重组可溶性人CD40L诱导人脐静脉内皮细胞损伤

目的:探讨重组可溶性人CD40L(rsh CD40L)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的损伤作用及其在动脉粥样硬化中的作用。方法:应用rsh CD40L刺激人脐静脉内皮细胞12 h;MTS法观察HUVECs的生存活性,ELISA法测内皮细胞E-选择素(E-selectin)、细胞间黏附分子(ICAM)-1、组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)表达的变化,比色法测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果:与正常组比较,不同浓度的rsh CD40L(0.5、1、2、3 mg/L)对内皮细胞的生存活性无明显影响;0.5 mg/L rsh CD40L即可增加内皮细胞E-selectin、s ICAM-1、TF、TFPI的分泌,差异有统计学意义(P0.01),同时增加内皮细胞MDA的含量、降低SOD活性(P0.05)。结论:0.5~3 mg/L rsh CD40L对内皮细胞生存活性无明显影响,但已经引起内皮细胞功能障碍,增加内皮细胞炎症和外源性凝血反应,诱导内皮细胞脂质过氧化物损,使其抗氧化能力下降。     

基于网络药理学及实验验证探究芪苈强心胶囊治疗射血分数保留型心衰的作用机制

目的 基于网络药理学及实验验证探讨芪苈强心胶囊治疗射血分数保留型心衰（heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF）的作用机制。方法 将44个明确鉴定的芪苈强心胶囊体内代谢物检识有效成分，利用Swisstargetprediction、pharmmapper平台预测化合物靶点，OMIM、DisGenet、GenCard数据库中检索HFpEF疾病靶点；取交集靶点，利用String数据库和Cytoscape 3.7.2软件进行蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）和拓扑分析；Metescape平台对共同靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能富集分析及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。构建醋酸脱氧皮质酮（deoxycorticosterone acetate,DOCA）盐敏感型HFpEF大鼠模型，给予沙库巴曲缬沙坦或芪苈强心胶囊进行干预，给药8周后，利用小动物超声成像系统...     

周络通提取物Z-6对高糖所致Schwann细胞损伤和PI3K/Akt/nNOS通路的影响

 目的:探讨磷酯酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/神经元型一氧化氮合酶（PI3K/Akt/nNOS）信号通路在周络通提取物抗糖尿病周围神经病变中的作用。方法:将体外培养的雪旺（Schwann）细胞分为正常组（D-葡萄糖25 mmol/L）、高糖模型组（D-葡萄糖100 mmol/L）、周络通提取物活性部位5（Z-5）+高糖组、周络通提取物活性部位6（Z-6）+高糖组、周络通+高糖组和甲钴胺+高糖组。采用CCK-8试剂盒检测各组细胞的生存活性,相关试剂盒分析培养上清中NO含量和细胞内Ca2+-ATPase活性的变化,流式细胞仪分析细胞的凋亡情况, Western blotting方法检测 Bcl-2、 Bcl-xL、 Bax、 Bak和caspase-3蛋白表达及nNOS和Akt的磷酸化情况。利用PI3K和Akt的显性负性突变体瞬时转染Schwann细胞,探讨PI3K/Akt信号通路在周络通提取物抗糖尿病周围神经病变中的作用。结果:与模型组比较,周络通提取物Z-6能显著提高高糖损伤后Schwann细胞的存活率,提高NO分泌量并明显上调Bcl-2、 Bcl-xL蛋白的表达及Akt、nNOS 的磷酸化水平,同时显著降低细胞凋亡率及Bax、 Bak、 caspase-3蛋白的水平,利用PI3K的显性负性突变体（δp85）阻断nNOS的上游信号通路PI3K/Akt后,NO分泌量减少,但未对Z-6上调nNOS 和Akt磷酸化的作用产生明显影响。结论: 在高糖损伤条件下,周络通提取物Z-6上调nNOS蛋白磷酸化水平,促进抗凋亡因子的表达,抑制促凋亡因子及caspase-3关键蛋白酶的表达,降低Schwann细胞凋亡率,从而提高高糖损伤细胞的存活率,这些作用与PI3K/Akt/nNOS通路的关系有待进一步研究。     

生活垃圾填埋作业面恶臭影响的气象因素分析

利用前期研究得到的作业面恶臭源强数据,以某一大型填埋场作业面为研究对象,采用面源高斯扩散模型分析了作业面在不同季节、风速和稳定度等气象条件下对周围恶臭影响情况.结果表明：不同季节气温和气象稳定度对填埋作业面的恶臭影响范围作用很大,而风速的影响表现为小风速时影响范围大,而大风速时尽管散发源强增大,但由于扩散输送条件变好,恶臭的影响范围反而变小.对于填埋作业面达10000m2的填埋场,在气温大于26℃、稳定度E、风速持续小于3 m/s的气象条件下,作业面对下风向的恶臭影响距离可达8 km以上.     

