白色念珠菌L型的生化实验观察

目的了解白色念珠菌发生L型变异后生化反应有无变化。方法将白色念珠菌氟康唑诱导株、自发变异株(不同形态和染色性的L型念珠菌)及恢复菌株进行生化反应鉴定,并与诱导前菌株的生化反应进行比较分析。结果白色念珠菌在发生L型改变后,生化反应明显改变,恢复菌株的生化反应也很难完全恢复。结论对于发生L型改变的白色念珠菌其生化反应不能作为其鉴定的依据。     

革兰阳性球菌耐药状况分析

目的了解革兰阳性球菌耐药状况,以便对流行病学调查及指导临床合理用药提供参考。方法临床标本用生物-梅里埃-VETEK全自动微生物分析系统、API细菌鉴定系统及K-B法进行细菌鉴定及药敏分析试验。结果凝固酶阴性葡萄球菌为主要感染菌,其次为金黄色葡萄球菌。感染标本主要来源于下呼吸道。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)约占金黄色葡萄球菌的46%,甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)在凝固酶阴性葡萄球菌中占63%。MRSA和MRCNS对临床常用抗菌素的耐药率明显高于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)。屎肠球菌与粪肠球菌相比较,前者耐药性高于后者,两者均有约3%耐万古霉素菌株。结论细菌的耐药状况不容乐观,合理使用抗生素以防止耐药菌株的产生及播散尤为重要。     

陕西省细菌耐药监测网2015年血流感染病原菌分析

目的 统计分析陕西省细菌耐药监测网成员单位2015年血流感染病原菌分布及耐药情况,为陕西省抗菌药物合理应用提供依据。方法 各成员单位按照监测方案要求,进行目标细菌鉴定、药敏试验,依据CLSI 2014年标准,用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 共收集细菌6 871株,其中革兰阴性菌3 199株,占46.56%,革兰阳性菌3 672株,占53.44%。革兰阳性菌中,分离前五位分别为表皮葡萄球菌1 136株(30.94%)、人葡萄球菌655株(17.84%)、溶血葡萄球菌431株(11.74%)、金黄色葡萄球菌356株(9.69%)和屎肠球菌231株(6.29%); 革兰阴性菌中分离前五位的分别是大肠埃希菌1 397株(43.67%)、嗜麦芽窄食单胞菌468株(14.63%)、肺炎克雷伯菌431株(13.47%)、铜绿假单胞菌132株(4.13%)和鲍曼不动杆菌116株(3.63%)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为31.2%和76.1%,未发现万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。万古霉素耐药屎肠球菌发生率0.9%。革兰阴性杆菌中,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药率<4.0%。鲍曼不动杆菌对包括亚胺培南在内的大多数监测药物耐药率超过50.0%,而铜绿假单胞菌对大多数药物保持了较高的抗菌活性。结论 陕西省血流感染细菌耐药情况较为严重,应充分利用该地区细菌耐药监测结果进行监督管理,促进抗菌药物合理应用。     

RNA干扰抑制HPV16E6基因的表达对HPV16阳性宫颈癌细胞中基因表达谱的影响

目的:探讨RNAi抑制E6基因的表达对宫颈癌细胞基因表达谱的影响.方法:利用脂质体将已验证有效的表达针对E6基因小发卡RNA(shRNA)的重组质粒转染到宫颈癌细胞CaSKi中,提取宫颈癌细胞总RNA并利用Agilent Human 1A寡核苷酸表达芯片检测RNAi后CaSKi细胞基因表达谱的变化,最后实时PCR检测CDKN2B(p15)和MKI67来验证芯片分析结果.结果:与CaSKi/PSN相比,共有2 765个基因表达有明显差异,其中有2 709个上凋基因(包括代谢相关基因、肿瘤抑制基因、信号转导相关基因、凋亡基因等)和56个下调基因(包括原癌基因、DNA结合和转录基因、代谢相关基因、信号转导相关基因、细胞周期和发育相关基因等).实时PCR结果表明CDKN2B(p15)和MKI67的变化与基因芯片分析结果一致.结论:联合应用RNAi和基因芯片分析技术可以为研究HPV16 E6与宿主细胞相互作用分子机制提够更丰富的资料和信息,并提供新的研究策略和途径.     

