中药龟甲HPLC指纹图谱研究

目的:建立中药龟甲的HPLC指纹图谱,以达到鉴别龟甲与其混伪品的目的。方法:收集不同产地的龟甲及其混伪品21批,按上下甲进行分类,共42个样品。通过盐酸水解、脱磷、脱钙等前处理,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)进行衍生化反应,采用C18色谱柱(3. 9 mm×150 mm,3μm),柱温37℃,以乙腈,水,缓冲盐为流动相进行梯度洗脱,流速1. 00 m L/min,检测波长248 nm。采用"中药指纹图谱相似度评价系统"(《中华人民共和国药典》2012版)对正品龟甲上甲与下甲、正品与常见混伪品进行相似度分析。结果:所建立的指纹图谱具有较好的精密度、重现性和稳定性。正品龟甲的上下甲相似度为0. 932～0. 995。正品与混伪品的相似度在0. 90以下者占90. 91%。结论:正品上、下甲的HPLC图谱差异较小,正品与混伪品差异较明显。所建立的HPLC指纹图谱可用于龟甲的质量评价。     

欧李扦插苗质量分级标准研究

目的:制定欧李扦插苗质量分级标准,为郁李仁(欧李)药材规范化生产奠定基础。方法:采集河南省洛阳市新安县一年生欧李扦插苗30份,每份15株,总共450株,测定株高、地径、分枝数、主根长、主根直径、侧根数,利用Excel 2010和SPSS 19.0软件进行统计、分析,确定分级的主要指标,并制定扦插苗分级标准。结果:株高、地径和分枝数是欧李扦插苗质量分级的主要指标。结论:制定欧李扦插苗的3个等级,一级苗:株高≥52 cm,地径≥5.0 mm,分枝数≥2.9;二级苗:52 cm株高≥15 cm,5.0 mm地径≥3.3 mm,2.9分枝数≥1.5;三级苗:株高15 cm,地径3.3 mm,分枝数1.5。     

龟甲中具有潜在药理活性的miRNA初步筛选

目的:对龟甲中存在的miRNA进行提取并测序,并对具有潜在药理活性者进行初步筛选。方法:对生龟甲进行miRNA转录组测序,选出count值超过10 000的miRNA,并利用实时荧光定量PCR技术在龟甲、乌龟背甲、黄喉拟水龟背甲RNA中分别测定其拷贝数。结果:转录组数据中共筛选得到3条miRNA,其中1条为已知的xtr-miR-22;2条为未知,分别命名为NW-006642957-1-500和NW-006622633-1-195。荧光定量PCR结果显示xtr-miR-22在龟甲及乌龟背甲中拷贝数明显高于同属动物黄喉拟水龟,且其靶基因预测结果显示其能够靶向调控PML基因的表达。结论:生龟甲在炮制加工后存在未降解的miRNA,其中xtr-miR-22具有治疗早幼粒细胞白血病的潜在药理活性。     

濒危中药材祖师麻资源现状调查与分析

为了摸清我国中药材祖师麻野生分布区和人工栽培的资源现状,分析野生祖师麻适生生境和致危因素,为其资源的合理利用、保护以及人工种植提供依据,课题组采取走访与现地样方相结合的调查方法以及线路样方法和植被+土壤类型图面积结合的估算法对陕西、甘肃、四川和青海4个省区23个县的祖师麻野生资源进行了调查。结果发现我国野生祖师麻分布范围与历史记载没有发生明显变化,然而种群密集程度却发生了较大改变;很多地区野生资源蕴藏量严重下降,部分地区濒临枯竭。根据调查结果估算,4个省区23个县当前野生祖师麻资源蕴藏量不足600 t;同时,只在甘肃陇南康县杨河坝村海拔2 800 m左右的山地发现了人工栽培的33 000 m22年龄的祖师麻,没有形成药材商品。毁灭性的采挖以及生长周期过长是导致祖师麻野生资源蕴藏量急剧下降,濒临枯竭的重要原因。栽培品日后必将成为其药材资源的主要来源。因此,保护祖师麻适生生境,制定合理采收政策,加强政府部门监管力度,收集并建立种质资源圃和种子库,在此基础上开展祖师麻良种选育、快速繁殖技术以及快速生长技术的研究已迫在眉睫。     

六神曲中辣蓼的本草考证

通过对六神曲和辣蓼的本草学研究,考证六神曲中辣蓼的基原,理清六神曲组方中辣蓼的正品来源,以利于保证中药六神曲的药用质量。考查古今文献涉及神曲组方和辣蓼的形态特点和应用的记载,结合神曲和辣蓼的关系进行综合分析。经过文献考证,六神曲中辣蓼的正品来源为蓼科水蓼Polygonum hydropiper Linn.的全草。中药六神曲中辣蓼药用品种混乱,地方习用品较多,历代本草原植物描述不明确以及现代文献记载来源不一,因此应正本清源,确保中药六神曲的药用质量。