用白细胞共同抗原45去除白细胞对流式细胞仪测定肿瘤细胞干扰的探讨

流式细胞仪 (FCM)是通过荧光抗原抗体技术进行细胞测量的先进仪器。穿刺活检术为肺良恶性肿瘤鉴别诊断和标记物检测提供了安全、准确、微创的途径。越来越多的临床研究关注肿瘤相关基因蛋白在恶性肿瘤发生发展中的作用 ,而蛋白表达水平在肿瘤细胞和正常细胞间存在差异[1 3 ] ,以往的工作多以免疫组化技术为手段 ,但在定量分析方面受到限制 ;而FCM快速进行多参数测量 ,特别是在混合细胞中可通过相应标记对细胞进行分类和定量。本研究对穿刺标本中肿瘤相关基因表达蛋白进行FCM检测 ,并用白细胞共同抗原 (CD) 4 5标记 ,以去除白细胞对FCM…     

肿瘤DNA含量与p53，p21，p16，Rb基因异常表达的肿瘤生物学特性

背景：p53，Rb，p16和p2l蛋白是肿瘤相关基因产物，其异常表达在细胞周期的不同阶段直接或间接影响着肿瘤的形成和发展，DNA倍体异常也是肿瘤细胞周期频发事件，而肿瘤细胞DNA倍体与P53，Rb，P16和P2l蛋白异常表达关系间的研究鲜见报道。目的：研究流式细胞仪(FCM)检测肿瘤组织DNA倍体与多种癌相关基因蛋白p53，Rb，p16和p2l异常表达的意义。设计：以诊断为依据设立对照的前瞻性研究。地点和对象：实验地点：江苏省肿瘤防治研究所，实验对象：30例女性癌症患者，其中卵巢癌lO例，乳腺癌20例，平均年龄55岁。干预：对30例卵巢癌和乳腺癌瘤体中心灶进行3点取样，应用FCM检测DNA倍体及p53，Rb，p16和p2l异常表达。主要观察指标：肿瘤组织DNA倍体及p53，Rb，p16和p2l蛋白阳性细胞百分率。结果：瘤灶多点取样法可检测出90％(27／30)的异倍体；不同倍性的肿瘤普遍存在程度不同地p53，Rb，p21和p16基因蛋白异常表达。96．7％(29／30)的肿瘤存在至少一种以上癌相关基因(1353，Rb，p16，p21)异常表达。结论：DNA异倍体与多种癌相关基因蛋白异常表达均是肿瘤恶性指标，FCM同步检测这些指标，为快速了解肿瘤细胞生物学特性、把握患者临床治疗及预后提供了良好途径。     

某省肿瘤医院不同年龄、性别的健康人外周血各类T细胞亚群和NK细胞的分布研究

目的调查不同年龄、性别的正常人外周血中各类T细胞亚群和NK细胞的分布。方法流式细胞仪检测193例健康者外周血的各类T细胞亚群和NK细胞在淋巴细胞、T细胞、或T细胞亚群中的百分比含量。结果 193例健康人按年龄分为青年（≤39岁）、中年（40-59岁）、老年（≥60岁）三个组。获得在不同年龄、性别组中T、T4、T8和NK细胞占外周血淋巴细胞中的平均值和标准差;Th、Tc、Ts、Treg、NKT、活化T细胞等T细胞亚群占外周血T细胞中的平均值和标准差;Treg细胞占T4细胞亚群中,Tc、Ts占T8细胞亚群中的平均值和标准差。结论本结果可作为健康人外周血细胞流式细胞术参数的正常参考值,供基础和临床研究参考。     

肿瘤患者血细胞中P53突变蛋白高表达与转移复发的关系

P53基因突变是人类众多肿瘤发生的原因之一，既往报道多侧重于肿瘤组织细胞的P53基因改变，而我们发现肿瘤患者外周血细胞中P53突变蛋白[P53(v)]表达与正常健康人比，普遍上调，推测可能P53突变不仅出现在肿瘤细胞，在肿瘤患者发病前已具备遗传潜质。本研究用流式细胞术(FCM)对正常人和肿瘤患者外周血细胞进行P53(v)表达状况分析，并随访观察评价其临床意义。     

恶性肿瘤转移与患者免疫活性细胞水平的相关性研究

目的 :探讨肿瘤转移和患者机体免疫活性细胞检出率的关系。方法 :用流式细胞术对恶性肿瘤患者肿瘤组织和外周血的自然杀伤细胞、细胞毒T细胞和单核 巨噬细胞的检出率进行了检测和分析。结果 :恶性肿瘤患者的组织和血液中的自然杀伤细胞、细胞毒T细胞和单核 巨噬细胞的检出率均显著低于相应的对照组 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。恶性肿瘤转移者的自然杀伤细胞、细胞毒T细胞和单核 巨噬细胞检出率均显著低于未转移者 (P <0 0 1或 P <0 0 5 )。肿瘤组织和外周血的自然杀伤细胞、细胞毒T细胞和单核 巨噬细胞的检出率在各种情况下均呈现平行性的变化。结论 :恶性肿瘤能引起患者机体免疫活性细胞的水平显著降低 ,肿瘤转移使患者机体免疫活性细胞水平进一步下降。通过对恶性肿瘤患者外周血免疫活性细胞检测可以了解肿瘤组织免疫活性细胞的变化趋势。     