念珠菌类细菌样变异株生物学性状及遗传学特征研究

目的 了解念珠菌发生变异后其形态、结构等生物学性状的改变情况,并通过其遗传学特征研究从分子水平揭示这种变异发生的机理。方法实验室研究中,利用不同的营养条件及生长环境、不同的唑类抗真菌药物对白色念珠菌标准菌株进行诱导使其变异; 临床研究中,从抗真菌治疗效果不佳患者的阴道分泌物、痰液、胸腔积液、胃液等标本中分离念珠菌变异株,并对以上变异株的形态特点、核结构、生化反应、耐药性、菌体组分、遗传学特征等进行研究。结果 菌体形态:念珠菌极易发生类细菌样变异,变异株菌体可呈G⁺球菌状、G⁺杆菌状、G⁺长丝状、G^-球菌状、G^-杆菌状等; 核结构:电镜透射扫描证实念珠菌变异株失去真核细胞固有的核结构而呈原核生物样改变; 生化反应:在所观察的20项生化试验中有 5项不同; 药敏试验:念珠菌发生变异后对原本敏感的抗真菌药物完全耐药,而对原本耐药的普通抗细菌药物敏感,且耐药谱与普通细菌耐药谱相同; 菌体组分改变:经质谱仪鉴定念珠菌变异株和变异菌返祖株菌体组分有明显不同; 真菌最保守基因表达:采取PCR技术对变异株进行真核生物最保守基因16S sRNA检测发现,念珠菌发生类细菌样变异后仍表达真核生物保守基因,由此可证明具有原核细胞生物学特性的念珠菌类细菌样变异株是源于具有真核细胞的念珠菌。结论 念珠菌极易发生类细菌样变异,变异株各种生物学特性与原核生物酷似。电镜观察具有明确亲缘关系的念珠菌标准菌株、念珠菌类细菌样变异株、变异菌返祖株在核物质存在形式上确有质的改变,此研究在生物进化特别是在原核细胞与真核细胞的进化联系上有非常重要的意义。     

西安地区体检人群幽门螺杆菌感染及分型状况调查

目的　探讨西安地区体检人群幽门螺杆菌感染及分型状况,为临床方案制定提供理论依据。方法　选取 2020年 10 月~2021 年 3 月在陕西省人民医院进行体检的1 035 例受试者作为研究对象,采用免疫印迹法检测 Hp 抗体及分型。比较不同性别及年龄Hp 感染的情况。结果　1 035 例研究对象按照Hp 抗体分型检测结果分为Hp Ⅰ型感染组、Hp Ⅱ型感染组和对照组。Hp 总感染率为54.10%,其中Ⅰ型和Ⅱ型感染率分别为30.43% 和23.67%,两者比较差异有统计学意义（χ2=0.982,P<0.05）;男性和女性总感染率分别为52.38% 和55.88%,两者差异无统计学意义（χ2=1.278,P>0.05）。男性Ⅰ型感染率高于Ⅱ型（31.43% vs 20.95%）,差异有统计学意义（χ2=0.992,P<0.05）, 女性Ⅰ型和Ⅱ型感染率分别为29.41% 和26.47%,差异无统计学意义（χ2=0.587,P>0.05）。按不同年龄段分组分析:18 岁以下,31~40 岁和41~50 岁Ⅰ型感染率高于Ⅱ型,差异均有统计学意义（χ2=13.445,5.000 和4.462,均P<0.05）,18~30 岁和≥ 50 岁组Ⅰ型和Ⅱ型感染率差异无统计学意义（χ2=2.019,3.452,2.693 和3.167,均P>0.05）。结论　西安地区体检人群幽门螺杆菌感染率较高,以Ⅰ型为主,尤其是男性患者,且年龄小于18 岁及30~50 岁患者更易感,Hp 抗体分型为临床制定治疗方案提供理论依据。     

临床分离类细菌样变异念珠菌的实验室诊断

目的 探索临床分离类细菌样变异念珠茼的实验室诊断方法.方法 对类细菌样变异念珠菌感染的可疑病人标本采取合适的培养基分离、传代恢复、动物体内恢复返祖、必要时进行真菌基因鉴定.结果 临床分离的类细茼样变异念珠菌绝大多数能在合适条件下恢复成典型的念珠菌.少数难恢复的变异株,可通过真菌基因检测进行鉴定.结论 对于慢性念珠菌感染、不合理抗真菌治疗病人临床标本分离出的菌体形态酷似细菌但用传统方法无法进行鉴定的菌株,应考虑为念珠菌变异株,并对其返祖后进行鉴定.从而避免或减少念珠菌因形态变异造成的漏诊或误诊.     

