羟喜树碱通过诱导自噬抗宫颈癌的机制研究

目的探讨抗肿瘤药物羟喜树碱(HCPT)对宫颈癌HeLa细胞作用的机制。方法 CCK8检测Hela细胞增殖,Western blot检测自噬和凋亡相关蛋白的表达,GFP-LC3 shRNA转染和Hoechst染色后,荧光显微镜下观察细胞自噬特异小体量的改变以及凋亡形态学的变化。结果 HCPT抑制Hela细胞生长呈浓度依赖性(P<0.05),IC503μmol/L HCPT作用Hela细胞后,自噬相关蛋白Beclin1、p62的表达以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值发生改变,差异有显著性意义(P均<0.05);凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2表达也发生明显改变(P均<0.05);荧光显微镜下观察Hela细胞带有GFP-LC3的自噬体增加,凋亡细胞也增多(P均<0.05)。结论 HCPT能够诱导HeLa细胞中自噬相关基因Beclin1、p62以及LC3的表达增强,从而激活细胞自噬发生;且HCPT能够激活宫颈癌HeLa细胞发生自噬,进而诱导细胞凋亡来达到抗肿瘤目的。     

急性脑出血患者血浆S100B和热休克蛋白70水平与预后关系的研究

目的探讨急性脑出血患者血浆S100B和热休克蛋白70水平与预后的关系。方法仙桃市第一人民医院采用酶联免疫吸附试验检测60例急性脑出血患者72 h内血浆中S100B和热休克蛋白70(HSP70)的水平,并分析其与患者预后的关系。结果急性脑出血急诊手术后好转组36例,无好转组24例,其中无好转组血浆中S100B及HSP70含量均显著高于好转组(P<0.01);分别以患者急性脑出血后血浆S100B水平2.0μg/L,HSP70水平15.0μg/L为标准评估预后,S100B特异度为82.1%,灵敏度为81.0%,相对危险度6.38;HSP70特异度73.5%,灵敏度57.7%,相对危险度2.05。结论急性脑出血患者早期血浆中S100B及HSP70水平显著升高,显示预后差;血浆中S100B及HSP70水平对评估脑出血患者预后具有较高的特异性和灵敏性。     

p21活化激酶1在胰腺癌中的表达及其意义

 目的　探讨p21活化激酶1（PAK1）蛋白在胰腺癌中的表达及其意义。方法　选取胰腺癌组织标本33例作为研究组,胰腺癌周围正常组织标本33例作为对照组,应用免疫组织化学技术检测组织中PAK1蛋白的表达情况。结果　研究组中PAK1蛋白的阳性表达率明显高于对照组[69.7 %（23／33）比27.3 % （9／33）,χ2＝11.89,P＝0.001];且Ⅲ+Ⅳ期胰腺癌组织中PAK1阳性表达率高于Ⅰ+Ⅱ期[93.3 %（14／15）比50.0 %（9／18）, χ2＝5.367,P＝0.021]。结论　PAK1蛋白可能与胰腺癌发生、发展有关。     

选择性环氧合酶抑制剂NS398对子宫内膜癌细胞株的影响

目的探讨环氧合酶抑制剂NS398对子宫内膜癌细胞株的生物学行为的影响。方法2005年9月至2006年11月于华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科实验室用MTT、DNA梯度降解试验及流式细胞仪等方法,研究NS398体外对子宫内膜癌细胞系Ishikawa的抑制增殖、促进凋亡作用。结果NS398对Ishikawa细胞产生明显的生长抑制作用,且表现为剂量依赖性(F=36.598,P<0.01);DNA梯度降解试验、流式细胞仪分析NS398浓度依赖性地诱导了Ishikawa细胞凋亡(F=11.342,P<0.01),且凋亡与细胞周期受阻有关(F=22.445,P<0.01)、主要阻止在G1/S期即DNA合成期。结论NS398对Ishikawa细胞具有显著浓度依赖性的体外生长抑制、诱导凋亡、阻滞DNA合成作用。     

姜黄素联合顺铂抗胰腺癌细胞增殖的效应

[目的]体外观察姜黄素（curcumin）联合顺铂（CDDP）抗胰腺癌细胞（Pane-1）增殖的效应。[方法]采用MTT法观察不同浓度姜黄素、CDDP单独应用对Panc-1细胞生长的抑制效应，并利用中效原理判定2药合用的效果，应用中位效应原理和联合作用指数法来定量姜黄素与CDDP的联合作用。[结果]姜黄素和CDDP对Panc-1有剂量依赖性的抑制增殖作用，作用48h姜黄素、CDDP的IC50值分别为（20．05±1．32）μmol／L、（0．89±0．31）μg／ml。中效原理分析显示，2药在联合应用时为协同效应，在相同的抑制效应下可降低姜黄素和明显降低CDDP的使用量。[结论]姜黄素可以促进Panc-1对CDDP的敏感性，降低其有效治疗浓度。     

