兔骨膜细胞分离培养的方法改进

BACKGROUND:Periosteum is considered as a source of seed cells for cell therapy due to its biological features. OBJECTIVE:To seek the optimal way to isolate and culture rabbit periosteal cells and identify their biological features. METHODS: Rabbit periosteum on facies medialis tibiae was taken out under aseptic conditions. Periosteal cells isolated through the digestion of type II collagenase with the explants culture method were cultured in DMEM/F12 complete medium. Cell ultrastructure was observed under an inverted microscope. Periosteal cell proliferation was determined by cell counting kit-8 assay. Cell surface antigens CD90 and CD105 were determined using flow cytometry. Osteogenic and lipogenic induction mediums were applied to induce periosteal cells to differentiate into osteocytes and adipocytes, respectively. After 2 weeks of induction, cells were harvested for alizarin red staining and oil red O staining to assay the calcium nodules and lipid droplet. RESULTS AND CONCLUSION:The digestion of type II collagenase with the explants culture method shortened the period of primary cells culture and enhanced the survival rate, which caused higher purity and stronger reproductive activity of harvested periosteal cells. Primary cultured periosteal cells grew in form of spindle spiral or parallel. Alizarin red and Oil red O staining verified the multi-directional differentiation potentiality of periosteal cells. These findings suggest that the periosteal cells with high purity, strong reproductive activity, and multi-directional differentiation potentiality can be harvested in short time using digestion of type II collagenase with the explants culture method.     

弹性髓内钉与接骨板内固定治疗成人盖氏骨折的对照研究

目的探讨钛制弹性髓内钉微创内固定与切开复位接骨板内固定治疗成人盖氏骨折的疗效差异。方法采用前瞻性队列研究方法,将2012年1月—2015年11月收治并符合选择标准的97例盖氏骨折患者分为两组,其中59例采用切开复位接骨板内固定(接骨板组),38例采用微创钛制弹性髓内钉内固定(微创组)。两组患者性别、年龄、致伤原因、骨折部位、骨折类型及受伤至手术时间等一般资料比较差异无统计学意义(P0.05)。记录两组手术时间、术中出血量、骨折愈合时间及并发症发生情况,采用Anderson评分标准评估前臂功能。结果两组患者均获随访,随访时间12～23个月,平均17个月。微创组患者手术时间、术中出血量、骨折愈合时间均显著少于接骨板组,差异有统计学意义(P0.05)。接骨板组发生骨折不愈合1例、伤口感染1例,微创组发生钉尾处轻微感染1例,均经相应处理后治愈;其余患者骨折均愈合,无血管神经损伤、内固定失败、深部感染等并发症发生。术后12个月根据Anderson评分评价前臂功能,接骨板组获优46例,良12例,差1例,优良率98.3%;微创组获优26例,良11例,可1例,优良率97.4%;两者比较差异无统计学意义(χ~2=0.10,P=0.75)。结论钛制弹性髓内钉内固定治疗盖氏骨折具有损伤小、恢复快、无切口瘢痕等优点,在适应证选择正确的基础上,可获较好临床效果。     

钛制弹性髓内钉结合夹板弹力带固定治疗肱骨干骨折

肱骨干骨折系指肱骨外科颈以下2 cm至肱骨髁上2 cm之间的骨折,约占全身骨折总数的1.31%。2005—2009年,笔者采用钛制弹性髓内钉结合夹板弹力带固定治疗肱骨干骨折患者78例,取得了满意的疗效,现报告如下。1临床资料本组78例,男56例,女22例。年龄15～78岁,平均45岁。均为新鲜肱骨干骨折。按AO骨折分型:A型43例,B型30例,C型5例。受伤至治疗时     

