胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后血清自由基水平和抗氧化酶活性的影响

目的:通过正交试验优化胡黄连苷Ⅱ在大鼠脑缺血损伤中的抗氧化作用及其最佳治疗剂量和时间窗。方法:应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型,按照正交试验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗,并通过硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法和光化学方法分别测定血清中脂质过氧化物丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)的含量。黄嘌呤氧化酶法、化学比色法和光化学方法分别检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)和过氧化氢酶(CAT)的活性。结果:胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量,根据血清中MDA、NO和H2O2的含量分析,分别为1.5 h/10 mg、1.5 h/20 mg和1.5 h/10mg;根据血清中SOD、GSHPx和CAT的活性分析,分别为1.5 h/20 mg、1.5 h/10 mg和1.5 h/20 mg。结论:根据用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的原则综合评价,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5 h腹腔注射10²0 mg/kg体重。     

胡黄连苷Ⅱ在大鼠脑缺血损伤中的抗氧化作用及其最佳治疗剂量和时间窗

目的通过正交试验优化胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳剂量和时间窗。方法应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型,按照正交试验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗。应用硫代巴比妥酸法、硝酸还原酶法和光化学法,分别测定血清和脑组织中脂质过氧化物丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)的含量。结果胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳效果,根据血清MDA、NO和H2O2含量分析,分别为脑缺血1.5 h腹腔注射10、20、10 mg/kg体质量。根据脑组织MDA、NO和H2O2含量分析,分别为脑缺血1.5 h腹腔注射10、20、20 mg/kg体质量。结论从用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的角度综合评价,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的治疗时间窗和剂量最佳组合为脑缺血1.5 h腹腔注射10～20 mg/kg体质量。     

胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血性损害和基质金属蛋白酶-9表达的影响及治疗的最佳时间窗与剂量的选取

目的探讨胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血性损伤和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,以及最佳治疗时间窗与剂量的选取。方法将174只Wistar大鼠随机分为脑缺血组、正常对照组和治疗组,按正交试验设计治疗组大鼠再分为缺血1.0 h、1.5 h、2.0 h、2.5 h,以及分别用胡黄连苷Ⅱ5 mg/kg、10 mg/kg、20mg/kg和40 mg/kg亚组。用双侧颈总动脉结扎法制作脑缺血大鼠模型,治疗组大鼠按相应时间点和剂量经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ。用HE染色观察脑变性细胞指数(DCI)及形态;电镜观察脑组织超微结构。免疫组化染色和Western blot法检测脑组织MMP-9蛋白水平,逆转录(RT)-PCR检测MMP-9 mRNA水平。结果脑缺血组大鼠脑组织损害和MMP-9表达水平明显高于正常对照组(均P0.05)。与脑缺血组比较,治疗组的脑组织损害及DCI和MMP-9表达水平明显减轻和降低(均P0.05)。治疗组各亚组间两两比较,缺血1 h亚组与2 h、2.5 h亚组间脑DCI的差异有统计学意义(均P0.05);缺血2 h与2.5 h亚组间的脑MMP-9阳性细胞指数,缺血1 h与1.5 h、2 h亚组,1.5 h与2.5 h亚组,2 h与2.5 h亚组间的脑MMP-9蛋白水平的差异均有统计学意义(均P0.05);以及剂量5 mg/kg与20 mg/kg亚组间的脑MMP-9 mRNA水平的差异有统计学意义(均P0.05)。各剂量亚组间的脑DCI、MMP-9阳性细胞指数和蛋白水平的差异均无统计学意义(均P0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ能抑制大鼠脑缺血后MMP-9的表达,并有显著的脑保护作用。按治疗时间窗最大化和用药剂量最小化的原则,其最佳的治疗时间窗为脑缺血后2 h内,剂量为(10~20)mg/kg。     

胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血损伤后S100β蛋白表达的影响

目的:通过正交试验优化胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量.方法:应用双侧颈总动脉结扎法建立前脑缺血模型,按照正交试验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗.应用Holzer胶质细胞染色法观察胶质细胞反应性增生,末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP缺口末端标记(TU-NEL)法检测细胞凋亡,免疫组化染色和Western blotting检测神经胶质细胞标志蛋白(S100β)表达,逆转录-PCR定量检测脑组织S100β mRNA表达水平.结果:胡黄连苷Ⅱ可以明显抑制脑缺血损伤后胶质细胞反应性增生、神经细胞凋亡以及S100β表达.其最佳治疗时间窗和剂量,根据TUN EL染色结果分析为脑缺血2.0h腹腔注射5mg/kg体重,根据免疫组化、Western blotting和RT-PCR结果分析为脑缺血1.5h腹腔注射5mg/kg体重.结论:胡黄连苷Ⅱ可能通过抑制S100β表达减轻缺血性脑损伤.从治疗时间窗最大化和用药剂量最小化的角度综合评价,其最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5-2.0h腹腔注射5mg/kg体重.     

胡黄连苷Ⅱ对大鼠缺血脑组织神经元特异性烯醇化酶、S100B和髓鞘碱性蛋白表达的影响

目的 通过正交实验优化胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳剂量和时间窗.方法 应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠前脑缺血模型,按照正交实验设计分组,经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗,酶联免疫吸附法检测脑组织中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经胶质细胞标志蛋白（S100B）、髓鞘碱性蛋白（MBP）的含量,综合评价胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的效果.结果 胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为：①根据脑组织NSE含量分析为恼缺血1.5 h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ 10 mg·kg-1体重;②根据脑组织S100B含量分析为脑缺血1.5 h给予胡黄连苷Ⅱ 20 mg·kg-1;③根据脑组织MBP含量分析为脑缺血1.5 h腹腔注射胡黄连苷Ⅱ 10 mg·kg-1.结论 根据治疗时间窗最大化和用药剂量最小化原则综合评价,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5 h腹腔注射10～20mg·kg-1体重.     

胡黄连苷Ⅱ在大鼠脑缺血损伤中治疗剂量和时间窗的优化

目的探讨胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的最佳治疗剂量和时间窗。方法应用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠脑缺血模型,将48只大鼠模型,按二因素四水平[L16(45)]正交试验设计分组。治疗时间窗设定缺血1.0、1.5、2.0、2.5 h,共4个水平,治疗剂量设定5、10、20、40 mg/kg共4个水平。按照设定剂量经腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和脑组织水通道蛋白4(AQP-4)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和环氧合酶2(COX-2)的水平,评价胡黄连苷Ⅱ治疗大鼠脑缺血损伤的疗效。结果①根据血清和脑组织AQP-4水平分析结果,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血2.0 h,腹腔注射20 mg/kg;脑缺血1.5 h,腹腔注射20 mg/kg。②根据血清和脑组织MMP-9水平分析结果,最佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血1.5 h,腹腔注射20 mg/kg;脑缺血2.0 h,腹腔注射20 mg/kg。③根据血清和脑组织COX-2水平分析结果,最佳治疗时间窗和剂量分别为脑缺血1.5 h,腹腔注射10 mg/kg;脑缺血1.5 h,腹腔注射20 mg/kg。结论根据用药剂量最小化和治疗时间窗最大化的原则综合评价,根据AQP-4、MMP-9、COX-2测定结果,胡黄连苷Ⅱ治疗脑缺血损伤的最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1.5～2.0 h,腹腔注射剂量10～20 mg/kg。