稳定表达人有机阳离子转运体1的细胞模型构建

 目的 建立能稳定表达人有机阳离子转运体1（human organic cation transporter1, hOCT1）野生型及两个突变体的马丁达比狗肾上皮（Madin-Darby canine kidney, MDCK）细胞模型。方法 从人肝组织中提取hOCT1野生型基因,经定点突变获得hOCT1_P341L,hOCT1_M420del两个突变型基因,构建表达质粒pcDNA3.1(+)-hOCT1,pcDNA3.1(+)-hOCT1_P341L,pcDNA3.1(+)-hOCT1_M420del。将质粒转染MDCK细胞,通过G418筛选获得抗性克隆,并通过hOCT1的荧光底物(4-二甲氨基苯乙烯基)-N-甲基吡啶 (ASP+)筛选得到具有较高活性的MDCK-hOCT1细胞。经反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及经典底物N-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)的摄取实验,鉴定筛选得到的单克隆细胞株hOCT1 mRNA的表达及功能。结果 本实验获得的hOCT1野生型及2个突变体细胞模型与转染空载体的MDCK细胞相比,其 hOCT1 mRNA表达量显著增高,对经典底物MPP+的摄取为转染空载体细胞的12.5,13.7,12.0倍,hOCT1抑制剂可显著抑制细胞对MPP+的摄取。结论 建立的细胞模型可用于hOCT1抑制剂及底物的筛选。     

如意金黄散在PICC导管早期血栓中的应用

目的 探讨如意金黄散在PICC导管早期血栓中的应用.方法 选取我院2019年3月至2020年3月收治的70例行PICC置管的肿瘤患者作为研究对象,使用随机数表法分为研究组与对照组,每组各35例.对照组给予常规导管维护,研究组给予对照组基础上加用如意金黄散.对比两组患者的凝血功能指标及干预疗效.结果 两组患者置管前各个凝血功能指标相比差异不具有显著性(P＞0.05),置管3个月时,研究组的FIB水平及D-D差异不具有显著性(P＞0.05),对照组的上述指标结果相较于置管前均有显著提升,明显高于同时期的研究组,差异具有显著性(P＜0.05);研究组的重置管率、血栓形成率及PICC堵管率均显著低于对照组,差异具有显著性(P＜0.05).结论 如意金黄散能显著减少行PICC导管置管后产生血栓风险,缓解病人不适病症,值得临床进一步研究.     

硫酸镁联合土豆片治疗静脉输液液体外渗的疗效观察

目的:探讨50％硫酸镁与土豆片联合应用治疗静脉外渗的护理疗效.方法:将90例输液外渗患者采用随机数字表法分为观察组(50％硫酸镁与土豆片湿敷组),对照1组(50％硫酸镁湿敷组)和对照2组(土豆片外敷组),每组各30例,比较3组患者疗效.结果:三组患者经不同方法护理后比较,观察组的总体疗效显著高于对照组,具有统计学意义(P<0.05).结论:硫酸镁与土豆片联合湿敷法治疗静脉外渗效果明显且对皮肤无刺激,无任何不良反应,操作简易,是一种值得推广的有效方法.     

ABO血型不合非血缘脐血移植治疗恶性血液病患者的输血护理

目的 分析ABO血型不合非血缘脐血移植（unrelated cord blood stem cell transplantation,UCBT）治疗恶性血液病患者的输血护理要点.方法 对72例恶性血液病患者行ABO血型不合UCBT过程中与输血有关的护理问题,进行回顾性分析和总结.结果 72例ABO血型不合的UCBT均获得造血重建,但存在较外周血和骨髓干细胞移植造血恢复明显迟缓和免疫的问题.结论 护士对ABO血型不合UCBT输血技术的掌握及输血相关并发症的预防,是确保安全有效输血的关键.     

稳定表达人寡肽转运体1的细胞模型构建及应用

 目的 构建稳定表达人寡肽转运体1（hPepT1）的马丁-达比犬肾细胞模型(MDCK-hPepT1),并将其应用于中药单体中人寡肽转运体1抑制剂的筛选。方法 构建重组质粒pcDNA3.1(+)-hPepT1,将其转染马丁-达比犬肾系细胞,经G418筛选后以有限稀释法挑选单克隆细胞。以人寡肽转运体1荧光底物β-Ala-Lys(AMCA)和经典底物Glysar对单克隆细胞转运活性进行验证;通过反转录聚合酶链式反应验证人寡肽转运体1在转录水平的表达。以中药单体对Glysar摄取的影响实现人寡肽转运体1抑制剂的筛选。结果 获得的两株单克隆细胞（D19、A11）对β-Ala-Lys(AMCA)摄取均显著高于转染空载体的马丁-达比犬肾系细胞,对Glysar的摄取分别为转染空载体细胞的24、11倍;D19、A11中hPepT1的mRNA水平亦显著高于转染空载体的细胞;已知的人寡肽转运体1抑制剂（底物）显著减少单克隆细胞D19和A11对Glysar的摄取;部分中药单体对Glysar摄取产生不同程度的抑制。结论 本实验成功构建了稳定高表达人寡肽转运体1的马丁-达比犬肾系细胞模型,并应用该模型筛选出对人寡肽转运体1具有潜在抑制作用的中药单体。     

