甲壳素及其衍生物在骨和关节疾病治疗中的应用

甲壳素是一种天然高分子多糖，可以通过一系列降解和化学合成的方法得到相应的衍生物。甲壳素及其衍生物由于安全无毒、可生物降解、生物相容性好并具有特殊的生物活性，在治疗骨和关节疾病方面应用较为广泛，并具有良好的应用前景。如治疗骨关节炎、关节粘连、关节软骨退变、软骨缺损、骨折、骨缺损等。     

嗜水气单胞菌ATCC7966 luxS基因缺失株构建及特性研究

目的研究群体感应信号分子AI-2合成酶编码基因luxS对嗜水气单胞菌ATCC 7966生理特性及毒力因子的影响。方法利用同源重组原理,构建含有中间为卡那霉素抗性基因,两侧为luxS基因上、下游同源序列片段的基因敲除质粒,将构建好的质粒转化大肠埃希氏菌SM 10(λpir)感受态细胞,利用接合法将质粒转入嗜水气单胞菌ATCC 7966,通过抗性筛选、PCR和DNA测序确认嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株。比较野生株ATCC 7966和luxS基因缺失突变株生长速度、AI-2合成、胞外蛋白酶合成及生物膜形成的差异。结果嗜水气单胞菌luxS基因缺失突变株ΔluxS构建成功。与野生株相比,突变株生长周期延长,基本丧失合成AI-2和胞外蛋白酶的能力;突变株生物膜形成能力降低,生长24h时生物膜形成能力为野生株的14.5%,36h时生物膜形成能力为野生株的60.0%,突变株生物膜形成速度明显比野生株缓慢,结构更为疏松。结论 luxS基因参与调控嗜水气单胞菌的生长、AI-2合成和毒力因子表达,本研究为进一步研究luxS基因在嗜水气单胞菌致病性中发挥的作用奠定基础。     

氨基葡萄糖对CCl4所致小鼠肝损伤的改善作用

目的:研究氨基葡萄糖(GlcNH2)的抗氧化能力和对CCl4诱导的小鼠肝损伤的改善作用.方法:雄性昆明种小鼠24只随机均分为3组.GlcNH2组每d GIcNH2(1.5 g/kg)灌胃;CCl4损伤组和空白对照组每d给予相应体积的生理盐水.前2组于第12天末次给药3 h后腹腔注射CCl4(20 mg/kg),24 h后眼球取血,分别测定各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)的活性,处死动物后取肝组织,测定肝匀浆中总抗氧化能力(T-AOC).总巯基(T-SH)、非蛋白结合巯基(NP-SH)、金属硫蛋白(MT)、丙二醛(MDA)含量和DNA损伤情况.结果:小鼠腹腔注射CCl424 h后,血清AST和ALT活性明显提高,引起肝脏脂质过氧化反应,巯基含量降低,T-*辽宁省教育厅高校科研计划基金资助项目 20060153,2008117;大连民族学院博士科研启动基金资助项目 20056106AOC减弱,诱发基因毒性.提前连续12 d灌胃给予GlcNH2能够显著诱导MT的表达,体内的抗氧化防御系统随之增强以抵抗CCl4诱导的氧化损伤.GlcNH2组与CCl4损伤组相比,AST、ALT活性和MDA含量均明显下降,T-AOC和T-SH、NP-SH、MT含量与CCl4组相比均明显提高.DNA电泳结果显示,GlcNH2组与CCl4组的DNA链都形成一系列1000 bp大小左右的DNA片段.结论:GlcNH2具有抗氧化能力,其对CCl4诱导的小鼠肝损伤有较为明显的改善作用,但是不能减轻DNA的氧化性损伤.     

桃仁中多糖的提取工艺研究

目的研究桃仁多糖提取工艺参数。方法通过单因素实验及正交实验研究固液比、温度、时间及提取次数对桃仁多糖提取率的影响，用苯酚一硫酸法测定其多糖含量。结果桃仁多糖提取最佳工艺条件为提取温度80℃，提取时间4h，固液比1：30，提取2次。结论该方法简单、环保，提取效果好，桃仁中多糖含量为1．83％。     

银杏叶多糖提取、纯化及其含量的测定

目的研究银杏叶多糖的提取纯化及含量测定。方法通过对不同的提取次数、固液比及提取时间等实验,以及对粗多糖纯化的研究,确立各因素条件,采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。结果各因素条件为浸提温度80℃,提取时间3h,固液比1∶30,提取2次,用活性炭纯化。由此得银杏叶中粗多糖的得率为12.2%,纯化后的多糖得率为9.8%。测定提取的粗多糖中多糖含量为35.7%,纯化后的多糖含量为43.3%,多糖含量测定相对标准偏差小于3.0%。结论该方法纯化效果好,测定重现性好,得出银杏叶中多糖含量为4.3%。     

五味子水溶性多糖提取及纯化工艺的优化

目的 研究五味子多糖提取工艺参数及参数的评价方法.方法 用水提取醇沉法提取五味子多糖,通过单因素及正交实验,研究固液比、提取温度、提取时间及提取次数对五味子多糖得率的影响,并对多糖得率的质量评价和含量评价方法进行探讨,同时进行了多糖的纯化研究.结果 提取温度对五味子多糖得率的影响最大,固液比、提取时间对五味子多糖得率影响较小.通过测定提取的多糖含量计算五味子多糖得率与单纯用多糖质量(所得沉淀)计算的五味子多糖得率的比较存在一定的差异,表明采用含量测定的方法比单纯的质量比所确立的条件更准确.结论 五味子多糖提取的最佳工艺条件为:固液比1∶30,提取温度90℃,提取时间4 h,提取3次.用活性炭与Sevage法联合使用纯化多糖,使提取的多糖纯度由43.48%提高到66.43%.     

