HDAC3基因在β-地中海贫血中甲基化状态及其意义研究

目的 通过寡核苷酸芯片寻找和分析β-地中海贫血DNA甲基化相关的基因位点,进一步探讨早期诊断β-地中海贫血的新方法.方法 利用含有人30 178个DNA甲基化探针的寡核苷酸芯片,对2例β地中海贫血患儿脐血与2例正常脐血分别配对检测差异基因DNA甲基化情况,并用甲基化特异PCR(MSP)和DNA荧光定量PCR验证芯片结果.结果 两组芯片结果显示,差异基因共209条(ratio≥2.0 or≤0.50);其中上调基因共113条,下调基因共96条.验证结果显示,DNA甲基化相关基因组蛋白甲基转移酶3(HDAC3)与正常血样比较呈高甲基化状态.结论 高通量的DNA甲基化基因芯片技术能够筛选出大量的地中海贫血差异表达基因,DNA甲基化相关基因HDAC3在地中海贫血中呈高甲基化.预示着利用DNA甲基化芯片分析地中海贫血中甲基化特异相关分子的规律和特点为临床上早期诊断地中海贫血开拓了新的思路和方法.     

吉西他滨作用于肝癌HepG2细胞后对DR5、caspase-8、caspase-9和caspase-3表达的影响

目的 研究吉西他滨作用于HepG2细胞后DR5、caspase-8、caspase-9、caspase-3的表达,以期探讨吉西他滨诱导HepG2细胞凋亡的机制.方法 应用MTT法和流式细胞仪体外研究吉西他滨对HepG2细胞增殖的影响;采用免疫细胞化学及Western blot法,观察吉西他滨作用于HepG2细胞24 h后DR5、caspase-8、caspase-9、caspase 3的表达情况.结果 吉西他滨对肝癌HepG2细胞的抑制作用呈时间和浓度依赖性;吉西他滨作用于HepG2细胞24 h后,细胞表面DR5及caspase-8、caspase-9、caspase-3的表达均增强.结论 吉西他滨诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制可能与其能够上调DR5及caspase-8、caspase-9、caspase-3的表达有关.     

分子靶向药物在肝细胞肝癌治疗中的研究进展

对于不适宜手术切除的晚期肝细胞肝癌,传统的化疗并不能改善患者的预后。分子靶向药物的出现为肝细胞肝癌的治疗提供了新的治疗手段。分子靶向药物治疗肝细胞肝癌的临床试验中,包括多靶点抑制剂、血管内皮生长抑制剂、小分子酪氨酸激酶抑制剂以及分子靶向药与化疗的联合等已经显示出了潜在的疗效和良好的发展前景。临床试验显示索拉非尼可延长肝细胞肝癌的中位无疾病进展时间至9.2个月,中位总生存至10.5个月,贝伐单抗与厄洛替尼联合治疗肝细胞肝癌延长中位总生存达68周。本文针对肝细胞肝癌使用多靶点抑制剂、血管内皮生长抑制剂等的临床研究进展进行综述。     

得力生对肝癌HepG2细胞株凋亡的影响及机制

目的：探讨中药得力生对肝癌HepG2细胞株凋亡率的影响及可能的分子机制．方法：以MTT法检测不同浓度得力生作用不同时间后肝癌HepG2细胞的增殖抑制率的变化,用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,用免疫细胞化学法、Western Blot法分别观察细胞凋亡相关因子Caspase-3,Caspase-9及Bcl-2（B细胞淋巴瘤2）的表达．结果：得力生对肝癌HepG2细胞株的增殖抑制作用随药物作用时间和浓度增大而增加;主要使HepG2细胞株阻滞于S期;与对照组比较,实验组细胞凋亡率增高（P〈0．01）;Caspase-3和Caspase-9在实验组表达增加,Bcl-2表达减少．结论：得力生可以增加HepG2细胞株凋亡率,其作用机制可能与线粒体凋亡通路有关．     

基于寡核苷酸芯片的β-地中海贫血DNA甲基化的研究

目的 通过寡核苷酸芯片寻找和分析β-地中海贫血DNA甲基化相关的基因位点,进一步探讨产前筛查及诊断β-地中海贫血的新方法.方法 利用含有人30 178个DNA甲基化探针的寡核苷酸芯片,对2例β地中海贫血患儿脐血与2例正常脐血分别配对检测差异基因DNA甲基化情况,并用甲基化特异PCR(methylation-specific PCR,MSP)和荧光定量PCR(RT-PCR)验证芯片结果.采用非监督聚类(hierarchical clustering)等方法发现统计学意义上差异表达的基因.结果 两组芯片结果显示,差异基因共209条(ratio≥2.0,ratio≤0.5);其中上调基因共113条,下调基因共96条.验证结果显示,DNA甲基化相关基因成红细胞增多型白血病致病因子(erythroblastie leukemia viral,v-erb-a)与正常血样比较呈高甲基化状态.结论 利用DNA甲基化芯片及甲基化特异PCR技术检测并验证出成红细胞增多型白血病致病因子(v-erb-a)在地中海贫血中呈高甲基化.     

