黄蜀葵花中金丝桃苷的提取分离及纯度检测

目的 研究黄蜀葵花中金丝桃苷的提取、分离、纯化方法.方法 采用聚酰胺柱层析、梯度洗脱方法提取分离黄蜀葵花中的金丝桃苷,以氢谱和碳谱鉴定其结构,以薄层色谱法、HPLC法进行纯度检查.结果 制得的金丝桃苷经薄层色谱法检查无杂质斑点,经HPLC法检测其纯度98.5%以上.结论 所建立的分离、纯化方法简便,成本低.     

基于磷酸二酯酶抑制活性的清金化痰汤抗炎活性评价方法建立

目的 基于磷酸二酯酶（PDE）抑制活性,建立清金化痰汤抗炎活性测定方法,补充与完善该经典名方的质量控制体系。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）建立PDE活性测定方法,考察清金化痰汤抑制PDE活性的量效关系,流动相甲醇-0.5%乙酸水溶液（5∶95）,检测波长254 nm。通过测定多批清金化痰汤水提物冻干粉对PDE的抑制率,以中和酶的活性国际单位U标示其生物活性。结果 选择4 U·mL^-1 PDE溶液,在反应底物环磷酸腺苷（cAMP）浓度为50 μmol·L^-1、反应时间为60 min时,酶促反应稳定。在此反应体系下,当清金化痰汤水提物冻干粉终质量浓度为0.11~3.0 g·L^-1时,其对PDE的抑制作用呈现浓度依赖性。确定清金化痰汤水提物冻干粉待检质量浓度1 g·L^-1,在该质量浓度下对PDE呈显著且稳定抑制作用,抑制率>45%,即1 mg的清金化痰汤水提物冻干粉至少可中和1.8 U PDE的活性。结论 建立了基于PDE抑制活性的清金化痰汤生物活性评价方法,以PDE活性国际单位U表征了清金化痰汤的抗炎活性,可为中药复方生物活性测定研究提供新方法。     

枸杞咀嚼片免疫调节及抗氧化活性分析

目的 探究枸杞咀嚼片对正常小鼠固有免疫和适应性免疫调节作用及其体内外的抗氧化活性。方法 采用碳廓清实验、免疫器官指数实验、血清溶血素实验、刀豆蛋白A（ConA）诱导脾淋巴细胞增殖实验及小鼠自然杀伤细胞（NK细胞）活性实验,观察枸杞咀嚼片低、中、高剂量组（0.25、0.5、1.5 g·kg^-1）对正常小鼠免疫功能的影响。通过检测小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）水平判断枸杞咀嚼片对体内抗氧化能力的影响。以2,2''-联氨-双（3-乙基苯井噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）自由基、2,2-二苯基-1-苦基肼（DPPH）自由基和羟基自由基清除实验,检测枸杞咀嚼片的体外抗氧化活性。结果 与空白组比较,枸杞咀嚼片低、中、高剂量组均可明显提高小鼠NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖能力和小鼠血清溶血素抗体水平（P<0.05）;高剂量组可明显增加小鼠胸腺指数、脾脏指数和巨噬细胞吞噬功能（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,枸杞咀嚼片中剂量组小鼠血清中GSH-Px活力明显升高（P<0.05）,高剂量组小鼠血清中MDA含量明显降低（P<0.05）。体外抗氧化实验中,枸杞咀嚼片在质量浓度为44.9 g·L^-1时,对ABTS及羟基自由基的清除率可达到100%,质量浓度为8.7 g·L^-1时对DPPH自由基清除率达到了95.24%±0.02%,说明枸杞咀嚼片具有良好的体外抗氧化效果。结论 枸杞咀嚼片具有增强小鼠免疫功能的作用,且具有良好的抗氧化效果。     

吴茱萸次碱的制备方法

目的以吴茱萸为原料,研究简单、快速、高效的分离、纯化吴茱萸次碱的制备方法。方法采用85%乙醇提取,硅胶柱层析分离,甲醇重结晶纯化吴茱萸次碱,薄层鉴别(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、核磁方法检查纯度。结果吴茱萸次碱经TLC检查与对照品一致,无杂质斑点,经HPLC检测纯度达98.5%以上,经核磁鉴定。另外经考察,确定色谱条件为Waters C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);检测波长225、290、215、365 nm;流动相乙腈-水溶液(50∶50);进样量10μL;柱温35℃;体积流量1.0 m L/min。结论吴茱萸次碱对照品已达到中药质量检测用化学对照品技术要求,所采取的分离、纯化方法简单、安全、可行性强,成本低、效率高,可用于吴茱萸药材及其制剂的质量控制。     

