ICP-MS测定不同来源和不同产地透骨草25种无机元素及统计分析

目的:建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定透骨草中Be,Na,Mg,Al,K,Ca,V,Cr,Mn,Fe,Co,Ni,Cu,Zn,As,Se等25种无机元素的含量快速分析方法。方法:采用微波消解法处理样品,ICP-MS法,对18批次样品中25个无机元素进行测定,通过Mass Profiler Professional(MPP),MPP软件对测定结果进行主成分分析和聚类分析。结果:各元素回归方程相关系数均0.999,加样回收率为91.1%~106.3%;不同来源、不同产地透骨草无机元素含量有较大差异,各元素随原子序数顺序呈现有规律的波浪式分布,其平均含量按由高到低的顺序前5位的依次是K(19 970.00μg·g~(-1)),Ca(15 709.00μg·g~(-1)),Mg(3 531.50μg·g~(-1)),Al(1 755.50μg·g~(-1)),Fe(1 021.00μg·g~(-1));主成分分析结果表明Be,Na,Al,Cr,Mn,Fe,Co,Zn,As,Ba,Tl,U为透骨草的特征无机元素;聚类分析将18批样品聚为2大类,广布野豌豆聚成一类;其他5种来源野豌豆聚成一类,说明广布野豌豆与其他5种野豌豆亲缘关系较远。结论:该法灵敏度高、准确性好,能同时检测多种无机元素,为中药透骨草药材的有效性、安全性评价及质量标准制订提供实验依据。     

UPLC测定狭山野豌豆中6种化学成分的含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定狭山野豌豆中6种成分(绿原酸、杨梅苷、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷)的含量测定方法。方法:采用Eclipse Plus C18RRHD色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),以乙腈(B)-0.1%甲酸溶液(A)为流动相进行梯度洗脱(0~7 min,5%~10%B;7~11 min,10%~12%B;11~20 min,12%B;20~25 min,12%~19%B;25~30 min,19%~24%B),流速0.2 m L·min-1,检测波长340 nm,柱温30℃。结果:狭山野豌豆中6个成分在线性范围内呈现良好的线性关系,r0.999 9,回收率均在99.15%~101.98%,RSD 0.7%~1.7%。结论:该方法操作简便、精确,稳定性重复性好,可用于同时测定狭山野豌豆中6种化学成分的含量,为狭山野豌豆的质量控制提供依据。     

透骨草药材UPLC指纹图谱研究

目的建立透骨草药材来源中狭山野豌豆Vicia amoena超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并与其余5种来源品种进行比较,为透骨草药材质量控制提供参考依据。方法用Eclipse Plus C_(18) RRHD(50 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,体积流量0.2 m L/min;柱温30℃;检测波长340 nm。测定10个不同产地狭山野豌豆指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰;同条件下比较鉴别透骨草药材其他5种来源品种。结果建立了狭山野豌豆指纹图谱,采用超高效液相色谱-电喷雾-四级杆-飞行时间串联质谱仪(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)对14个共有峰中的6个峰进行初步归属,确定为绿原酸、杨梅苷、金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷;透骨草药材其他5种来源品种与狭山野豌豆指纹图谱的共有模式明显不同。结论该方法重现性好、特征性强,可用于透骨草药材全面质量评价。     

1186例男性不育患者实验室检查结果及病因分析

目的结合新的实验室诊断方法,探讨男性不育患者可能病因,为临床治疗提供更多真实可靠的依据和选择。方法对2004年3月—2005年3月男科门诊收治的男性不育患者按WHO流程图进行诊断分析,在精液常规分析基础上,进一步合理选择精浆生化检测、血清性激素检测、生殖道感染的检测与睾丸活检等检查。结果无精子症10.9%,少精子症21.2%,精浆AsAb阳性7.1%,弱精子症52.7%。结论性功能障碍引起的不育症比例下降,反映人们性观念的进步;弱精子症占男子不育症比例上升最快,其病因和治疗值得探讨;免疫性不育症呈上升趋势,合并的鼻系疾病值得重视。      

动物类中药DNA条形码鉴定研究进展

DNA基因鉴定是近年来应用在中药鉴定中较为重要的分子生物技术,该技术能够很好地从基因层面上鉴别药材,具有较高的准确性。DNA基因鉴定包括DNA分子遗传标记,核酸探针杂交,DNA条形码分子鉴定法等,其中发展最快的为DNA条形码分子鉴定法。DNA条形码分子鉴定法是利用基因组中一段公认的、相对较短的DNA序列来进行物种鉴定的一种分子生物学技术,是传统形态鉴别方法的有效补充。由于不同物种的DNA序列是由腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胞嘧啶(C),胸腺嘧啶(T)4种碱基以不同顺序排列组成,因此对某一特定DNA片段序列进行分析即能够区分不同物种。Hebert等在2003年提出了通过测定线粒体细胞色素C氧化亚基I(COI)基因序列来鉴定动物的种类。陈士林等则在大量实验的基础上提出了鉴别动物的基因以COI基因为主,ITS2基因为辅的动物类药材DNA条形码鉴定体系。大量的实验表明,通过DNA条形码来鉴别动物具有准确性、可行性、简便性、通用性,为鉴别动物物种及发现新物种提供了新的方法,为鉴别动物药材的真伪提供了科学的依据。但由于该技术是通过基因进行鉴定,对实验材料及提取方法有较高要求,对一些年代较久的动物药材,其DNA降解较为严重,为DNA提取技术提出了较高的要求;该技术只能鉴别其来源是否准确却不能鉴别其药用部位是否准确,这就需要结合其他鉴别方法来准确鉴别其药用部位。本文通过综合国内外对DNA条形码的研究,为日后的研究和应用提供理论依据。     

基于色差原理分析茅苍术、北苍术有效成分含量与颜色的相关性

探索茅苍术、北苍术药材粉末三色空间值ΔL^*(亮度)、Δa^*(红绿)、Δb^*(黄蓝)与内在倍半萜类、聚炔类等4种有效成分含量的相关性，为苍术质量评价提供参考，并建立基于色度量化值的可区分茅苍术、北苍术的定性识别模型。采用色差仪测定23批茅苍术、北苍术的三色空间值(明暗色度值L^*、红绿色度值a^*、黄蓝色度值b^*);采用高效液相色谱法测定23批药材样品中白术内酯Ⅱ、β-桉叶醇、苍术素、苍术酮4种有效成分的含量；采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),以三色空间值为对象，建立区分茅苍术、北苍术的定性识别模型；通过SPSS,对色度值与上述4种指标成分含量进行相关性分析。结果显示，构建的PCA和PLS-DA识别模型可以将茅苍术与北苍术分成2个区域，茅苍术、北苍术的颜色与β-桉叶醇、苍术素等成分含量具有正相关性。因此，所构建的PCA和PLS-DA模型可以成功鉴别茅苍术与北苍术，其外观色泽可快速预测苍术药材内在品质。此研究对苍术的质量评价研究，以及...