奥沙利铂处理HepG2细胞后DR5、caspase-8及survivin、bcl-2表达的变化

目的：研究奥沙利铂作用于HepG2细胞后DR5、caspase-8、survivin、bcl-2的表达,对奥沙利铂诱导HepG2细胞凋亡的机制进行初步探讨。方法：实验分为对照组和奥沙利铂组,应用MTT法、流式细胞仪体外研究奥沙利铂对HepG2细胞增殖的影响;采用免疫细胞化学及western blot的方法,观察奥沙利铂作用于HepG2细胞24h后DR5、caspase-8、survivin、bcl-2的表达情况。结果：奥沙利铂对肝癌HepG2细胞的抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性;奥沙利铂作用于HepG2细胞24小时后细胞表面DR5及caspase-8的表达增强,而survivin和bcl-2的表达减弱。结论：奥沙利铂诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制可能与其上调DR5及caspase-8表达和下调survivin及bcl-2表达有关。     

利用寡核苷酸芯片诊断α-地中海贫血无创方法的探讨

目的 通过比较地中海贫血脐血与正常脐血和外周血的全基因组表达差异,进一步探讨早期诊断地中海贫血的无创方法.方法 利用含有人约22 000条Oligo DNA的人类全基因长寡核苷酸芯片,对1例α地中海贫血患儿脐血与1例正常脐血及1例外周血分别配对检测差异基因表达,并用real-time PCR验证差异基因HBA2在脐血和外周血中的差异性.采用分层聚类分析等显著性检验方法发现统计学意义上差异表达的基因.结果 两组芯片结果显示,检测到的基因共4 205条,其中两者差异的基因共822条(ratio≥2或≤0.5);通过间接比较两组差异率为19.5%,即重复率为81.5%.实时定量PCR(RT-PCR)的Ct(threshold cycle)值结果亦显示HBA2在脐血和外周血中表达无差异.结论 高通量的基因芯片技术能够筛选出大量的地中海贫血差异表达基因,直接与α-地中海贫血相关的HBA2蛋白在脐血和外周血中的表达无差异.预示着利用微阵列分析法对地中海贫血进行早期诊断时,可以采用无创技术制备芯片样本.     

分析黄桃红四物汤治疗黄褐斑伴月经不调的临床疗效

目的分析黄桃红四物汤治疗黄褐斑伴月经不调的临床疗效。方法选取我院2018年6月至2019年6月收治的72例黄褐斑伴月经不调患者进行研究,依据治疗方法的不同将其分为参照组和研究组两组,参照组采用常规方式治疗,研究组在参照组基础上实施黄桃红四物汤治疗,对两组患者的治疗前后的月经不调症状评分、黄褐斑面积及临床治疗效果进行观察和比较。结果研究组治疗有效率显著比参照组高(P0.05);治疗前两组患者月经不调症状评分、黄褐斑面积变化情况比较差异不明显(P0.05),治疗后研究组月经不调症状评分、黄褐斑面积明显比参照组优(P0.05)。结论黄桃红四物汤治疗黄褐斑伴月经不调效果较佳,可使患者月经不调症状及黄褐斑情况得到有效改善,并且拥有较高的治疗效率,值得进行临床应用和推广。     

奥沙利铂处理HepG2细胞后DR5、caspase-8及survivin、bcl-2表达的变化

目的:研究奥沙利铂作用于HepG2细胞后DR5、caspase-8、survivin、bcl-2的表达,对奥沙利铂诱导HepG2细胞凋亡的机制进行初步探讨.方法: 实验分为对照组和奥沙利铂组,应用MTT法、流式细胞仪体外研究奥沙利铂对HepG2细胞增殖的影响;采用免疫细胞化学及western blot的方法,观察奥沙利铂作用于HepG2细胞24h后DR5、caspase-8、survivin、bcl-2的表达情况.结果: 奥沙利铂对肝癌HepG2细胞的抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性;奥沙利铂作用于HepG2细胞24小时后细胞表面DR5及caspase-8的表达增强,而survivin和bcl-2的表达减弱.结论: 奥沙利铂诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制可能与其上调DR5及caspase-8表达和下调survivin及bcl-2表达有关.