海藻不同方法提取物体外抗病毒活性研究

目的:研究海藻4种不同方法提取物的体外抗病毒活性。方法:以呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)、柯萨奇病毒B5(COXB5)、肠道病毒71型(EV71)4种病毒感染的人喉癌上皮细胞(Hep2)、横纹肌瘤细胞(RD)为模型,运用4种不同方法提取的海藻提取物对4种病毒感染的细胞进行治疗,并设利巴韦林、阿昔洛韦作为阳性对照药。采用细胞病变效应法(CPE法)结合4,5-二甲基噻唑-2,5-二苯基四唑溴化物(MTT)比色法检测细胞存活率,计算药物的治疗指数TI值,分析4种不同提取方法提取的海藻提取物对4种病毒的抑制作用。结果:海藻各提取物均有不同程度的抗病毒活性,其中水提取物抑制作用最强,其对RSV、HSV-Ⅰ、COXB5、EV71的治疗指数TI值分别为413.00、310.83、7.36、176.07,与阳性对照药效果相当;乙醇超声提取物对COXB5效果较好,TI值为19.97。结论:海藻提取物具有体外抗RSV、HSV-Ⅰ、COXB5、EV71活性的作用。     

醒脑益智组分中药对β-淀粉样蛋白（1-40）诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的：探讨醒脑益智组分中药对β-淀粉样蛋白（Aβ_1-40）诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响。方法：以SH-SY5Y细胞体外培养为研究对象,Aβ_1-40损伤细胞建立模型,石杉碱甲（6 μg·mL^-1）和不同浓度（70,35,17.5 μg·mL^-1）药物干预,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率;细胞膜损伤测定乳酸脱氢酶（LDH）漏出率;酶联免疫吸附法检测脑源性神经营养因子（BDNF）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量;Hochest 33258染色观察药物对损伤细胞的作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果：醒脑益智组分中药能明显改善Aβ_1-40（15 μmol·L^-1）诱导的神经细胞存活率,降低LDH漏出率,改善细胞内BDNF含量,降低TNF-α水平,并抑制细胞的凋亡。结论：醒脑益智组分中药可以改善Aβ_1-40诱导的SH-SY5Y细胞损伤,并抑制其凋亡,其机制可能与改善BDNF水平,调节免疫及相关凋亡基因的表达有关。     

金银花总有机酸纯化工艺的优化

目的优化金银花总有机酸纯化工艺。方法比较6种大孔树脂的吸附率和解吸率后,分别考察上样液质量浓度、pH、乙醇体积分数对吸附量、吸附率、解吸率的影响。结果最佳条件为选择HPD600型大孔树脂,以含7.56 mg/m L总有机酸、p H 2的提取液为上样液。先用2 BV去离子水洗掉蛋白质和糖类,再用4 BV 10%乙醇去除一部分杂质,最后用50%乙醇洗脱4 BV。纯化后,总有机酸含有量达76.08%。结论 HPD600型大孔树脂可有效富集纯化金银花总有机酸。     

金银花多糖的提取纯化及抗病毒活性研究

目的：提取纯化金银花多糖,并研究金银花多糖的体外抗病毒活性。方法：采用醇沉法提取多糖并用酶法纯化多糖,运用细胞培养技术,对纯化后的多糖进行体外抗病毒实验,以MTT染色法检测细胞活性,结合CPE法研究金银花多糖对单纯疱疹病毒（HSV-1）、柯萨奇病毒B5（COX-B5）、柯萨奇病毒B3（COX-B3）和肠道病毒71型（EV71）的抑制作用。结果：多糖纯化后含量为54.04%,金银花多糖对COX-B5、EV71、COX-B3、HSV-1的治疗指数分别为4.84,63.85,4.77,51.25。结论：金银花多糖具有体外抗HSV-1、EV71、COX-B5、COX-B3的活性,为临床治疗提供理论依据。