骨关节尖端赛多孢菌与偶发分枝杆菌感染实验室诊断和临床治疗

目的　对1例骨关节尖端赛多孢菌与偶发分枝杆菌并发感染病例进行病原学诊断和治疗分析，为临床少见菌感染诊治提供思路。方法　将左大腿及左膝外伤后膝关节红肿骨科住院患者作为研究对象，采集其关节腔积液进行涂片染色、培养及质谱鉴定，根据病原学鉴定结果给予用药指导。结果　患者关节腔引流液外观为脓性乳糜状，涂片抗酸染色见大量白细胞和抗酸阳性呈柴捆状排列菌体；革兰染色见大量白细胞及真菌菌丝；荧光染色见团状菌丝。培养72h后血平板见丝状真菌菌落及细小、干燥的细菌样菌落，质谱仪鉴定为偶发分枝杆菌和尖端赛多孢菌混合感染。给予左氧氟沙星＋伏立康唑＋阿米卡星静脉滴注治疗14天，患者左膝关节肿胀明显减轻，左下肢肌力正常出院。出院医嘱改左氧氟沙星＋多西环素＋伏立康唑口服，因患者经济原因自行停服伏立康唑后复发再次入院，行关节积液培养再次分离出尖端赛多孢菌。临床清创并继续给予左氧氟沙星＋伏立康唑＋阿米卡星静脉滴注治疗，待症状改善后口服左氧氟沙星＋多西环素＋伏立康唑，期间肝功能检测有轻度损害，治疗方案改为口服左氧氟沙星＋复方磺胺甲噁唑＋伏立康唑直至出院，持续治疗6月后患者左膝关节肿胀消失，可自行站立行走，复查血细胞分析、C-反应蛋白、红细胞沉降率及肝肾功能均正常，逐渐停用所有药物。该患者停药后再无复发。结论　骨关节少见菌混合感染应重视实验室涂片检查和病原体鉴定，临床应该结合鉴定结果规范及足疗程治疗是患者治愈的关键。     

类细菌样念珠菌变异株对普通抗细菌药物敏感性观察

目的 了解念珠菌发生类细菌样变异前后对普通抗细菌药物的敏感性是否发生了改变.方法 采用常规MH药敏试验方法,观察ATCC10231白色念珠菌标准菌株和其自发变异后得到的类细菌样念珠菌变异株,9002.9白色念珠菌标准菌株及其经抗真菌药物诱导形成的类细菌样念珠菌变异株,临床分离的类细菌样念珠菌变异株及变异株返祖后得到的念珠菌株,共11株菌对普通抗细菌药物头孢哌酮/舒巴坦、头孢西丁、亚胺培南、环丙沙星、红霉素、万古霉素、庆大霉素、氯霉素、四环素的敏感性.结果 两株白色念珠菌标准菌株、临床分离类细菌样变异株返祖后的念珠菌株对普通抗细菌药物无抑菌圈;而不同条件下得到的类细菌样念珠菌变异株则对以上普通抗细菌药物有一定的敏感性.结论 白色念珠菌发生类细菌样变异后,对普通抗细菌药物的敏感性发生了改变,变异前对普通抗细菌药物不敏感,但发生类细菌样变异后对普通抗菌药物均有一定的敏感性,其抗菌谱与普通细菌基本一致.     

陕西省细菌耐药监测网2014—2016年革兰阳性菌耐药性监测

目的分析2014-2016年陕西省细菌耐药监测网革兰阳性菌耐药率变化情况,为革兰阳性菌感染的治疗提供理论依据。方法收集2014-2016年陕西省细菌耐药监测网各成员医院革兰阳性菌数据,依据美国临床实验室标准化协会（CLSI）2016年标准,采用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果共收集陕西省耐药监测网42所入网医院数据。2014-2016年各年份分别收集细菌43 830、48 258、61 819株,其中革兰阳性菌分别为14 487株（33.1%）、15 303株（31.7%）和18 613（30.1%）株。革兰阳性菌来源居前5位的标本分别为痰（14 844株,30.7%）、血（8 873株,18.3%）、分泌物（6 271株,13.0%）、尿（5 225株,10.8%）和伤口脓液（2 449株,5.0%）。分离前三位的革兰阳性菌属分别为葡萄球菌属（28 878株,占59.7%）、肠球菌属（10 207株,21.1%）和链球菌属（8 824株,18.2%）。2014-2016年,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出率分别为36.1%、45.2%和38.6%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为80.5%、81.0%和83.3%,未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁的葡萄球菌属细菌;粪肠球菌对万古霉素耐药率分别为1.7%、0.8%和0.7%,屎肠球菌对万古霉素耐药率分别为3.1%、2.0%和2.1%;非脑脊液分离的肺炎链球菌中,耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）的检出率分别为11.8%、6.1%和4.7%。结论本地区临床分离革兰阳性菌耐药现象较为普遍,应加强对细菌耐药的监测及管理,及时了解细菌耐药情况,为临床合理用药提供依据。