本方法中固定细胞的时间0.5～24 h均适用，差异无统计学意义(F=1.767,P=0.222 5)。结论 建立的蚀斑法具有较好的准确性、精密性、线性和耐用性，适用于呼吸道合胞病毒的滴度测定。