骨碎补通过骨髓间充质干细胞调节RANKL/OPG抑制破骨细胞的实验研究

目的　研究骨碎补对绝经后骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)RANKL/OPG及破骨细胞分化成熟的影响并探查其可能的作用机制。方法 实验大鼠去双侧卵巢造模,分为实验组（OVXDF,造模+骨碎补水煎液灌胃）、模型组（OVX,造模+0.9%生理盐水灌胃）、假手术组（SHAM,假手术+0.9%生理盐水灌胃）,造模成功后提取BMSCs,将BMSCs和骨髓单核细胞共培养于Transwell小室的上室和下室,分为实验组+破骨细胞（OVXDF+OC）、模型组+破骨细胞（OVX+OC）、假手术组+破骨细胞（SHAM+OC）。下室加入破骨细胞诱导剂,倒置相差显微镜观察破骨细胞的分化成熟情况并计数,酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测下室培养液中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、RANKL的含量,并计算RANKL/OPG,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测BMSCs中Wnt10b、β-catenin、RANKL、OPG mRAN及蛋白表达并计算RANKL/OPG。结果 在共培养系统中,与去卵巢灌胃大鼠BMSCs共培养的破骨细胞（OVXDF+OC）数量较单纯模型组+破骨细胞（OVX+OC）明显减少（P＜0.05）。下室培养液OPG含量及共培养BMSCs中Wnt10b、β-catenin、OPG mRAN及蛋白表达模型组+破骨细胞（OVX+OC）最低,RANKL及RANKL/OPG最高,经骨碎补灌胃后（OVXDF+OC）培养液中OPG含量及BMSCs细胞中Wnt10b、β-catenin、OPG mRAN及蛋白表达明显升高,培养液及BMSCs细胞中RANKL及RANKL/OPG明显降低（P＜0.05）。结论 骨碎补可调节BMSCs细胞OPG、RANKL的表达,激活OPG/RANKL/RANK信号通路抑制破骨细胞的分化和成熟,此作用可能与BMSCs的Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。     

基于数据挖掘的中医药治疗原发性骨质疏松症用药规律分析

目的基于"中医传承辅助平台(V2.5)"挖掘分析中国知网(CNKI)中医药治疗原发性骨质疏松症(POP)方剂的用药规律。方法在收集方剂的基础上,基于"中医传承辅助平台(V2.5)"构建数据库,通过软件的频次分析、关联性规则及聚类分析等,分析方剂中单味药物频次、四气、五味、归经、药物组合频次、关联规则及核心药物组合等。结果研究共纳入112首方剂,使用药物频次排名前3位的依次为淫羊藿、熟地黄、骨碎补;药性以温、平为主,药味多甘、苦、辛,多入肝、肾经;常用的药物组合为熟地黄-淫羊藿,关联药物置信度最高的药物组合为山茱萸→熟地黄;演化得到7个新方。结论中医药治疗POP用药以补益肝肾、强壮筋骨药居多,与其基本病机相呼应,运用数据挖掘技术可以发现中医药治疗POP组方配伍规律,得出新方,从而为临床提供一定依据。     

成人肱骨近端骨折的手术治疗进展

正肱骨近端骨折(Proximal Humerus Fractures,PHF)占全身骨折的6%,多见于老年女性,在四肢骨折中,其发病率仅位于桡骨远端骨折、股骨颈骨折之后~([1]),对其治疗方法一直存有较大争议。目前比较公认的保守治疗的指征是:骨折断端无明显移位、稳定的肱骨大结节移位5mm的骨折,而对于移位明显的三、四部分骨折则多采用手术治疗。手术方法众多,主要有髓内固定、钢板固定、关节置换等,既往手术治疗     

锁定重建接骨板治疗复杂性肩胛骨体部骨折

目的：探讨经改良后侧入路应用重建锁定接骨板固定肩胛骨体部骨折的方法和疗效。方法：2005年8月至2009年11月应用锁定重建接骨板治疗复杂性肩胛骨骨折27例,男19例,女8例;年龄16～64岁,平均36岁;伤后就诊时间0.5h～11d,平均3d。其中合并同侧锁骨骨折9例,肩锁关节脱位2例,多发肋骨骨折16例,肱骨干骨折1例,胸腔积液、肺不张、肺挫伤等5例。术后随访肩关节功能恢复程度。结果：24例患者获得随访,时间2～35个月,平均19个月。按Hardegger肩关节功能评定标准,优15例,良7例,可2例。结论：经改良后侧入路利用锁定重建接骨板治疗复杂性肩胛骨体部骨折具有创伤小、暴露清楚、固定坚强可靠、可早期行关节功能活动等优点。