PCPA致大鼠NG2细胞的变化,NG2与GABA的共存关系及酸枣仁汤的干预作用研究

目的:探讨大鼠脑内五羟色胺(5-HT)含量下降后皮质部分NG2细胞的变化,NG2细胞与星形胶质细胞(Ast)、γ-氨基丁酸(GABA)的共存关系及酸枣仁汤的干预作用.方法:根据随机数字表法将雄性SD大鼠分为7d正常组、7d对照组、7d对氯苯丙氨酸(PCPA)组、15 d正常组、15 d对照组、15 d PCPA组、酸枣仁汤(SZRD)组、PCPA+SZRD组,各组大鼠给予相应处理.取大脑皮质前额叶,采取免疫荧光双染法测定大鼠皮质NG2细胞、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、GABA的表达量及NG2/GFAP、NG2/GABA共存定位情况.结果:与7d对照组比较,7 d PCPA组大鼠皮质NG2细胞、GFAP蛋白表达量增加(P＜0.01),GABA蛋白表达量下降(P＜0.05);与15 d PCPA组比较,PCPA+SZRD组大鼠皮质NG2细胞、GFAP蛋白表达量下降(P＜0.01),GABA表达量上升(P＜0.05);NG2细胞与GABA在同一区域表达较多,而与GFAP在同一区域表达较少.结论:5-HT系统的失调能激活皮质NG2细胞、Ast,抑制GABA的表达,NG2细胞可能与Ast、GABA共同影响大脑皮层兴奋性来调节睡眠,酸枣仁汤可能通过5-HT系统调控NG2细胞、Ast、GABA来参与皮层活动的神经调节.     

微透析法研究NG2细胞功能变化对大鼠中缝核兴奋性和抑制性递质含量的影响

目的 采用中缝核内微量注射NG2抗体(NG2-Ab),研究中缝核NG2细胞功能变化对γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)递质含量的影响,探讨中缝核中5-羟色胺(5-HT)与NG2细胞的相互作用对GABA和Glu递质含量变化的影响.方法 70只大鼠随机分为正常组、对照组、NG2-Ab组、对氯基丙氨酸(PCPA)组、5-HT组、PCPA+NG2-Ab组和5-HT+NG2-Ab组.正常组不做任何处理,其他各组在中缝核内分别微量注射0.9％氯化钠溶液、NG2-Ab、PCPA、5-HT、PCPA+NG2-Ab及5-HT+NG2-Ab,采用微透析法收集注射完毕后20、40、60、80、100、120 min时间段内中缝核细胞外液,采用高效液相色谱法(HPLC)分析微透析液中GABA、Glu在相应时间内的含量及其变化.结果 与对照组相比:NG2-Ab组GABA和Glu含量下降,差异有统计学意义(P＜0.05);PCPA组GABA含量下降,Glu含量升高,差异有统计学意义(P＜0.05);5-HT组 GABA 含量升高(P＜0.05),Glu含量下降(P＜0.01),差异有统计学意义.与PCPA组相比,PCPA+NG2-Ab组GABA在各时间段含量变化无统计学差异,Glu含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与5-HT组相比,5-HT+NG2-Ab组GABA含量变化无统计学差异,Glu含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NG2细胞的兴奋性受到抑制后影响大鼠中缝核内GABA和Glu含量的变化,Glu含量的变化与5-HT的合成有关,但GABA含量的变化与5-HT合成无直接关系.     

cAMP/Epac/Rap1信号通路调控NG2细胞分泌IL-1β、TNF-α、BDNF及酸枣仁皂苷A的作用研究

目的 研究环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白(Epac)/Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路是否参与调控NG2细胞分泌白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脑源性神经营养因子(BDNF)及酸枣仁皂苷A(JuA)的作用。方法 体外培养NG2细胞，分为对照组、百日咳毒素(PTX)组、非环状核苷酸Epac拮抗剂(ESI-09)组、酸枣仁皂苷A(JuA)组、艾司唑仑(阳性药)组。采用CCK-8法检测不同浓度JuA对NG2细胞存活率的影响，RT-PCR法和Western blot法检测各组细胞IL-1β、TNF-α、BDNF、cAMP、Epac、Rap1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 与对照组比较，PTX组降低IL-1β和TNF-α mRNA和蛋白的表达(P<0.01),增加BDNF和cAMP mRNA和蛋白的表达(P<0.01);ESI-09组增加IL-1β和TNF-α mRNA和蛋白的表达(P<0.05),降低BDNF、Epac和Rap1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);JuA组、阳性药组均增加IL-1β、TNF-α、BDN...