反相高效液相色谱法测定人卵泡液中异丙酚的药物浓度

 目的建立人卵泡液中异丙酚的反相高效液相荧光检测方法。方法采用Agilent1100高效液相色谱仪,色谱柱为AgilentExtend-C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm);以甲醇-水(77∶23)为流动相,流速1.0mL·min^-1;荧光检测,激发波长为276nm,发射波长为310nm,以百里酚作为内标。结果卵泡液中异丙酚与内标百里酚得到较好的分离,卵泡液中内源性杂质不干扰测定。卵泡液中异丙酚的线性范围为0.108~5.4mg·L^-1,标准曲线为A=0.2074ρ-0.0012（r=0.9993）,检测限为54μg·L^-1,定量限为108μg·L^-1。低、中、高3个质量浓度的方法回收率分别为117.9%、101.7%、99.4%;日内RSD分别为4.10%、1.28%、0.20%（n=5）;日间RSD分别为4.34%、2.33%、0.61%（n=5）。结论本方法简单、准确;专属性强,灵敏度高,可用于临床药动学研究。     

逍遥散对皮质酮诱导的PC12损伤模型保护作用及神经保护成分分析验证研究

目的 通过探究逍遥散的神经保护作用及其化学组成,发现逍遥散中可能发挥神经保护作用的有效活性成分。方法 采用水提法提取逍遥散,通过高分辨质谱-液相色谱质谱联用仪分析提取液的化学成分;制备逍遥散含药血清;构建皮质酮（Corticosterone,CORT,400 μmol/L）诱导PC12细胞损伤模型,检测含药血清对PC12细胞增殖率的影响;用SIMCA软件进行细胞增殖率-成分含量相关性分析,找到逍遥散中可能具有神经保护作用的化合物。结果 与模型组相比,逍遥散含药血清可减轻CORT诱导的细胞损伤,并促进细胞增殖（P=0.000）。液质谱图结合软件分析比对发现,主要药效化合物有：芍药苷、甘草酸、甘草苷、迷迭香酸、没食子酸、2-苯基乙醛、（15Z）-9,12,13-Trihydroxy-15-octadecenoic acid、丹酚酸B、甘草皂苷G2等,单体验证结果显示苯乙醛具有一定的神经保护作用（P=0.000）。结论 证明逍遥散具有神经保护作用,分析并鉴定出55种化合物有可能是其发挥作用的主要成分,发现逍遥散中未曾报道的7种可能具有神经保护作用的化合物,并验证出苯乙醛具有神经保护作用且此前从未报道。本研究成果将为阐明逍遥散神经保护作用的物质基础提供参考,也为拓展逍遥散的临床应用提供数据支撑。     

应急隔离病区护理质量标准化管理路径的构建与应用效果

目的 构建应急隔离病区护理质量标准化管理路径,为医院其他病区或今后突发公共卫生事件组建的护理团队实施临床护理工作提供参考依据。方法 通过对武汉中南医院实地考察、现场评估及借鉴护理工作经验,同时查阅国内外文献作为证据支持,小组讨论的基础上构建“病区护理质量标准化管理路径”草案,通过德尔菲专家咨询法对专家进行两轮咨询,构建病区护理质量标准化管理路径方案。临床实施后进行质量评价。结果 两轮专家函询的权威系数分别为0.915和0.940,两轮咨询专家意见的协调系数为0.411和0.619。方案实施后病区护理质量评分为96分,护士工作满意度100%,患者满意度97.5%。结论 专家对护理质量标准化管理路径方案的各级条目咨询意见趋于一致,专家积极性和权威性高,所形成的条目能较好地满足临床需要,提高了临床护理质量,达到患者满意、护士满意,为医院其他病区或今后突发公共卫生事件组建的护理团队实施临床护理工作提供了参考依据。     

甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液的稳定性考察

目的考察甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液的稳定性。方法通过低温试验(4℃),冷热循环试验(4℃,37℃)和长期试验,观察自乳化时间及乳化效果,并用HPLC测定不同条件下甘草酸的含量。结果经低温存放7 d、冷热循环7 d、常温留样6个月,自乳化浓缩液均为澄清透明溶液,无药物析出,所考察指标未见明显改变。结论甘草酸磷脂复合物自乳化浓缩液澄清透明,性质稳定。     

甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊与肠溶胶囊的药动学比较

目的以市售甘草酸二铵肠溶胶囊为参比制剂,考察自制甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊在Beagle犬体内的相对生物利用度。方法Beagle犬6只,自身交叉对照、单剂量灌胃甘草酸磷脂复合物自乳化胶囊或市售肠溶胶囊。采用HPLC测定血浆中的甘草酸浓度,DAS2．0程序拟合药代动力学数据。结果参比制剂和受试制剂主要的药动学参数：Tmax分别为（6．00±0．000）h,（2．917±0．585）h;Cmax分别为（12．756±1．075）mg·L^-1,（17．75±1．604）mg·L-1;AUC0-t分别为（150．89±22．850）mg·h·L-1,（211．196±40．880）mg·h·L^-1;AUC分别为（159．39±21．862）mg·h·L^-1,（221．287±2．164）mg·h·L^-1,甘草酸磷脂复合物自乳化制剂相对生物利用度（F％）为139．76％。结论Beagle犬体内甘草酸的药动学规律均符合一级吸收二室模型,与市售胶囊剂相比,自乳化制剂的Cmax、AUC0-t,AUC0-∞均高于肠溶胶囊,表明自乳化制剂能显著提高药物的生物利用度,初步达到了设计要求。     

融合教学方法激发低年级医学生专业学习兴趣

为了激发低年级西医临床医学专业学生的学习兴趣,湖南中医药大学病理教研室陈丽老师带领16级临床五、六班的学生融合新的教学方法 (翻转课堂、思维导图、周测试)进行了病理生理学这门课程的学习.其中章节测试分为传统纸质版测试和问卷星在线考试两种方法 .各小组于第11、12周进行讲微课比赛,展示其学习成果和思维导图.并由指导老师...     

脑型疟小鼠小胶质细胞的活化特征分析

目的 利用血脑屏障分隔小胶质细胞与外周巨噬细胞,探讨小胶质细胞在实验型脑型疟(experimental cerebral malaria,ECM)发生中的活化特征.方法 利用依文思兰渗出法确定ECM小鼠血脑屏障开放时间,在不同感染时间点,采用流式细胞技术和间接免疫荧光法检测小胶质细胞的活化特征,采用实时荧光定量PCR技...     

伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白类似基因的原核表达和抗体制备

目的 克隆伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白（PbTIP）类似基因,原核表达PbTIP重组蛋白,并制备其抗血清。 方法 在GenBank中检索PbTIP类似基因序列,设计特异性引物,从伯氏疟原虫ANKA株扩增获得该基因cDNA片段,克隆入原核表达载体pGEX4T-1并转化大肠埃希菌BL21（DE3）。经异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）鉴定重组蛋白。用重组蛋白GST-PbTIP包涵体免疫BALB/c小鼠,以间接荧光抗体试验(IFAT)和Western blotting鉴定产生的抗体。 结果 获得了纯化的重组蛋白GST-PbTIP及其相应抗体,该抗体可以识别相对分子质量（Mr）约为60 000的伯氏疟原虫感染红细胞内的PbTIP蛋白。 结论 获得PbTIP重组蛋白及其相应抗体。