过表达Oct4B1 诱导结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化

目的:探讨Oct4B1 基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418 抗性的Oct4B1 基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480 细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418 筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测: RT-qPCR 检测Oct4B1 的mRNA 水平;于划痕实验和Transwell 小室实验检测迁移和侵袭能力;盂Western blot 检测EMT 相关标记物E-cadherin、N-cadherin 及Vimentin 蛋白表达; RT-qPCR 和Western blot 检测EMT 转录因子Twist 的mRNA 及蛋白表达。结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1 基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin 蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin 及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist 的mRNA 及蛋白表达量均明显升高(P<0.01)。结论:过表达Oct4B1 基因可诱导人结直肠癌SW480 细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist 表达有关。     

虎杖膏辅助治疗阑尾周围脓肿的疗效观察

正阑尾周围脓肿为急性阑尾炎化脓、穿孔,大网膜移至右下腹包裹阑尾并粘连形成~([1])。阑尾周围脓肿的治疗主要采用非手术治疗~([2]),以静脉滴注抗生素为主。卢蔚起等~([3])发现在常规抗炎治疗基础上加用中药外敷治疗阑尾周围脓肿可提高临床疗效。虎杖膏是以虎杖为主要原料,具有消肿镇痛,清热解毒功能~([4]),其在阑尾周围脓肿治疗中的应用鲜有报道,本科于2012年7月—2017年6月对90例阑尾周围脓肿患者在抗炎治     

结直肠癌患者免疫功能状态与淋巴结细胞角蛋白20表达的关系

我们对21例结直肠癌患者采用流式细胞仪检测血清CD4、CD8、NK水平,酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素(IL)-2、sIL-2R、IL-12水平及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测淋巴结细胞角蛋白20(CK20)mRNA表达(即微转移),探讨结直肠癌患者上述免疫指标水平与淋巴结微转移的关系.     

心理干预在外科手术学教学中的应用

目的探讨心理干预在外科手术学教学中的应用及效果。方法选择遵义医学院珠海校区2009级临床医学专业本科学生200名,随机分为观察组和对照组,每组各100人。两组学生的手术学教学课时、教学内容和课堂教学环节等完全一致,同时针对观察组学生在课前和课后进行有针对性的专业心理辅导。对两组学生手术学学习效果进行测评,并采用症状自评量表SCL-90以问卷形式对两组学生进行评估。采用SPSS软件对两组学生测评成绩及问卷调查数据分别行x2检验、秩和检验。结果观察组学生的手术学综合测评平均成绩高于对照组[（82．21±6．05）VS．（76．29±6．83）],差异有统计学意义（t=6．49,P=0．000）。问卷结果显示,观察组学生的SCL-90总评分较低,与对照组比较,差异有统计学意义（Z=-3．6254,P=0．000）。结论在手术学教学中引入心理干预,可有效提高手术学教学质量;应将心理干预措施融入到具体的教学实践环节。     

哇巴因抑制结直肠癌多药耐药细胞增殖及侵袭力的研究

  目的  探讨结直肠癌耐药细胞增殖及侵袭力与Na+, K+-ATP酶活性及其β1亚单位和P糖蛋白(P-gp)表达的关系, 及哇巴因增加化疗敏感性的可能机制。  方法  以人结直肠癌亲本细胞(SW480)和耐奥沙利铂细胞(SW480/OxR)为研究对象, 采用MTS法、Transwell小室、生化酶学、实时定量PCR(Real time quantitative, RT-PCR)及流式细胞技术等方法比较SW480细胞与SW480/OxR细胞的增殖及侵袭力、Na+, K+-ATP酶活性及其β₁亚单位和P-gp表达的差异, 观察哇巴因对SW480/OxR细胞上述指标的影响。  结果  与SW480细胞比较, SW480/OxR细胞增殖活力无明显变化(P > 0.05), 而细胞侵袭力却显著增加, Na+, K+-ATP酶活性下降, β₁亚单位表达下调, P-gp表达上调(P均 < 0.01);哇巴因能显著抑制SW480/OxR细胞增殖活力, 减弱其侵袭力, 下调SW480/OxR细胞P-gp蛋白表达, 上调SW480/OxR细胞β₁亚单位蛋白表达, 增加SW480/OxR细胞Na+, K+-ATP酶活性(P均 < 0.01)。  结论  Na+, K+-ATP酶活性下降可能源于β₁亚单位表达下调, 并参与结直肠癌的耐药; 哇巴因能部分逆转结直肠癌耐药细胞MDR, 可能与增加Na+, K+-ATP酶活性及下调P-gp表达有关。      

腹腔镜肝切除与射频消融治疗肝细胞癌疗效的荟萃分析

目的:比较腹腔镜肝切除术(LH)与射频消融(RFA)治疗肝细胞癌的疗效与安全性。方法:在PubMed、Web of Science、Embase、维普、万方、中国知网等电子数据库检索腹腔镜肝切除与射频消融治疗肝细胞癌的相关文献。检索日期为建库至2021年6月7日。根据纳入排除标准,由2位作者分别进行数据提取,并使用Re...     