嵌合抗原受体修饰的T细胞治疗致细胞因子释放综合征2例

目的 观察嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T细胞)治疗复发难治性B细胞血液病的不良反应,探讨细胞因子释放综合征(Cytokine-Release Syndrome CRS)有效的护理措施。方法 对2例复发难治急性B细胞白血病病人应用靶向CD19的CAR-T细胞治疗时因细胞因子释放引起的一系列不良反应、治疗和护理措施进行观察及统计。结果 2例病人在接受CAR-T细胞治疗并出现细胞因子释放综合征后,经过严密的生命体征监测,积极的治疗,全方位的生活护理和心理护理,病人症状均缓解,且白血病经骨髓细胞学检查提示完全缓解。结论 细胞因子释放综合征是CAR-T治疗中最严重并发症之一,经过临床积极干预和护理后可获得良好效果。     

血液科病房施行无陪护管理降低医院感染的探讨

目的 对比研究血液科病房开展优质护理无陪护管理前后住院患者医院感染的发生率及其相关因素,探讨血液科病房规范化护理管理模式.方法 将实施无陪护管理前后的住院患者分成陪护组及无陪护组,对实施管理前后两组患者医院感染发生率、感染部位及感染程度进行比较分析.结果 无陪护组发生医院感染52例,医院感染发生率8.71％;陪护组共发生医院感染76例,医院感染发生率12.75％,两者相比差异有统计学意义(x2 =5.09,P＜0.05);感染部位两者均以呼吸道居首,占各类感染的50.00％,其他部位依次为胃肠道、口腔及肛周等,而实施无陪护管理后呼吸道感染率从59.21％降至36.54％(x2=6.35,P＜0.05);实施无陪护管理后死亡率从7.89％降至1.92％(x2=2.13,P＞0.05).结论 血液科施行无陪护管理能够明显降低血液科患者医院感染的发生率及感染死亡率,同时降低呼吸道感染的发生率,提高血液科住院患者的安全性,值得推广应用.     

冻存脐血复温后输注时间对脐血移植患者输注不良反应及植入效果的影响

目的：探讨冻存脐血复温后不同输注时间对脐血移植患者输注不良反应及脐血植入状况的影响。方法按照脐血输注时间序贯分为试验组和对照组,选择行脐血造血干细胞移植的60例患者,试验组和对照组各30例,试验组输注时间20 min,对照组输注时间10 min。每次脐血输注前至输注完6小时内监测生命体征变化,观察患者的输注不良反应和干细胞植入状况。结果两个输注时间不良反应发生率的差异有统计学意义（P＜0．05）,试验组患者脐血输注时高血压、腹痛、呕吐、胸闷、头痛、寒颤的发生率低（P＜0．05）;干细胞植入率和中性粒细胞及血小板植入时间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论冻存脐血复温后输注时间20 min,可明显降低患者不良反应发生率,输注安全,不影响干细胞植入。     

血友病患者家庭静脉注射治疗现状调查

目的了解血友病患者家庭注射治疗的现状,分析家庭静脉注射治疗实施过程中存在的困难,为优化血友病患者的管理提供对策。方法选用线上调查与电话调查相结合的方式,抽取2018年1月至2020年5月安徽省血友病中心登记在册的200名血友病患者进行问卷调查,包括患者的基本情况、家庭静脉注射治疗现状以及家庭静脉注射治疗实施过程中存在的困难三部分。结果共发放问卷200份,最终收回有效问卷199份。199名血友病患者中,67.84%的患者参与过家庭注射治疗;22.61%的患者选择自我注射;95.48%的患者愿意选择家庭注射治疗;家庭静脉注射治疗实施过程中困难的前三位的分别为静脉穿刺的方法(53.27%)、注射时静脉的选择(52.26%)、不良反应的观察和处理(47.24%)。结论应通过通过提升患者家庭注射治疗的自主性水平、创新注射因子相关知识的培训方式、建立基于自我需求的血友病医疗护理网络来推动家庭静脉注射治疗护理模式的完善。     

去铁酮与人有机阳离子转运体及有机阴离子转运体1体外相互作用研究

目的：建立细胞裂解液中去铁酮测定的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法,体外考察去铁酮与人有机阳离子转运体（hOCTs）及有机阴离子转运体1（hOAT1）的相互作用。方法：以Agilent Eclipse Plus C18柱（2.1 mm×50 mm, 3.5 μm）为分析柱;0.1%甲酸-水（v/v）和0.1%甲酸-乙腈（v/v）为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子源（ESI源）、多反应监测（MRM）模式进行检测;应用稳定表达hOCTs及hOAT1的细胞模型（MDCK-hOCTs和MDCK-hOAT1）考察去铁酮对经典底物在细胞内积聚的影响;比较去铁酮在转空载体的mock细胞及MDCK-hOCTs中积聚的差异,以及经典抑制剂对其积聚的影响。结果：去铁酮在5~300 nmol/L的浓度范围内线性关系良好;准确度大于94%,日内相对标准偏差小于2%。300 μmol/L去铁酮使hOCTs经典底物MPP⁺在MDCK-hOCTs的积聚降低至阴性对照的70.4%~87.1%;去铁酮在MDCK-hOCTs细胞和mock细胞中的积聚无明显差别,且经典抑制剂对去铁酮的积聚无明显抑制作用;100 μmol/L去铁酮对hOAT1经典底物6-CF在MDCK-hOAT1细胞中的积聚无显著影响。结论：本实验建立的方法适用于细胞裂解液中去铁酮的定量分析;去铁酮对hOCT1和hOCT3有一定的抑制作用,对hOCT2和hOAT1则无明显抑制作用;hOCTs在去铁酮跨膜转运中不起主导作用。