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目的通过观察益心解毒方含药血清对Nox2、Nox4亚基过表达的H9c2心肌细胞NADPH氧化酶活性的影响,揭示其作用环节是否与干预相应亚型的NADPH氧化酶调控环节有关。方法采用PCR方法扩增Nox2、Nox4基因全长序列,经双酶切、连接载体和转化后提取重组质粒,经酶切鉴定的阳性质粒进行DNA测序,测序正确后按照lipofectamine 2000试剂的说明书瞬时转染H9c2细胞,转染后的心肌细胞分组给予不同的药物干预,24 h后检测NADPH氧化酶活性。结果 1含有Nox2/Nox4亚基的重组质粒载体通过测序鉴定,结果与Gen Bank报道的完全一致。2通过荧光显微镜下观察转染72 h后的H9c2细胞,可见大量发绿色荧光的细胞,流式细胞术计数结果显示转染率均在60%左右,符合实验要求。3空质粒载体组、模型组、益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达明显高于正常组(P<0.01,P<0.05);模型组和益心解毒方组的NADPH氧化酶活性表达高于空载体组(P<0.01);模型组NADPH氧化酶活性表达均明显高于其他各组,而益心解毒方各组的NADPH氧化酶活性表达均明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论成功构建大鼠心肌细胞Nox2、Nox4亚基的重组质粒载体,该重组质粒载体可以在心肌细胞中过表达,益心解毒方可以有效地降低NADPH氧化酶活性的表达。提示此复方治疗心衰的机制可能是抑制了Nox2和Nox4型NADPH氧化酶的表达。 相似文献
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双向转诊的现状及趋势研究 总被引:1,自引:0,他引:1
双向转诊是我国医疗卫生体系改革的重点、难点、热点.本研究对关于双向转诊的文献进行了比较系统的梳理,包括转诊流程、转诊模式、转诊满意度、转诊行为分析、转诊制度建设等.同时对国内外专家学者在转诊方面的理论与实践研究进行了归纳和总结,在此基础上提出了当前我国双向转诊所面临的困难、不足,并进行了总结和展望. 相似文献
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目的:采用网络药理学方法对川芎治疗心力衰竭的机制进行分析,为深入研究川芎在心力衰竭方面的作用奠定基础。方法:根据Therapeutic Target Database(TTD)、Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)、中药系统药理学数据库(TCMSP)检索关于心力衰竭的靶点,在中医药综合数据库(Symmap)中搜索关于心力衰竭胸胁刺痛症状的靶点,并结合Uniprot数据库剔除非人源靶点,获得心力衰竭及胸胁刺痛症状的人源靶点,并与Symmap查询的川芎OB值≥30化学成分所对应的人源靶点进行映射,进一步筛选活性成分。利用String数据库和Cytoscape 3.2.1软件将得到的川芎治疗心力衰竭的靶点构造PPI网络分析,采用The Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery(DAVID)数据库进行通路分析,并通过Cytoscape 3.2.1软件构建中药-靶点-成分网络图。结果:得到川芎治疗心力衰竭的靶点共12个,心力衰竭胸胁刺痛的靶点1个,川芎治疗心力衰竭对应的化学成分47个,12个靶点应用DAVID数据库进行KEGG通路分析,得到川芎治疗心力衰竭相关通路29个。结论:川芎通过抑制炎性反应、调控细胞凋亡、改善血管收缩功能等来改善心功能,治疗心力衰竭。 相似文献
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目的:本研究通过分析射血分数保留的心衰(Ejection Fraction Reserved for Heart Failure,HFp EF)患者虚实证候的临床检查指标,探讨HFp EF虚实证候临床检查指标的特征。方法:通过横断面调查研究,收集射血分数保留的心力衰竭患者的一般临床信息与血液检测指标及超声心动等临床检查指标,采用Logistic回归等方法对不同证候HFp EF患者的临床检查指标进行分析。结果:以临床诊断HFp EF虚实证候为因变量,将差异有统计学意义的客观检查指标进行二元逐步Logistic回归分析,最终留在方程中的是心率(Heart Rate,HR)与射血分数(Ejection Fraction,EF)。结论:射血分数保留的心力衰竭中,HR和EF与患者的虚实证候关系密切。 相似文献