紫杉醇和紫杉烷的生物合成途径研究进展

 目的 介绍紫杉醇及紫杉烷生物合成途径的最新研究进展。 方法 以近年来该领域的国内外文献为基础，对紫杉醇及紫杉烷碳环骨架和侧链的生物合成过程、生物合成过程中关键酶及生物合成调控方面的进展情况进行综述。结果 紫杉醇是用于临床癌症治疗的植物天然药物，紫杉烷是紫杉醇合成的前体或代谢支路的产物。应用红豆杉细胞培养及无细胞体系，使用同位素掺入、微粒体催化反应等手段确定了紫杉醇及紫杉烷生物合成过程的部分步骤，已克隆紫杉烷环化酶1个，羟基化酶6个，酰基转移酶5个。为提高紫杉醇及紫杉烷的产量，已开发了多种调控其生物合成的技术。结论 紫杉醇及紫杉烷生物合成途径的阐明对调控其生产具有重要意义。今后的调控生产应综合考虑生物合成和后生物合成的关系，目标代谢途径和竞争代谢途径的关系。     

体外培养成骨细胞的影响因素

目的:成骨细胞是骨形成和骨代谢的核心部分,成骨细胞体外培养是研究骨代谢和成骨机制的重要手段。因此,研究体外培养成骨细胞的影响因素有重要意义。资料来源:应用计算机检索Medline1980-01/2004-12相关体外培养成骨细胞的影响因素的文献,检索词“osteoblasts,cultureinvitro,influenc-ingfactors”,限定文献语言种类为English。同时计算机检索CBM1995-01/2004-12相关文献,检索词为“成骨细胞,体外培养,影响因素”,限定语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的文献查找全文。纳入标准:影响体外培养成骨细胞的因素,包括:①物理因素。②微量元素。③生长因子。④激素。排除标准:综述文献、重复研究。资料提炼:共收集到105篇关于体外培养成骨细胞影响因素的文献,排除重复或类似的同一研究,纳入17篇符合标准的文献。资料综合:①物理因素:电离辐射、微重力、外力、氧压等。②微量元素:微量元素缺乏其可能使骨骼发育受到障碍,甚至畸形,成骨细胞的增殖分化的过程与某些微量元素有着密切的关系,主要包括锌、铝、氟、铜、锰、钙、镁等。③生长因子:与骨生成有关的生长因子主要有骨形态发生蛋白、血小板衍生生长因子、成纤维细胞生长因子、转化生长因子β、胰岛素样生长因子、成骨生长肽等。④激素:促进成骨细胞的增殖分化的激素有生长激素、雌激素、甲状腺激素、甲状旁腺激素、糖皮质激素等。结论:体外培养成骨细胞的影响因素较多,了解这些影响因素有助于研究有效的体外培养成骨细胞方法及组织工程学的研究。     

骨缺损的治疗研究进展

因创伤、感染、肿瘤切除或先天性疾病等造成的骨质局部缺失称为骨缺损。骨缺损治疗可采用骨移植、组织工程技术、膜引导性组织再生（MGTR）技术、基因疗法、生长因子等。其中应用组织工程技术和生长因子治疗骨缺损是目前研究的热点。现将骨缺损治疗的研究进展情况概述如下。     

体外培养成骨细胞的影响因素

目的：成骨细胞是骨形成和骨代谢的核心部分，成骨细胞体外培养是研究骨代谢和成骨机制的重要手段。因此，研究体外培养成骨细胞的影响因素有重要意义。资料来源：应用计算机检索Medline 1980-01／／2004—12相关体外培养成骨细胞的影响因素的文献，检索词“osteoblasts，culture in vitro,influencing factors”，限定文献语言种类为English。同时计算机检索CBM1995—01／2004—12相关文献，检索词为“成骨细胞，体外培养，影响因素”，限定语言种类为中文。资料选择：对资料进行初审，选取符合研究要求的文献查找全文。纳入标准：影响体外培养成骨细胞的因素，包括：①物理因素。②微量元素。③生长因子。④激素。排除标准：综述文献、重复研究。资料提炼：共收集到105篇关于体外培养成骨细胞影响因素的文献，排除重复或类似的同一研究，纳入17篇符合标准的文献。资料综合：①物理因素：电离辐射、微重力、外力、氧压等。②微量元素：微量元素缺乏其可能使骨骼发育受到障碍，甚至畸形，成骨细胞的增殖分化的过程与某些微量元素有着密切的关系，主要包括锌、铝、氟、铜、锰、钙、镁等。③生长因子：与骨生成有关的生长因子主要有骨形态发生蛋白、血小板衍生生长因子、成纤维细胞生长因子、转化生长因子β、胰岛素样生长因子、成骨生长肽等。④激素：促进成骨细胞的增殖分化的激素有生长激素、雌激素、甲状腺激素、甲状旁腺激素、糖皮质激素等。结论：体外培养成骨细胞的影响因素较多，了解这些影响因素有助于研究有效的体外培养成骨细胞方法及组织工程学的研究。