新中药制剂的研究趋势

随着我国经济发展，医学模式的改变，老龄化社会的到来，人民生活水平的不断提高，人们要求的衣、食、住、行等方面有更高的质量，需要通过各种医疗保健措施以保持身心的平衡和健康，而中药恰好在这些方面具有优势，可以发挥巨大的作用。例如：一些药食兼用的中药，如山楂、山药、薏仁米、枸杞子、核桃、大枣等更多作为健康食品和功能性食品出现；一些具有防治作用(如降血脂，降血糖等)的功能性食品及健康饮料也将更多地为患者所接受。天然色素、天然甜味剂及苦味剂，天然香料、天然杀虫剂将在很大程度上代替人工合成的产品。     

代谢组学评价蛇床子提取物对大鼠毒理作用的初步研究

目的:研究SD大鼠蛇床子给药组与对照组的尿样代谢物谱变化,并探寻可能的生物标记物。方法:以UPLC-Q-TOF/MS技术对大鼠尿样代谢物谱进行测定分析。采用OSC-PLS-DA(正交信号校正-偏最小二乘法-判别分析)法进行分类、分析。结果:蛇床子给药组与对照组大鼠尿样代谢物谱存在明显差别,发现了5个可能的生物标记物。结论:蛇床子组与对照组大鼠尿液代谢物指纹图谱研究分类良好,生物标记物为其可能的毒性机制提供了依据。     

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术( UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取( SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况.结果 厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物.结论 厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础.     

高良姜黄酮提取物特征谱分析及成分确认

目的:建立不同批次高良姜提取物的特征谱并进行成分鉴定。方法:采用HPLC分析高良姜提取物的特征指纹谱。SunfireTMC18色谱柱,流动相乙腈-0.1%的甲酸溶液梯度洗脱,分析时间60 min,检测波长208 nm,柱温30℃,流速1.0 mL.min-1。采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)进行分析,对主要成分进行鉴定。结果:特征谱共标出10个共有峰。鉴定出提取物中12个化合物。结论:采用HPLC特征指纹谱能有效控制高良姜提取物的质量。     

毛茛黄酮类成分的UPLC HILIC/Q-TOF-MS分析

目的:建立超高效亲水性液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC HILIC/Q-TOF-MS)对毛茛黄酮类成分进行分析的方法。方法:用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱,以甲醇∶水=1∶1含10mM乙酸铵(A)/乙腈∶甲醇=95∶5含10mM乙酸铵(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据。结果:根据元素组成分析、二级质谱和相关文献,鉴定、推断出毛茛中11个主要成分,分别是小麦黄素,牡荆素,荭草素,异荭草素,芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-L-阿拉伯糖苷,小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷,芦丁等。结论:经过超高效亲水性液相色谱的分离,借助Q-TOF-MS测定的准确分子量及二级质谱信息可以判定毛茛中的主要黄酮类成分,为毛茛黄酮类成分分析提供了一种快速有效的方法。     

千斤拔中黄酮类成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对瑶药千斤拔中黄酮类成分进行分析,并对主要成分进行鉴定.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据.结果 10 min内对千斤拔醇提物进行UPLC的快速分离,根据高分辨质谱结果和MS/MS碎片、结合对照品信息和相关文献,鉴定出千斤拔中20种黄酮类成分.结论 应用UPLC/Q-TOF-MS技术可以快速有效地分析千斤拔中黄酮类成分及其二级质谱的裂解规律.     

瑶药野柠檬根挥发性成分GC-MS分析

目的 研究瑶药野柠檬根的挥发性成分.方法 采用水蒸气蒸馏法提取野柠檬根的挥发油,并用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构检索,应用色谱面积归一化法计算各成分的相对含量.结果 从野柠檬根挥发油中分离并检索出37种化学成分,其中相对百分含量大于3%的分别确定为α-法呢烯、榄香醇、β-马啊里烯、β-桉叶醇、Tticyclo[2.2.1.0(2,6)]heptane,1,7-demethyl-7- (4-methyl -3-pentenyl).结论 该植物中37个挥发性成分均为首次报道,占挥发油气化产物的91%.     

鼠抗人TCR/CD3单克隆抗体的制备及其初步应用

目的应用B淋巴细胞杂交瘤技术,制备鼠抗人CD3单克隆抗体,并用于T淋巴细胞亚类检测。方法以本室纯化的CD3蛋白免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,成功地获得1株抗人CD3单克隆抗体。经间接ELISA测定,杂交瘤细胞培养腹水的抗体效价。结合SDS-PAGE实验考察单克隆抗体对CD3促T淋巴细胞增殖活性的作用。结果杂交瘤细胞培养腹水的抗体含量为20 mg/mL,效价为10-7,并对T淋巴细胞有促增殖活性,检测正常人外周血阳性T细胞百分率为（73±7）%。结论制备的抗人CD3单克隆抗体具备较高的纯度和活性,可用于T细胞亚类的检测。     

干姜油中姜酚类成分的UPLC/Q-TOFMS分析

目的 采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOFMS)对干姜油中姜酚类成分进行分析,并对主要成分进行鉴别.方法 用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)-乙腈(B)梯度洗脱,检测波长280 nm,使用APCI离子源,正离子与负离子模式下采集数据.结果 鉴定出干姜油中姜酚类化合物8个,分别为:6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、12-姜二醇、10-姜酚、8-姜烯酚、10-姜烯酚和10-姜二酮.结论 经过超高效液相色谱的分离,借助Q-TOFMS测定的相对分子质量及正负离子信息可以鉴定干姜油中的主要姜酚类成分,为干姜油姜酚类成分的鉴定提供了一种准确有效的方法.     

删除C末端结构域的基质细胞衍生因子-1重组内质网定位片段的真核表达载体构建及其活性作用

目的：构建人基质细胞衍生因子（SDF—1）C末端a螺旋结构域缺失及嵌合内质网定位片段的SDF-1α／54／KDEL重组真核表达载体,并考察其对Molt-4细胞的影响。方法：用PCR法扩增SDF-1α／54并将其亚克隆至真核表达质粒pcDNA3．1构建成真核重组表达载体pcDNA3．1／SDF1a／54／KDEI。。脂质体法转染Cos-7细胞后用Western blot检测SDF-1α／54／KDEL的表达。电穿孔法瞬时转染Molt-4细胞,并用流式细胞仪检测CXCR4含量以及其对细胞趋化性的影响。结果：经DNA测序验证目的片段插入方向和碱基组成顺序均准确无误,Western blot证实融合蛋白能在Cos-7细胞表达。SDF-1α／54／KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量并抑制细胞的趋化作用。结论：SDF-1α／54／KDEI,可从胞内抑制Molt-4细胞CXCR4的表达,C末端α螺旋结构域的缺失并不影响其抑制作用,推测其是决定细胞趋化作用的主要结构域。