杜仲醇提取物诱导骨髓间充质干细胞成骨分化中的Wnt信号途径

背景：近年来,中药及中药有效部分对骨质疏松的干预和治疗作用的报道较多,但涉及细胞成骨分化调控的信号途径的报道较少。目的：观察杜仲诱导大鼠骨髓问充质干细胞成骨分化过程中Wnt信号途径相关基因表达的变化。方法：将第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,接种到6孔培养板中,每孔1×10^3个细胞,24h后更换诱导培养基（含体积分数为7.5％胎牛血清的DMEM／F12（1：1）加1／1000浓度的杜仲醇提取物）。阴性对照组仍为正常培养基培养。诱导8h,1d,3d和7d时采用RT-qPCR法测定Wnt信号途径巾Fzd和LRP受体系列、β-catenin、核内Wnt调控靶基因系列及Wnt抑制因予（WIF1）等表达变化。结果与结论：与阴性对照组比较,诱导3d后Fzd2表达升高11．86倍,Fzd3升高达到2倍;诱导7d后,Fzd2表达升高5．12倍,Fzd3恢复到正常水平：β-catenin在诉导3d时表达升高达2倍：WIF1在诱导3d和7d后表达显著下降。结果提示Wnt信号途径可能参与了杜仲促骨髓间充质干细胞成骨分化过程。     

针刺联合西医常规疗法治疗气滞血瘀型突发性耳聋疗效及对血液流变学的影响

目的探讨针刺联合甲钴胺片、氟桂利嗪治疗气滞血瘀型突发性耳聋疗效及对血液流变学的影响。方法将94例气滞血瘀型突发性耳聋患者随机分为2组,对照组47例给予甲钴胺片、氟桂利嗪治疗,观察组47例在此基础上给予曲鬓、听会、耳门、翳风为主穴及双侧血海、足窍阴、太冲穴为配穴的针刺治疗,观察2组治疗前后听阈值、耳聋评分及血清过氧化脂质(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)、血液流变学指标变化情况,统计2组疗效及不良反应发生情况。结果 2组治疗后听阈值、耳聋评分及血清LPO、VE-cadherin水平及高切全血黏度、低切全血黏度、血浆黏度、血小板聚集率、血细胞压积均明显低于治疗前(P均0.05),且观察组明显低于对照组(P均0.05);治疗后2组SOD水平明显高于治疗前(P均0.05),且观察组明显高于对照组(P0.05);观察组治疗后总有效率显著高于对照组(P0.05);2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论针刺联合甲钴胺片、氟桂利嗪治疗气滞血瘀型突发性耳聋疗效较佳,且可显著降低血清LPO、VE-cadherin水平及改善血液流变学,且安全。     

小鼠SP2／0细胞移植瘤的遗传修饰位点

背景与目的:我们的研究发现BALB/c小鼠是SP2/0细胞移植瘤的敏感小鼠,而C57BL/6J小鼠则是抗性小鼠.本研究利用这两种近交系小鼠和它们杂交的F2代进行移植肿瘤重量遗传修饰位点的检测.方法:对208只BALB/cxC57BL/6J的F2代小鼠左后腿皮下注射5.0×106个SP2/0细胞,在注射后第17天处死小鼠,记录移植瘤的数量和重量.采用覆盖小鼠所有染色体的85个微卫星标记,对208只F2代小鼠进行全基因组扫描,并进行复合区间作图.结果:发现8个变异解释率>10%的位点与肿瘤生长有关(P<0.01),它们分别位于1号(DIMit113,55cM和D1Mit407,52 cM)、4号(D4Mit226,41cM)、9号(D9Mit302,55cM)、10号(D10Mit264,42cM)、11号(D11Mit115,35cM)、14号(D14Mit125,45cM)和18号染色体(D18Mit123,31cM)上.结论:个体对SP2/0细胞移植瘤的易感性受多位点变异控制,找到目标位点有助于基因单倍型确认和肿瘤易感性/抗性基因的精细研究.     