卵巢癌患者腹水细胞遗传学检查的意义

检查卵巢癌的方法较多,腹水细胞染色体检查是方法之一,对临床诊断、治疗、预后有参考价值。尤其是某些临床体症不明显且其它检查阴性的患者,腹水细胞染色体检查阳性可做为确诊的依据。兹将有关内容简述如下。一、卵巢癌患者腹水细胞遗传学检查的临床意义腹水是卵巢癌临床常见体征。由于实体肿瘤增殖指数低,核型改变复杂,显带不佳,不易获得满意的染色体标本。所以,腹水癌细胞分裂相是进行卵巢癌染色体分析的主要来源。     

卵巢癌组织中双微体表达及意义

卵巢癌组织中双微体表达及意义沈宗丽薛开先彭素蓉癌症患者体内存在高水平的基因扩增时，其癌细胞常出现一种特异性的染色体畸变——双微体（ｄｏｕ－ｂｌｅｍｉｎｕｔｅｓ，ＤＭ）。在细胞水平上检测ＤＭ，可为临床研究癌基因扩增提供一项简便、实用的观察手段和指标。本...     

IL-6/sIL-6R对人脐血CD34+细胞体外扩增的作用

背景和目的:造血干细胞具有自我更新、多向分化与重建长期造血的潜能,因此,造血干细胞广泛应用于干细胞移植、免疫治疗、基因治疗等领域.胎儿脐带血中富含造血干细胞,但单份脐带血中造血干细胞的数量有限,不能充分满足临床和科研需要,因此在体外培养使脐带血干/祖细胞数量扩增的研究日益受到重视.已知一些细胞因子可以在体外培养中使脐血干/祖细胞大量扩增.新近发现IL-6/sIL-6R(可溶性IL-6受体)或其融合蛋白可促使脐带血CD34+细胞中CD34+gp130+IL-6R-细胞亚群在体外培养中大量扩增.本实验旨在观察IL-6/sIL-6R在脐带血CD34+细胞体外扩增中的作用,并探讨合适细胞因子组合.方法:脐血CD34+细胞用Mini MACS分离,然后在含有不同细胞因子组合的液体培养基中体外培养7天或14天,培养前后分别进行有核细胞计数、用FCM(流式细胞术)测定CD34+细胞比例计算CD34+细胞总数及进行CFU-GM集落培养.根据不同细胞因子组合分为空白对照组,SCF组,SCF+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL+IL-6/sIL-6R组,SCF+FL组.结果:空白对照组和SCF组CD34+细胞数量在培养7天或14天后明显下降.SCF+IL-6/sIL-6R组培养7、14天分别使有核细胞及CD34+细胞绝对数扩增(7.1±2.4)倍、(39.0±14.0)倍及(1.8±0.7)倍、(4.8±2.4)倍;SCF+FL+IL-6/sIL-6R组(16.5±5.7)倍、(110.0±28.0)倍及(3.5±1.5)倍、(10.2±4.2)倍;SCF+FL组(17.3±3.8)倍、(104.0±21.0)倍及(3.6±2.1)倍、(8.4±3.5)倍.上述三组与对照组及SCF组差异均有显著性(P＜0.01),其中SCF+FL+IL-6/sIL-6R组和SCF+FL组扩增效果优于SCF+IL-6/sIL-6R组(P＜0.01),但是SCF+FL+IL-6/sIL-6R组和SCF+FL组之间差异无显著性(P＞0.05).增加sIL-6R浓度,当sIL-6R浓度为400 ng/ml时,细胞培养7天,SCF+FL+IL-6/sIL-6R组分别使有核细胞及CD34+细胞绝对数扩增(24.0±4.8)倍、(5.6±1.2)倍,优于SCF+FL组(P＜0.05).结论:IL-6/sIL-6R可以和SCF、FL产生协同作用,使人脐血CD34+细胞在体外扩增、并维持其分化潜能.但这种协同作用对sIL-6R的浓度存在一定依赖性.     

肺癌患者DNA断裂修复能力差异表现及临床意义

目的 :探讨肺癌患者细胞DNA断裂修复能力差异的存在及其临床意义。方法 :博莱霉素 (BLM )体外攻击人培养淋巴细胞 ,计数染色体断裂率 (b/c) ,观察低修复型和正常修复型患者接受放化疗后的反应。结果 :①肺癌患者b/c平均值为 1.0 2±0 .72 ,低修复型患者 5 2 % ,极低修复型患者 37% ;②显示随年龄组升高 ,低修复型显著升高 (P <0 .0 5 ) ;③低修复型患者一年复发转移率 31% ,略高于正常修复型患者 2 3 % ;临床出现毒副反应者中低修复型占 78%。结论 :随年龄增大 ,患者细胞DNA断裂修复能力下降。肺癌发生与细胞DNA修复能力的下降有正相关性。低修复型个体更易复发转移 ,放化疗中较易出现临床毒副反应。修复能力的检测有望成为一项较为实用的个体化治疗生物学指标。