多发性骨髓瘤患者病理分期与高凝状态

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者凝血特点与病理分期的相关性。方法选取我院2012年8月至2014年8月54例MM患者为研究对象,根据DS(Durie-Salmon)分期法分为Ⅰ期(24例)、Ⅱ期(18例)、Ⅲ期(12例)三期,比较不同DS分期患者活化部分凝血酶时间(a PTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fbg)、D二聚体(D-D)差异,同时比较不同分期患者静脉血栓栓塞(VTE)发生率。结果 MM患者a PTT、PT、TT下调;D-D、Fbg显著增高(P0.05),且随着MM病理分期升高,变化亦更显著(P0.05)。本文共5例发生VTE,发生率9.3%(5/54),其中Ⅰ期0.0%,Ⅱ期3.7%(2/54),Ⅲ期5.6%(3/54)Ⅲ期发生率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(χ2=9.000、χ2=4.000,P0.05)。结论 MM患者体内存在明显的高凝状态,且与病理分期有较好的相关性。     

凝血纤溶活性检测对甲减病情程度的预测价值

目的研究凝血纤溶活性检测对甲状腺功能减退(甲减)病情程度的预测价值。方法选择2014年4月至2015年4月我院70例甲减患者作为观察组,再根据促甲状腺激素(TSH)水平将患者分为轻度甲减组与重度甲减组,另选择同一时期60例来我院体检健康合格者最为对照组,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测三组D二聚体(DD)、纤维酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)、纤维蛋白原(Fbg)及组织型纤溶酶原激活物(t-PA)凝血纤溶活性及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C),分析其在诊断和预测甲减病情严重程度中的应用价值。结果轻度甲减患者D-D低于对照组,PAI-1、TAFI、Fbg及t-PA高于常规对照组,重度患者D-D为高于对照组,PAI-1、TAFI、Fbg及t-PA低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。三组TC、TG及LDL-C等血脂水平比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论甲状腺功能减退对机体凝血纤溶系统具有显著影响,检测凝血纤溶指标对评估患者病情具有参考价值。     

肿瘤细胞裂解物疫苗与其修饰的树突状细胞联合抗A20鼠淋巴瘤的作用

将A20淋巴瘤细胞,反复冻融,获得肿瘤细胞裂解物的抗原肽,以来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2小肽为佐剂,通过双功能偶联试剂戊二醛偶联制备肿瘤细胞疫苗A20-M2,偶联产物在体外修饰未成熟的DC,通过检测负载肿瘤细胞抗原的DC细胞分泌的细胞因子以及抗原来确定被修饰DC细胞的成熟度,获得成熟DC即获得DC疫苗。用A20-M2与DC两种疫苗联合给药治疗小鼠,实验结果显示,激发的免疫应答对于A20肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低(P<0.01),通过ELISA法,从小鼠血清中检测到高滴度抗细胞裂解物类抗体,淋巴细胞增殖试验显示疫苗联合给药后能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖反应。A20-M2能够有效的刺激DC细胞成熟,A20-M2与成熟DC细胞联合给药能够有效的抑制小鼠A20淋巴瘤的生长。     

人源血管内皮生长因子突变体Ⅱ的克隆表达、分离纯化及初步鉴定

构建人源血管内皮生长因子突变体hVEGF121Ⅱ的重组原核表达质粒,获得hVEGF121Ⅱ蛋白用于制备抗血管生成作用更强的抗肿瘤疫苗。利用PCR技术,在已构建的hVEGF121Ⅰ突变体的基因末端引入热休克蛋白mHSP70的407-426两段串联重复序列的编码基因,PCR产物经Hind III和Nco I双酶切后连接到经同样限制性内切酶切过的原核表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,乳糖诱导表达,超声破碎菌体,包涵体经洗涤、溶解、稀释复性、离子交换层析得到目的蛋白hVEGF121Ⅱ,Western-blot鉴定。结果成功构建了hVEGF121Ⅱ蛋白的表达质粒pET-28a(+)-hVEGF121Ⅱ,重组菌株经乳糖诱导后,目的蛋白表达量占全菌蛋白的62%,分离纯化后纯度达到95%,hVEGF121Ⅱ蛋白的单体和二聚体都可以和VEGF抗体结合。重组hVEGF121Ⅱ蛋白的表达成功为进一步对其进行免疫学研究奠定了基础。     

变应性鼻炎发病流行病学特征及与血清IFN-γ及IL-4水平的相关性分析

目的 分析巴中市变应性鼻炎发病(AR)的流行病学特征及与血清IFN-γ及IL-4水平的相关性研究，为临床上防治AR提供理论依据。方法 采用多阶段分层随机的方法调查2019年1月至2020年1月巴中市三甲医院耳鼻喉科就诊的人群，采用面对面问卷调查形式调查人群的一般情况，统计AR的发病人数，AR的主要临床症状及相关症状，合并疾病情况，根据病情严重程度分为轻度组和中重度组，抽取AR患者肘静脉血5 mL,采用变应原特异性IgE抗体检测试剂盒(免疫印迹法)测定22种变应原，采用酶联免疫吸附法测定血清IFN-γ及IL-4水平；对变应性鼻炎患者血清IFN-γ及IL-4水平与病情严重程度进行Pearson相关分析；结果 1 243例人群完成了问卷，AR患病率为275例(22.12%);不同年龄段AR患病率间差异具有统计学意义(χ²=6.809,P<0.05),19～40年龄段AR患病率最高(28.40%);不同职业段AR患病率间差异具有统计学意义(χ²=7.914,P<0.0),其工人AR患病率最高(26.48%);巴中市275例AR患者中，其中...