小鼠脊髓发育候选基因Wnt7b的初步研究

目的:探讨Wnt7b基因及Wnt信号系统分子对小鼠脊髓发育的作用。方法:基因测序比较A/J和C57BL/6J两种小鼠Wnt7b基因开放阅读框架序列差异;以RT-PCR方法测定Wnt7b基因在两种小鼠组织中的表达差异;免疫组化法测定Frizzled在2种孕14天胎鼠脊髓上的表达和分布。结果:测序结果中发现两种小鼠Wnt7b开放阅读框架序列结构具有差异;在2种小鼠8种组织中,脊髓、肌肉、脾和肾中的Wnt7b基因表达具有明显差异;免疫组化的测定表明,发育14天的胎鼠脊髓上的Frizzled表达强度和分布范围具有显著差异,尤其是A/J小鼠在神经管周围表达明显强于C57BL/6J。结论:基因表达差异和基因结构差异提示,Wnt7b基因与脊髓发育具有一定的关联,应为一脊髓发育候选基因;Frizzled的强表达与脊髓发育的抑制相关,Wnt7b的信号转导途径介导了控制脊髓发育的过程。     

人乙醇脱氢酶原核表达载体构建及产物活性测定

目的:构建人乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)原核表达载体,在表达菌BL21中进行体外原核表达并测定ADH蛋白的酶学性质。方法:用RT-PCR技术从人肝RNA中克隆ADH开放阅读框架序列,并与表达载体pET-5a连接、转化入宿主菌BL21中,并经培养、筛选、酶切和测序鉴定。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达菌并测定表达蛋白的酶学参数。结果:原核表达载体pET-5a-ADH构建成功;表达蛋白分子量在40 kD左右;酶学测定表明表达蛋白是一种耐酸、耐高温的脱氢酶,钾离子和三价铁离子对其酶活性有促进作用,二价金属离子对其活性有抑制作用。结论:人ADH原核表达载体pET-5a-ADH成功构建,原核表达产物具有一定的ADH蛋白活性。该研究为进一步了解ADH酶学性质,探讨酶活性多态性与疾病的关系打下基础。     

临床病例讨论教学法在医学遗传教学中的应用

医学遗传学教学中应用临床病例讨论教学法,能激发学生学习主动性,提高学生独立思考及综合分析能力,作为一种公认的培养学生综合能力的教学方法是值得推广的教学模式之一。本文探讨了在医学遗传学教学中应用临床病例讨论教学法的应用原则、具体内容及实例、实施步骤、教学效果及在今后教学中应注意的问题。     

利用绘本故事开展幼儿足球活动

绘本题材广泛,其中运动类的绘本嫁接到相对应的运动项目中可以产生良好的效应,帮助幼儿积累运动技能,提高运动热情。在开展足球运动时,可以利用绘本阅读来帮助幼儿提高足球活动的训练热情。绘本剧情中"嫁接"足球的途径绘本阅读属于静态的阅读,教师可以在绘本中融入足球素材,引导幼儿学会挖掘绘本中的各种元素。     

应用Norplant Ⅱ型皮下埋植剂避孕患者阴道出血期过长及不规则阴道出血原因探讨

目的探讨应用Norplant Ⅱ型埋植剂后出现阴道出血期过长及不规则阴道出血的原因.方法选择要求应用埋植剂的健康妇女216例,在月经周期第五天于左上臂皮上无菌条件下埋植Norplant Ⅱ型埋植剂2根每根（含左旋18-甲基炔诺酮75mg）.结果埋植后发生阴道出血过长或阴道不规则出血发生率为33%.结论埋植剂作为外源性孕激素进入机体后,不仅抑制了LH和FSH峰值,而且也明显抑制了卵巢的基础内分泌功能,E2和P的持续低水平是造成阴道出血过长及不规则阴道出血的主要原因.     

Sox6基因和Col2a1在大鼠bMSCs体外成软骨分化中表达及其意义

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Sox6基因和Ⅱ型胶原α1(Col2α1)表达水平的变化及其意义.方法 2个月龄SD大鼠分离bMSCs,置含15％胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养.传至第3代后,细胞分为诱导组和未诱导组,诱导组在培养基中添加含转化生长因子β1(TGF-β1)的诱导剂,分别在诱导后3、6、12、24 h、3、7和14d提取细胞总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Sox6基因和Col2α1基因的表达.同时应用细胞免疫化学法检测诱导14d的Col2α1的表达.结果 与未诱导组细胞比较,bMSCs在TGF-β1的诱导下,形态上发生软骨样细胞变化;诱导后6h,Sox6基因的表达上升6.3倍(P＜0.01),随后迅速下降,3-14 d维持在4.0-4.7倍水平;Col2α1基因的表达量在诱导后3d达1.9倍,7d和14d分别达14.3和35.8倍(P＜0.01).诱导组可见大量Ⅱ型胶原阳性细胞.结论 bMSCs在体外可以分化为软骨样细胞,Sox6基因在bMSCs的成软骨分化的早期和晚期都发挥了一定的作用.     

面向临床的医学遗传学课程建设

医学遗传学是遗传学和医学相互渗透、相互结合的学科。为了使学科教学与学科发展相适应,本文从医学遗传学学科发展以及面向临床的课程建设实践出发,为医学遗传学的教学改革与课程建设提出了建议。