再生蛋白4与CA-199联合检测在胰腺癌诊断中的临床意义

胰腺癌是个预后极差的恶性肿瘤,5年生存率少于4%,早期诊断和早期治疗是1种可行的能有效提高患者5年生存率的方法。但由于胰腺癌解剖位置较深,临床症状缺乏特异性及无有效的筛查方法,大多数患者发现时已属于中晚期。本研究对再生蛋白4（regenerating islet-derived 4,REG4）与CA-199联合检测在早期诊断胰腺癌中的作用进行了初步探讨,现报告如下。     

LncRNA在子宫脱垂组织中表达谱的变化

目的筛选出与子宫脱垂相关的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),为探讨lncRNA参与子宫脱垂的发生与发展提供实验依据。方法选取2015年1~6月在武汉市人民医院进行手术的6例子宫脱垂组织和6例未脱垂的正常子宫组织,应用高通量lncRNA芯片技术检测两组子宫组织中lncRNA表达谱的变异。结果分析两组lncRNA表达谱的变化,发现与正常子宫组织相比,子宫脱垂组织中的lncRNA和mRNA表达量均表现出上调和下调。上调mRNA(Fold2)参与了多细胞生物过程、信号传导和细胞交流等生物过程,下调mRNA(Fold2)参与了细胞器形成、细胞周期和细胞分裂等生物过程。通过GO聚类分析着重分析了变化差异性最明显的10个lncRNA,寻找出了与其变化密切相关的mRNA。通过荧光定量聚合酶链反应对4个变化最明显的lncRNA(BC008359、RP11-521B24.5、BRE-AS1和RP11-229P13.15)进一步验证,与芯片检测结果一致。结论子宫脱垂组织中lncRNA的变化情况说明,4个变化最明显的lncRNA(BC008359、RP11-521B24.5、BRE-AS1和RP11-229P13.15)在子宫脱垂组织中发挥重要作用,为探讨lncRNA参与子宫脱垂的发生与发展提供实验依据和理论基础。     

LncRNA在宫颈癌组织中的表达谱变化及意义

目的 研究宫颈癌组织中lncRNA的表达变化情况,为探讨lncRNA参与宫颈癌发生与发展提供分子依据.方法 取20例宫颈癌患者的宫颈癌组织和20例正常宫颈组织,应用高通量lncRNA芯片技术分别检测两组中ln-cRNA表达谱的变化情况,并应用qRT-PCR技术对结果加以验证.结果 与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中共有30586条lncRNA和13982条mRNA存在差异性表达,通过GO聚类分析表明,上调mRNA和下调mRNA分别参与多种不同的生物过程.通过进一步分析发现变化差异性最明显的10个lncRNA可能通过影响相应的mRNA来发挥其生物学功能.qRT-PCR结果与芯片检测结果一致,提示4个lncRNA(BC008359,RP11-521B24.5,BRE-AS1,和RP11-229P13.15)在宫颈癌组织中发挥重要作用.结论 本实验阐述了宫颈癌组织中lncRNA的变化情况,为探讨lncRNA参与宫颈癌发生与发展以及治疗提供新的分子依据.     

黏蛋白MUC1和Cyclin D1在胰腺癌组织中的表达意义

目的探讨胰腺癌组织中黏蛋白MUC1和周期蛋白Cyclin D1的表达及其意义。方法采用免疫组化方法对47例胰腺癌和15例正常胰腺组织中的MUC1和Cyclin D1进行检测。结果 47例胰腺癌组织中有39例（82.98%）MUC1表达阳性和32例（68.09%）Cyclin D1表达阳性,15例正常胰腺组织中3例（2.00%）MUC1表达阳性和0例（0）Cyclin D1表达阳性;MUC1的表达和Cyclin D1的表达呈正相关;且MUC1的阳性表达在胰腺癌分期较晚和淋巴结转移的组织中明显高于分期较早和无淋巴结转移的组织（P〈0.05）;Cyclin D1在有淋巴结转移的胰腺癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移的胰腺癌组织（P〈0.05）。结论 MUC1和Cyclin D1参与胰腺癌的发生发展,MUC1是胰腺癌诊断和治疗靶点的理想标志物。