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目的克隆地黄Rehmanniaglutinosa毛蕊花糖苷合酶基因(Rg Ac S1),分析其亚细胞定位和表达模式。方法在地黄的转录组数据库中通过注释和比对,获得地黄Rg Ac S1的c DNA序列,利用聚合酶链式反应(PCR)方法进行分子克隆。构建绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,以农杆菌瞬时表达法观测Rg Ac S1的亚细胞定位。利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测Rg Ac S1基因在地黄块根不同部位的表达模式。结果获得地黄1个莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的全长编码序列,c DNA长度为1 659 bp,包含1个1 296 bp的开放阅读框,编码431个氨基酸残基,蛋白质相对分子质量为475 900,具有莽草酸-O-羟基肉桂酰基转移酶的典型结构域,命名为Rg Ac S1。亚细胞定位结果显示Rg Ac S1主要分布在细胞质中,在细胞核中也有分布。q RT-PCR分析表明,Rg Ac S1在地黄的周皮和根毛中表达量较高,在木质部和韧皮部表达量较低。Rg Ac S1基因在地黄品种北京1号、QH1和85-5中非菊花心中表达量均高于菊花心中的表达量,且差异达极显著水平。结论获得地黄Rg Ac S1的c DNA序列,明确了Rg Ac S1的亚细胞定位和时空表达模式,为进一步研究Rg Ac S1基因在毛蕊花糖苷合成过程中的作用奠定基础。 相似文献
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地黄为玄参科药用植物,具有重要的药用价值。为了有效发掘地黄的转录组信息,鉴定参与苯乙醇苷(PhGs)类成分生物合成的催化酶基因,本研究以地黄的叶、茎和块根为材料利用Pacific Biosiences RS Ⅱ平台进行测序。共获得非冗余的转录本27 773条,平均长度2 380 bp,预测出27 236个蛋白编码序列(CDS:coding sequence)。利用BLAST等软件在NR、NT、GO、COG、KEGG、Swissprot和Interpro等数据库共预测到27 399个注释的基因。NR注释表明,与地黄转录本匹配数量最多的是芝麻(Sesamum indicum),有81.44%,这与它们进化上的亲缘关系一致。推测了参与异毛蕊花糖苷、松果菊苷、肉苁蓉苷A、肉苁蓉苷F、2′-乙酰毛蕊花糖苷和leonoside F生物合成的催化酶,并鉴定出143个参与苯乙醇苷类成分生物合成的转录本。19个催化酶基因在地黄12个组织中与毛蕊花糖苷的含量呈正相关,其中多数基因在叶和花中具有较高的表达量。研究结果为地黄功能基因的挖掘提供了可靠的转录组数据,为苯乙醇苷类成分生物合成的分子机制研究提供了依据... 相似文献
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目的:观察人工髋关节置换术围术期行人性化心理护理对患者预后的影响。方法:选取2013年4月一2014年4月在本院进行人工髋关节置换术的82例围术期患者,将其随机分为研究组和对照组,每组均为41侧,对照组行常规心理护理,研究组在对照组基础上行人性化心理护理,观察两组的临床护理效果以及术后并发症情况。结果:研究组的临床护理效果明显优于对照组,且研究组的术后并发症发生率7.32%比对照纽31.71%低,两组差异较为明显(P〈0.05)。结论:人工髋关节置换术围术期行人性化心理护理可以有效缓解患者的不良情绪,降低并发症发生率,值得临床推广。 相似文献
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基因编辑是一项能够在生物体基因组水平上实现对DNA序列精确定向修饰的新技术。该技术主要利用序列特异性核酸酶靶向识别切割基因组上目标位点,造成DNA双链断裂(DSBs),进一步诱发非同源末端连接(NHEJ)和同源性重组(HR)2种修复机制对断裂的DNA双链进行修复,实现修复位点碱基的插入、缺失和替换,从而达到对靶基因精确编辑的目的。对基因编辑技术的类型、作用原理及该技术在植物领域中的应用进行综述,并对基因编辑技术在药用植物功能基因组学和遗传改良中的应用前景进行展望。 相似文献
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目的:探讨并构建科学、客观、系统的“互联网+”背景下社区上门护士的培训方案,用于指导社区护理实践。方法:在文献检索的基础上,编制专家函询问卷,采用德尔菲法对12名从事临床护理、护理管理、护理教育、社区护理的专家进行2轮函询。结果:2轮专家函询的问卷回收率分别为91.67%和100%,专家权威系数为0.88,熟悉系数为0.91,判断系数为0.85,2轮的和谐系数(Kendall’s W)经检验差异有统计学意义(P<0.001)。通过德尔菲专家函询,最终确立社区上门护士培训方案,一级指标8个、二级指标57个。结论:专家对基于“互联网+”的社区上门护士培训方案的函询意见趋于一致,专家权威性和积极性较高,结果科学可靠,为今后“上门护士”平台的全面发展提供参考和指导。 相似文献
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目的了解河北省三甲医院护士对多点执业的认知及从业意愿,为护士多点执业的进一步发展提供参考。方法采用分层抽样的方法对河北省4所三甲医院的915名护士进行问卷调查。结果62.19%的护士有多点执业的意愿;对多点执业的了解渠道、认为外界对多点执业的评价、护士多点执业的前景认知不同,差异均具有统计学意义(P<0.05);多点执业时,护士最担忧的是人身安全问题;护士的人身安全得不到保障是制约护士从业意愿的主要因素。结论多数三甲医院护士支持多点执业;建议相关部门健全相关政策制度,明确多点执业准入标准,完善医疗风险保障体系,改革医院管理模式,为护士多点执业提供有力保障。 相似文献
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