Oct4基因沉默对结直肠癌细胞凋亡的诱导作用及机制研究

目的 探讨Oct4基因沉默对人结直肠癌SW480细胞凋亡的影响及其可能机制.方法 将对数生长期SW480细胞分为3组.①空白对照(Con)组:不转染病毒;②阴性对照(NC)组:转染阴性对照病毒;③RNA干扰(RNAi)组:转染Oct4-shRNA慢病毒载体.采用实时荧光定量PCR检测Oct4 mRNA表达;采用Western blotting检测Oct4、p-Akt 蛋白表达;采用流式细胞仪测定Oct4+及CD44+细胞比例变化及肿瘤细胞凋亡情况.结果 与NC组比较,RNAi组Oct4 的mRNA(分别为1.00和0.19±0.02)和蛋白(分别为0.032±0.004和0.007±0.001)表达量均有明显下降(P＜0.0l),Oct4+细胞比例(分别为91.53％和10.70％)和CD44+细胞比例(分别为59.69％和23.58％)明显减少,p-Akt蛋白表达明显受抑(0.11+0.03和0.03±0.01),细胞凋亡明显增加(分别为l2.1％±1.8％和43.2％±4.5％,P＜0.01).结论 沉默Oct4基因可明显减少SW480细胞中Oct4+及CD44+细胞比例,增加细胞凋亡,其作用可能与PI3K/Akt通路有关.     

沉默miR-8063促进结直肠癌细胞获得多药耐药性及机制研究北大核心CSCD

目的:探讨沉默miR-8063促进结直肠癌SW480、HT29细胞多药耐药性及分子机制。方法:分别采用miR-8063-inhibitor-GFP-PURO慢病毒载体和阴性对照病毒(NC-GFP-PURO)转染SW480、HT29细胞,建立实验组(SW480-sh-miR-8063、HT29-sh-miR-8063)和对照组(SW480-sh-NC、HT9-sh-NC),RT-qPCR检测miR-8063表达;CCK-8测定5-氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(OXA)对两组细胞24 h、48 h及72 h的生长抑制率;RT-qPCR和Western blot检测耐药基因P-gp、ABCG2 mRNA和蛋白表达;Western blot检测WNT/β-catenin信号通路关键指标WNT3A、WNT5A及β-catenin蛋白表达。结果:与对照组相比,实验组miR-8063基因表达显著降低(P<0.01),48 h、72 h时5-FU和OXA对细胞的抑制率显著降低(P<0.01),耐药基因P-gp、ABCG2 mRNA及蛋白表达显著提高(P<0.01),WNT3A、WNT5A及β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:沉默miR-8063基因可促进CRC细胞耐药基因P-gp、ABCG2表达,使CRC细胞SW480和HT29获得多药耐药性,其分子机制可能与激活WNT/β-catenin信号通路有关。     

人结直肠癌耐奥沙利铂细胞株的建立及特性

目的建立人结直肠癌耐奥沙利铂细胞株,检测该细胞株的多药耐药性及其可能的机制。方法在人结直肠癌细胞株SW480（亲本细胞）的培养液中,逐渐提高化疗药物奥沙利铂（Oxa）浓度,建立稳定的耐药细胞株（SW480/OxR）,采用细胞增殖试剂WST-1检测细胞对化疗药物Oxa和5-FU的敏感性;实时荧光定量PCR检测MDR-1、Survivin及Oct4的mRNA表达水平;流式间接法检测P-gp、Survivin蛋白阳性细胞比例;Western blot方法检测Oct4蛋白表达。结果 WST-1检测细胞增殖结果为：耐药细胞加药（Oxa及5-FU）72h后细胞数量变化不大（P〉0.05）;耐药细胞MDR-1、Survivin和Oct4的mRNA水平,P-gp＋及Survivin＋细胞比例以及Oct4蛋白水平均明显高于亲本细胞（P〈0.01）。结论耐药细胞具有多药耐药特性,可能与高表达耐药蛋白P-gp、抗凋亡蛋白Survivin及干细胞转录因子Oct4有关。