miR-28-5p靶向Nrf2调控LPS诱导的急性肺损伤机制研究

目的 探究miR-28-5p在LPS诱导的急性肺损伤（acute lung injury,ALI）进程中的功能和分子机制。方法 利用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠急性肺损伤3h,6h,12h,取肺组织进行荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-PCR）检测miR-28-5p表达;同时体外利用LPS刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7发生炎症反应,RT-PCR检测细胞中miR-28-5p表达;巨噬细胞中过表达miR-28-5p mimic后利用LPS刺激,RT-PCR检测巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）表达情况;RT-PCR和蛋白免疫印迹（western blotting,WB）检测抗氧化关键分子核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶（HO-1）、醌氧化还原酶（NQO1）表达水平;Targetscan 7.0预测miR-28-5p靶向基因,突变结合位点后,并通过荧光素酶报告基因系统检测miR-28-5p对靶基因的转录调控作用。结果 LPS诱导小鼠ALI 3h,6h,12h,肺组织中miR-28-5p的表达水平明显升高（***P＜0.001）;LPS刺激巨噬细胞炎症反应时,细胞内miR-28-5p的表达水平也明显升高（***P＜0.001）;巨噬细胞中过表达miR-28-5p mimic后,炎症因子TNF-α（###P＜ 0.001）和IL-1β（&&&P＜0.001）表达水平明显升高;同时抗氧化关键分子Nrf2（###P＜ 0.001）及其下游HO-1（&&&P＜0.001）、NQO1（$$P＜0.01）表达的明显降低;Targetscan 7.0预测发现miR-28-5p靶向Nrf2基因3'' UTR序列,荧光素酶报告基因实验进一步明确miR-28-5p通过靶向 基因3'' UTR序列调控其转录。结论 miR-28-5p在LPS诱导的ALI中表达上调,并进一步加剧ALI病理进程,其作用机制可能是通过靶向巨噬细胞Nrf2,从而减弱胞内抗氧化能力,促进炎症因子分泌和巨噬细胞的活化。     

马尾松松针粉袋泡茶水提物的急性毒性和致突变性研究

目的:研究马尾松松针粉袋泡茶水提物的急性毒性和致突变性。方法:采用大、小鼠急性毒性试验,Ames试验,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验对马尾松松针粉袋泡茶水提物进行急性毒性和致突变性研究。结果:马尾松松针粉袋泡茶水提物对大、小鼠经口最大耐受量(maxinally tolerated dose,MTD)均大于240.0 g/kg;Ames试验显示,在加与不加S9时各剂量组回变菌落数与自发回变对照组比较差异均无统计学意义(P0.05);小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果显示,各剂量组的微核率和精子畸形率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:在本次实验条件下,马尾松松针粉袋泡茶水提物经口MTD240.0 g/kg,属实际无毒级,未见致突变作用。     

肠系膜静脉血栓形成的临床探讨

肠系膜静脉血栓形成(MVT)是一种少见的肠系膜静脉血管阻塞所引起的内脏淤血性疾病.由于该病人的体征不典型,发病早期很难确诊,往往延误治疗.据报道,MVT后期不行手术治疗者的病死率为92%～100%.我院1998～2002年收治的MVT病人13例.现报告如下:     

GC-MS分析广西产4种栽培胡椒属植物叶中的挥发油成分

目的 分析小毛萎、假蒟、荜茇和山蒟4种植物叶中的挥发油成分.方法 采用GC-MS技术进行分析.结果 挥发油的得率较高,成分较为复杂,既有相同的主要化学成分,也有特异性成分.结论 主要成分的差异,能作为品种鉴别的依据.另外,假蒟中的α-细辛脑含量较高,值得关注.     

手术室护士在术中静脉输血输液的配合体会

手术和麻醉中正确的输入液体是手术中循环管理的重要手段，也是保证病人安全的关键，现就手术室护士在手术中静脉输血输液的配合体会报告如下。     

灵芝三萜酸经Pnpla3基因的降脂效果体外试验——基于长爪沙鼠肝原代细胞的脂变模型

目的建立长爪沙鼠Pnpla3基因敲减的肝原代细胞的脂变模型,并用于评价灵芝三萜酸的降脂效果。方法分离培养长爪沙鼠肝原代实质细胞,以棕榈酸(PA)诱导成肝脂变模型,根据Pnpla3三个外显子序列设计、合成三对Pnpla3基因的干扰RNA载体,并通过q PCR及Western blot法检测Pnpla3的表达量及干扰效率筛选出一对稳转肝实质的干扰载体。以高(1μmol/L)、中(0.1μmol/L)、低(0.01μmol/L)三个剂量的灵芝三萜酸培养细胞,并以阳性药物蛋氨酸(7μmol/L)为对照,检测干扰Pnpla3基因后的细胞甘油三酯(TG)的含量以进行降脂效果观察。结果诱导24 h内,长爪沙鼠肝脂变细胞脂滴增加的较多且大多数细胞形状正常的PA 400μmol/L为造模的合适浓度,以Pnpla3的第二外显子为靶点设计的si RNA2组敲低效果最好,干扰效率高于70%。干扰Pnpla3基因可以起到降低细胞内TG的作用,单独加入中高剂量的灵芝三萜酸有明显的降脂效果(P <0.01),干扰Pnpla3基因与加入灵芝三萜酸的降脂效应具有累积作用(P <0.01)。结论建立了长爪沙鼠肝实质原代细胞的脂变模型,灵芝三萜酸对干扰Pnpla3基因后的长爪沙鼠肝实质细胞中TG的含量有明显的抑制或减轻作用,灵芝三萜酸降脂效应与磷脂代谢相关2个通路(ko00561,ko00564)中Pnpla3基因的表达相关。     

不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响

目的 探讨不同干燥方法对三叶青活性成分含量的影响。方法 选取三叶青中总黄酮、总多酚和多糖3种主要活性成分作为评价指标,分析测定三叶青鲜品及冷冻干燥、真空干燥、热风干燥3种不同干燥方法的三叶青总黄酮、总多酚和多糖含量。结果 三叶青鲜品和3种干燥方法的总黄酮含量分别为7.68,7.73,6.65,6.36 mg/g,总多酚含量分别为8.69,8.88,8.32,6.51 mg/g,多糖含量分别为6.39%,6.52%,4.87%,5.11%;传统的热风干燥方法对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为17.18%,25.09%,20.03%,真空干燥对总黄酮、总多酚和多糖造成的含量损失分别为13.41%,4.25%,23.79%,冷冻干燥的三叶青活性成分含量与三叶青鲜品相当,几乎没有损耗。结论 不同的干燥方法对三叶青活性成分含量影响很大,冷冻干燥能最大程度地保留三叶青活性成分,适合作为三叶青干燥加工方法。