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目的 基于动物心肌缺血模型及体外心肌细胞损伤模型探究复方丹参滴丸调控脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)-核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)途径抑制炎症反应治疗心肌缺血的作用机制。方法 采用冠状动脉左前降支结扎术制备大鼠心肌缺血模型,心电图检测心肌缺血情况;Western blotting检测心肌组织LOX途径关键酶LOX5、LOX12、LOX15及下游分子p-NF-κB p65和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的蛋白表达。体外培养H9c2心肌细胞,采用缺氧缺糖6 h诱导心肌细胞损伤模型,荧光倒置显微镜下观察心肌细胞形态;MTT法检测细胞活力;Western blotting检测LOX-NF-κB途径相关蛋白表达。结果 复方丹参滴丸显著抑制心肌缺血大鼠心肌组织中LOX5、LOX12、LOX15和IL-1β的蛋白表达及NF-κB p65的磷酸化水平(P<0.01、0.001)。体外细胞实验结果显示复方丹参滴丸明显改善H9c2心肌细胞缺氧缺糖损伤,显著提高心肌细胞存活率(P<0.01、0.001),降低LOX5、L... 相似文献
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地黄饮子出自《黄帝内经·素问·宣明论方》,其中君药肉苁蓉、巴戟天、熟地黄、山茱萸,温壮肾阳、滋补肾阴、填精益髓;臣药附子、肉桂、麦冬、石斛、五味子,保养真元、滋阴敛液;佐药远志、石菖蒲、茯苓,豁痰开窍;使药薄荷、生姜、大枣和其营卫。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是神经退行性疾病,在中医学中属于呆病的范畴。AD发病机制复杂,涉及多个病理环节,且因其发病隐匿,进程不可逆,危害大、致死致残率高。基于中医理论的中药复方在治疗AD中具有独特优势。近年研究表明,地黄饮子临床治疗AD具有明确疗效,其药理作用机制包括保护线粒体结构与功能、改善能量代谢、抗氧化、调节β淀粉样蛋白前体蛋白(beta amyloid precursor protein,APP)加工和β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)代谢、抗神经元凋亡、调节神经递质、保护突触结构与功能及抗炎作用等多个方面。本文总结近年来地黄饮子治疗AD作用机制的实验研究进展做一综述。 相似文献
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目的 探索在本科生中开展流式细胞术的实验教学与实践,激发本科生的主观能动性,将学到的理论知识进行拓展应用,以便应用到未来的科研中。方法 文章以参与“橘井青苗”计划的本科生为研究对象,层次递进式开展流式细胞术实验方法课程的实践与初探。此实践计划设置了2个递进层次的教学科研一体的实践范例,初阶为小鼠成肌细胞缺氧造模,并通过CCK-8法检测细胞的存活率,进阶为应用流式细胞仪检测小鼠成肌细胞的凋亡情况等。结果 本科生在一周时间内全程参与到实践计划中,通过实验设计和实践,学生掌握细胞扩增、细胞存活率检测、细胞凋亡检测与数据分析,提高了学生的动手能力和创新能力,调查问卷课程满意度达到95%以上。结论 层次递进式开展流式细胞术实验方法课程适合本科生,这种融合科研创新思路、课题设计与执行能力的教学培养方法,能带动学生在实验研究中进行科学规划和使用大型仪器。 相似文献
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目的:利用网络药理学和分子对接的方法,预测大黄素治疗脑缺血中风的作用机制。方法:使用SymMap、TCMSP、OMIM、Drugbank数据库获得大黄素治疗脑缺血中风靶点,并通过Uniprot数据库进行格式统一及非人源靶点的去除。然后利用AlzData数据库进行大黄素治疗脑缺血中风的靶点在大脑细胞中的分布表达情况分析,使用DAVID数据库对其进行KEGG通路分析和GO分析,得到相关通路。结果:大黄素治疗脑缺血中风的潜在作用靶点共10个,分别为CASP3、KDR、PTGS1、TNF、MMP9、PRKCE、PTGS2、MYC、TP53,各自在大脑星形胶质细胞、小胶质细胞、内皮细胞等中有不同程度的表达,涉及KEGG相关富集通路12条、GO生物过程富集条目14条、GO细胞组分富集条目3条、GO细胞功能富集条目2条。分子对接结果发现与CASP3、KDR、PTGS1、TNF、MMP9结合较好。结论:大黄素可能主要通过CASP3、KDR、PTGS1、TNF、MMP9作用于细胞凋亡通路及炎症反应相关等通路来发挥治疗脑缺血中风的作用。 相似文献