Plackett Burman与Box Behnken试验设计优化苦豆子中氧化苦参碱提取工艺

摘 要 目的：优选苦豆子中氧化苦参碱的最佳提取工艺。方法: 通过单因素试验和Plackett Burman试验设计确定各因素的最佳水平并筛选出关键因素,采用Box Behnken响应面法优选氧化苦参碱的最佳提取工艺。结果: 氧化苦参碱的最佳提取工艺为：料液比1 ∶〖KG-*4〗25,提取时间60 min,浸提温度60℃,乙醇浓度60%,提取3次,氧化苦参碱的提取率可达80.83%。结论: 利用该方法优化出的苦豆子氧化苦参碱的提取工艺稳定可靠,可为氧化苦参碱的开发利用提供参考。     

基于巨噬细胞吞噬及分泌功能的清金化痰汤生物限值测定

目的 建立基于小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬及分泌功能的清金化痰汤水提物冻干粉生物限值测定方法，从生物活性层面对清金化痰汤进行质量控制。方法 建立巨噬细胞RAW264.7吞噬模型和炎症模型，以清金化痰汤水提物冻干粉对巨噬细胞RAW264.7吞噬指数和白细胞介素-6（IL-6）分泌量的抑制率为指标，考察清金化痰汤水提物冻干粉的生物活性，并寻找生物限值。结果 巨噬细胞优选接种密度为3×10⁵个/mL，药物作用时间24 h，脂多糖（LPS）质量浓度1 mg·L^-1；当清金化痰汤水提物冻干粉质量浓度为500 mg·L^-1时，对RAW264.7巨噬细胞既无毒性也无明显促增殖作用，在此浓度下，对RAW264.7巨噬细胞吞噬中性红有明显促进作用，吞噬指数均>113%，且对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6呈现出显著且稳定的抑制作用，抑制率>45%。结论 结合清金化痰汤抗炎及免疫调节的药理活性，建立了基于RAW264.7巨噬细胞吞噬及分泌功能的生物限值评价方法，在设定的实验条件下，确定500 mg·L^-1为限值浓度，在该限值浓度下，清金化痰汤水提物对巨噬细胞的吞噬指数有明显的促进作用或对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞IL-6的分泌量有明显抑制作用，均可判断为质量合格。     

马卡列丙中1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响

目的 探究马卡列丙中蒽醌类成分1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法 以MC3T3-E1成骨细胞作为对象研究，设立阴性对照组(二甲基亚砜)、阳性对照组(雌二醇)和药物组，采用四甲基偶氮唑盐比色法检测不同质量浓度1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞增殖活性的影响，选出增殖活性最强的浓度进行后续研究，采用碱性磷酸酶染色法测定1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-羟基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞的分化程度，茜素红染色评估1,6,8-三羟基2,7-二甲氧基-3-羟基蒽醌对MC3T3-E1成骨细胞矿化能力的影响。结果 药物组MC3T3-E1成骨细胞在1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌质量浓度为100 nmol/L时增殖活性最高，选用质量浓度为100 nmol/L的1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌能促进MC3T3-E1成骨细胞的分化和矿化。结论 1,6,8-三羟基-2,7-二甲氧基-3-甲基蒽醌能显著促进成骨细胞增殖、分化和矿化水平，为马卡列丙的促骨折愈合作用提供了理论...     

基于机械力离子通道Piezo1的中药生物力药理学研究进展

缺血性脑卒中是全球致死和致残的主要原因之一。东汉名医华佗提出“血脉流通，病不得生”的原创预防医学思路，为血脉相关的力学因素与药理学的交叉研究开创了广阔空间。在缺血性脑卒中的发病过程中，力学因素贯穿始终，影响血小板与内皮细胞功能及其分子通讯。近年来血流力学因素对于血栓形成及脑卒中的影响，无论是阐释缺血性脑卒中的发病机制，还是作为潜在的治疗靶标，都受到了越来越多的关注。机械力离子通道Piezo1广泛存在于多种细胞表面，除了受到化学物质及内源性物质的调控，还能够感受不同力学条件，调控通道的开启与关闭，激活下游不同信号通路。Piezol被视为力学与生化信号之间的重要连接。多种中药能够影响Piezo1通道蛋白活性，可能通过Piezo1蛋白防治缺血性脑卒中等血栓性疾病。该文综述了Piezo1通道蛋白在不同力学条件下对内皮细胞、血小板生理病理功能的影响，Piezo1在血栓形成过程中的角色，以及靶向Piezo1通道的中药、化药及内源性物质的效应；为进一步探索活血化瘀中药效应机理及新药研发提供新的思路，并逐步深化生物力药理学研究。